外泌體（Exosome，Extracellular vesicles，EVs）是一類由細胞釋放到細胞外的小型膜包裹囊泡。它們起源于細胞內部的多種細胞器，如內質網、高爾基體和細胞膜，并通過融合或分泌途徑釋放到細胞外。外泌體的大小通常在30到150納米之間，具有豐富的蛋白質、核酸和脂質組成。

外泌體在細胞間的通訊和信號傳遞中起著重要作用。它們可以通過包裹和保護其內部的生物活性分子，如小RNA、mRNA、蛋白質和代謝產物，將這些分子傳遞到目標細胞。這種傳遞方式可以影響目標細胞的基因表達、蛋白質合成和細胞功能。因此，外泌體被認為是一種重要的細胞間通訊介質，參與了多種生理和病理過程，包括免疫調節(jié)、細胞增殖和凋亡、腫瘤轉移和神經系統(tǒng)功能。

近年來，外泌體的研究引起了廣泛的關注，因為它們具有潛在的臨床應用價值。外泌體可以作為生物標志物用于疾病的診斷、預后評估和治療反應監(jiān)測。此外，外泌體還可以被利用為藥物傳遞系統(tǒng)，通過修改其組成或表面標記物，將藥物有效地傳遞到特定的細胞或組織。總之，外泌體是細胞間通訊的重要媒介，對于理解細胞生物學和開發(fā)新的診斷和治療策略具有重要意義。

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本試劑盒基于自主研發(fā)的磁性顆粒，特異性捕獲外泌體而不吸附雜質，實現高純度、高回收率外泌體分離。具有操作簡便、高純度和高回收率等優(yōu)點，特別適用于血漿、血清等復雜樣本中的外泌體分離。分離的外泌體可用于WB分析、NTA或納米流式粒徑分析、電鏡檢測、組學研究、細胞和動物功能研究等。

試劑盒組分：

自備儀器、試劑與耗材

高速冷凍離心機

側擺搖床

1.5mL離心管

磁力架

超濾管（MWCO 10kDa）

使用方法

1、樣品預處理

1） 去除細胞。4℃，300g，離心 5min，轉移上清到新的離心管；

*對無細胞的樣品，可以跳過此步驟。

2） 去除細胞及細胞碎片。4℃，2000g，離心 10min，轉移上清到新的離心管；

3） 去除大體積顆粒。步驟 2）得到的上清，4℃，14000g，離心 30min，轉移上清到新的離心管。

2、富集外泌體

1）取經預處理后的樣品500μL（如果不足500μL，可用Solution A補足）到1.5mL離心管，加入10mg（加入量±10%均可） ExoMag Exosome Beads，離心管固定在側擺搖床上，17rpm，室溫旋轉孵育30min；

2）將上述離心管放置在磁力架上，靜置5s，棄上清；

3）加入1mL Solution A，上下顛倒混勻，置于磁力架上，靜置5s，棄上清；

4）重復上述步驟3）2次，保留磁顆粒。

3、分離外泌體

1）向磁顆粒中加入100μL Elution Buffer，渦旋振蕩30s；固定在側擺搖床上，17rpm，室溫旋轉30min；

2）置于磁力架上，靜置5s，轉移上清到新的1.5mL離心管，該上清為外泌體。

*外泌體不能長時間保存在Elution Buffer中。若長時間保存，使用超濾管（MWCO 10kDa）將溶液置換為PBS。

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