【前情回顧】Cas9蛋白定量檢測(cè)試劑盒解決方案

說(shuō)起DNA編輯，你會(huì)想到CRISPR/Cas9，那RNA編輯呢？今天就帶大家認(rèn)識(shí)一下RNA剪刀手CRISPR/Cas13a。

2017年10月，張鋒實(shí)驗(yàn)室首先證實(shí)CRISPR/Casl3a可靶向編輯哺乳動(dòng)物體內(nèi)RNA。比起RNAi，Casl3a有著更強(qiáng)的特異性，并且由于其對(duì)哺乳動(dòng)物細(xì)胞而言是非內(nèi)源性的，因此擾亂細(xì)胞中天然的轉(zhuǎn)錄后網(wǎng)絡(luò)的可能性極低。大家都知道，Cas9是利用tracrRNA和crRNA來(lái)實(shí)現(xiàn)與DNA目標(biāo)的結(jié)合和切割。不過(guò)，Cas13a（也叫C2c2）只需要24個(gè)堿基的crRNA，它通過(guò)富含尿嘧啶的莖環(huán)結(jié)構(gòu)與Cas13a分子相互作用，并通過(guò)Cas13a的一系列構(gòu)象變化來(lái)促進(jìn)RNA目標(biāo)的切割。

Cas13a是VI型CRISPR-Cas系統(tǒng)效應(yīng)蛋白，具有RNA介導(dǎo)的RNA酶切活性能靶向并切割與crRNA互補(bǔ)的RNA，該編輯系統(tǒng)作為一種新興的治療和診斷工具，在病毒性疾病和癌癥等領(lǐng)域受到越來(lái)越多的關(guān)注。

如何快速有效的實(shí)現(xiàn)Cas13a蛋白的定量檢測(cè)，作為專業(yè)的生命科學(xué)醫(yī)藥原料供應(yīng)商，Cell Biolabs中國(guó)區(qū)金牌代理，艾美捷為您推薦：Cas13a蛋白ELISA檢測(cè)試劑盒，實(shí)現(xiàn)Cas13a蛋白的定量檢測(cè)。

Cas13a 蛋白ELSIA檢測(cè)試劑盒實(shí)驗(yàn)結(jié)果：

圖1. Cas13a標(biāo)準(zhǔn)曲線

圖2. 純化的Cas13a重組蛋白。 泳道 1：SeeBlue Plus2 MW 標(biāo)準(zhǔn)品； 泳道2：重組的Cas13a蛋白。

重組的Cas13a蛋白的序列（下劃線部分是用來(lái)免疫生產(chǎn)試劑盒抗體的序列）：

MGNLFGHKRWYEVRDKKDFKIKRKVKVKRNYDGNKYILNINENNNKEKIDNNKFIRKYINYKKNDNIL KEFTRKFHAGNILFKLKGKEGIIRIENNDDFLETEEVVLYIEAYGKSEKLKALGITKKKIIDEAIRQG ITKDDKKIEIKRQENEEEIEIDIRDEYTNKTLNDCSIILRIIENDELETKKSIYEIFKNINMSLYKII EKIIENETEKVFENRYYEEHLREKLLKDDKIDVILTNFMEIREKIKSNLEILGFVKFYLNVGGDKKKS KNKKMLVEKILNINVDLTVEDIADFVIKELEFWNITKRIEKVKKVNNEFLEKRRNRTYIKSYVLLDKH EKFKIERENKKDKIVKFFVENIKNNSIKEKIEKILAEFKIDELIKKLEKELKKGNCDTEIFGIFKKHY KVNFDSKKFSKKSDEEKELYKIIYRYLKGRIEKILVNEQKVRLKKMEKIEIEKILNESILSEKILKRV KQYTLEHIMYLGKLRHNDIDMTTVNTDDFSRLHAKEELDLELITFFASTNMELNKIFSRENINNDENI DFFGGDREKNYVLDKKILNSKIKIIRDLDFIDNKNNITNNFIRKFTKIGTNERNRILHAISKERDLQG TQDDYNKVINIIQNLKISDEEVSKALNLDVVFKDKKNIITKINDIKISEENNNDIKYLPSFSKVLPEI LNLYRNNPKNEPFDTIETEKIVLNALIYVNKELYKKLILEDDLEENESKNIFLQELKKTLGNIDEIDE NIIENYYKNAQISASKGNNKAIKKYQKKVIECYIGYLRKNYEELFDFSDFKMNIQEIKKQIKDINDNK TYERITVKTSDKTIVINDDFEYIISIFALLNSNAVINKIRNRFFATSVWLNTSEYQNIIDILDEIMQL NTLRNECITENWNLNLEEFIQKMKEIEKDFDDFKIQTKKEIFNNYYEDIKNNILTEFKDDINGCDVLE KKLEKIVIFDDETKFEIDKKSNILQDEQRKLSNINKKDLKKKVDQYIKDKDQEIKSKILCRIIFNSDF LKKYKKEIDNLIEDMESENENKFQEIYYPKERKNELYIYKKNLFLNIGNPNFDKIYGLISNDIKMADA KFLFNIDGKNIRKNKISEIDAILKNLNDKLNGYSKEYKEKYIKKLKENDDFFAKNIQNKNYKSFEKDY NRVSEYKKIRDLVEFNYLNKIESYLIDINWKLAIQMARFERDMHYIVNGLRELGIIKLSGYNTGISRA YPKRNGSDGFYTTTAYYKFFDEESYKKFEKICYGFGIDLSENSEINKPENESIRNYISHFYIVRNPFA DYSIAEQIDRVSNLLSYSTRYNNSTYASVFEVFKKDVNLDYDELKKKFKLIGNNDILERLMKPKKVSV LELESYNSDYIKNLIIELLTKIENTNDTL

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