牛白蛋白ELISA試劑盒是一種用于定量牛血清白蛋白的夾心免疫測(cè)定試劑盒蛋白質(zhì)或抗體樣品、重組蛋白、細(xì)胞提取物中的血清白蛋白（BSA），培養(yǎng)細(xì)胞、培養(yǎng)基或任何其他暴露于牛的生物樣本血清或胎牛血清，并且可能含有痕量的BSA（宿主細(xì)胞蛋白或HCP）。到期由于試劑盒的高靈敏度和血清中白蛋白的高濃度，該試劑盒可能不會(huì)適用于測(cè)量血清中的白蛋白，或在BSA可能普遍存在的情況下，如測(cè)試環(huán)境中的污染物。建議使用ADI ELISA試劑盒#8000作為用于測(cè)量血清或其他含有高BSA的樣本中BSA的替代方法

濃度。此套件僅供研究使用。

作為Alpha Diagnostic International（ADI）在中國(guó)的區(qū)域總代理，艾美捷科技強(qiáng)烈推薦Alpha Diagnostic International（ADI）熱銷產(chǎn)品牛白蛋白 （BSA） ELISA 試劑盒，96 次檢測(cè)，定量（用于測(cè)量蛋白質(zhì)/抗體樣品中的殘留 BSA，不建議用于測(cè)量血清中的 BSA）。產(chǎn)品僅用于科研，不可用于臨床診斷。

牛白蛋白 （BSA） ELISA 試劑盒，96 次檢測(cè)，定量（用于測(cè)量蛋白質(zhì)/抗體樣品中的殘留 BSA，不建議用于測(cè)量血清中的 BSA）檢測(cè)原理：

牛白蛋白ELISA試劑盒基于樣品中牛白蛋白與兩種抗體的結(jié)合抗體，一種固定在微量滴定孔上，另一種與辣根結(jié)合過氧化物酶（HRP）。洗滌步驟后，加入顯色底物并著色由HRP在TMB底物上的酶反應(yīng)產(chǎn)生，直接與樣品中存在的BSA的量成比例。停止解決方案已添加到終止反應(yīng)，然后使用ELISA微量滴定儀測(cè)量450nm處的吸光度好讀者。樣品中BSA的濃度根據(jù)以下標(biāo)準(zhǔn)曲線計(jì)算指定濃度的純化牛白蛋白。

特異性

本試劑盒中使用的抗體已經(jīng)通過免疫電泳和ELISA驗(yàn)證，能夠特異性地與牛血清白蛋白（BSA）反應(yīng)，并且與其他牛血清蛋白幾乎沒有反應(yīng)。

在1%血清濃度下，以下動(dòng)物血清的檢測(cè)結(jié)果顯示反應(yīng)性低于5 ng/ml：人類、猴子、綿羊、山羊、兔子、倉(cāng)鼠、小鼠。

標(biāo)準(zhǔn)品值的賦予

試劑盒中的標(biāo)準(zhǔn)品濃度已根據(jù)Sigma Chemical的BSA標(biāo)準(zhǔn)品（貨號(hào)P0914）和Thermo Scientific的BSA標(biāo)準(zhǔn)品（貨號(hào)23209）進(jìn)行校準(zhǔn)，后者是NIST BSA #927e的二級(jí)參考。

靈敏度

基于13個(gè)重復(fù)樣本在3次運(yùn)行中的檢測(cè)結(jié)果，0.5ng/ml樣本的3個(gè)標(biāo)準(zhǔn)差范圍與陰性樣本稀釋液的3個(gè)標(biāo)準(zhǔn)差范圍沒有重疊。因此，牛血清白蛋白ELISA的靈敏度可以認(rèn)為是250-500 pg/ml。

正常范圍

對(duì)來自四個(gè)不同來源的胎牛血清進(jìn)行檢測(cè)，顯示白蛋白濃度范圍為6.9至15.2 mg/ml。

精確度

含有低濃度和中等濃度BSA的樣本在多次檢測(cè)（n=5）中作為復(fù)制品進(jìn)行檢測(cè)，以獲得檢測(cè)間的可重復(fù)性。使用點(diǎn)對(duì)點(diǎn)曲線擬合程序計(jì)算濃度的變異系數(shù)（CVs）。BSA濃度的測(cè)量顯示出良好的檢測(cè)間（5.7至9.7% CV）可重復(fù)性。

結(jié)果計(jì)算

可以使用任何免疫分析軟件包來計(jì)算結(jié)果。推薦使用四參數(shù)曲線擬合。如果沒有軟件，可以按照以下方法確定牛血清白蛋白濃度：

1. 計(jì)算復(fù)制樣本的平均OD值。

2. 在坐標(biāo)紙上，將標(biāo)準(zhǔn)品的平均OD值（y軸）與牛血清白蛋白的濃度（ng/ml）（x軸）繪制出來。通過這些點(diǎn)繪制最佳擬合曲線以構(gòu)建標(biāo)準(zhǔn)曲線。點(diǎn)對(duì)點(diǎn)構(gòu)建是最常見和可靠的方法。

3. 通過標(biāo)準(zhǔn)曲線插值確定未知樣本和對(duì)照品中的牛血清白蛋白濃度。

4. 將樣本獲得的值乘以每個(gè)樣本的稀釋因子。

5. 產(chǎn)生信號(hào)高于80 ng/ml標(biāo)準(zhǔn)品的樣本應(yīng)進(jìn)一步稀釋并重新檢測(cè)。

Alpha Diagnostic International（ADI）公司于1993年成立， 是一家美國(guó)私營(yíng)生物技術(shù)公司，總部位于德克薩斯州圣安東尼奧，具有USDA認(rèn)證的動(dòng)物試驗(yàn)設(shè)施。公司致力于開發(fā)、制造和供應(yīng)新型診斷和質(zhì)量控制試劑及檢測(cè)試劑盒，用于人類和動(dòng)物的基礎(chǔ)生物學(xué)和疾病研究。同時(shí)，還提供多肽合成定制服務(wù)和多抗產(chǎn)品以及其他抗體相關(guān)服務(wù)，例如純化親和素，酶耦聯(lián)物，染料，熒光染料等。ADI旨在準(zhǔn)確了解科學(xué)研究人員和診斷測(cè)試界的需求，并迅速提供有效的解決方案，成為科學(xué)界值得信賴的創(chuàng)新試劑和解決方案提供商。

艾美捷科技是Alpha Diagnostic International（ADI）的中國(guó)代理商，為科研工作者提供優(yōu)質(zhì)的產(chǎn)品與服務(wù)。