膜性腎病（MN）是一種由腎小球上皮下顆粒狀免疫復(fù)合物沉積引起的疾病腎臟基底膜（GBM）。MN在人類中的發(fā)病機制尚不清楚；然而，據(jù)信它與其他疾病，如系統(tǒng)性紅斑狼瘡、肝炎和癌癥。作為人類MN疾病模型，免疫復(fù)合物每天靜脈注射2mg陽離子牛血清白蛋白（cBSA）可誘導(dǎo)大鼠腎小球腎炎（ICGN）持續(xù)4周（1）。帶正電的cBSA已被證明能有效誘導(dǎo)ICGN，因為它能夠穿透并結(jié)合在腎臟的GBM中發(fā)現(xiàn)的固定帶負(fù)電荷的位點（2-4）。此外，通過注射cBSA建立的ICGN動物模型已經(jīng)在狗、貓、兔子和小鼠中成功建立。

Chondrex 提供了用于在近交系Balb/c和遠(yuǎn)交系ICR小鼠中誘導(dǎo)ICGN的cBSA（Cat#9058）。小鼠尿白蛋白檢測ELISA試劑盒（Cat#3012）是評估ICGN嚴(yán)重程度的最有效方法，因為ICGN的典型癥狀是蛋白尿。或者BPB蛋白檢測試劑盒（目錄號6026）用于評估蛋白尿，肌酐檢測試劑盒蛋白尿或蛋白尿量。

艾美捷Chondrex陽離子牛血清白蛋白（cBSA）：

貨號：9058

描述：化學(xué)修飾的陽離子牛血清白蛋白。

應(yīng)用：用作免疫復(fù)合物誘導(dǎo)的腎小球腎炎（ICGN）在Balb/c和ICR小鼠中的免疫抗原。

數(shù)量：20 mg（0.05M磷酸鹽緩沖鹽水中2 mg/ml，10 ml）。

形式：溶液。

Chondrex陽離子牛血清白蛋白（cBSA）操作流程：

誘導(dǎo)小鼠ICGN的步驟：

動物選擇：選擇Balb/c和ICR小鼠（雄性或雌性，7-8周或更大）。對ICGN的敏感性可能因小鼠品系、動物供應(yīng)商或?qū)嶒炇以O(shè)施而異。

乳劑制備：使用2 mg/ml的陽離子BSA與等體積的完全弗洛因佐劑（Cat # 7008 - M. Tuberculosis，1 mg/ml）制成乳劑。

免疫接種：在小鼠尾部皮下注射0.1 ml乳劑（陽離子BSA：0.1 mg）。

腎炎誘導(dǎo)：在免疫接種后兩周，靜脈注射0.2 ml（400 ?g）陽離子BSA（2 mg/ml）溶液。每隔一天重復(fù)靜脈注射，總共進(jìn)行五次。

注意事項：

陽離子BSA的靜脈注射可能導(dǎo)致過敏反應(yīng)，這對小鼠可能致命。為避免此問題，使用緩慢靜脈注射（1 ml/min）或降低陽離子BSA的劑量和濃度。將陽離子BSA用PBS稀釋至適當(dāng)濃度。第一次注射使用50-100 ?g（0.5-1 ml的0.1 mg/ml陽離子BSA），第二次至第五次注射使用400 ?g（1 ml的0.4 mg/ml陽離子BSA）。

腎炎評估：

通過測定在16小時尿液收集期間排泄的白蛋白量（白蛋白尿）來評估腎炎的嚴(yán)重程度。推薦使用Chondrex Inc.的鼠白蛋白檢測ELISA試劑盒（Cat # 3012）。

存儲：在-20°C黑暗處保存。

穩(wěn)定性：可保存1年。

樣本數(shù)據(jù) – ICGN在ICR小鼠中的研究

1、研究使用了7-8周齡的ICR小鼠（雄性，Harlan，USA）。

2、在第0天，小鼠通過尾部皮下注射了100 ?g的cBSA，乳化劑為CFA（商品編號7008，結(jié)核分枝桿菌，濃度為1 mg/ml）。

3、在第14、16、18、20和22天，小鼠靜脈注射了400 ?g（0.2 ml，濃度為2 mg/ml）的cBSA。

4、使用代謝籠在16小時的尿液收集期間評估尿蛋白。

在小鼠中，在16小時的尿液收集期內(nèi)，白蛋白含量超過1毫克的白蛋白被認(rèn)為是蛋白尿。小鼠#1537死亡在第14天第一次靜脈注射cBSA后。小鼠#1536在第一次尿液采集后第24天死亡。小鼠#1535病情嚴(yán)重蛋白尿，在第32天達(dá)到峰值。

文獻(xiàn)參考：

1. T. Yamamoto, I. Kihara, T. Morita, T. Oite, Bovine serum albumin (BSA) nephritis in rats. I. The Experimental Model. Acta Pathol Jpn 28, 859-66 (1978).

2. T. Yamamoto, S. Miyazaki, K. Kawasaki, E. Yaoita, I. Kihara, Rat Bovine Serum Albumin (BSA) Nephritis. VI. The Influence of Chemically Altered Antigen. Clin Exp Immunol 65, 51-6 (1986).

3. W. Border, E. Kamil, H. Ward, A. Cohen, Antigenic changes as a determinant of immune complex localization in the rat glomerulus. Lab Invest 45, 442-9 (1981)

4. T. Oite, S. Batsford, M. Mihatsch, H. Takamiya, A. Vogt, Quantitative Studies of in Situ Immune Complex Glomerulonephritis in the Rat Induced by Planted, Cationized Antigen. J Exp Med 155, 460-74 (1982).

Chondrex 致力于開發(fā)和生產(chǎn)高純度膠原蛋白、抗膠原蛋白單克隆抗體和多種ELISA試劑盒等產(chǎn)品，為研究人員提供研究類風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎(Rheumatoid Arthritis ,RA)發(fā)病機制和篩選潛在治療方法所需的工具。艾美捷科技是Chondrex的中國代理商，為科研工作者提供優(yōu)質(zhì)的產(chǎn)品與服務(wù)。