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特色產品一、產品概述
BLM(Bloom綜合征蛋白)是一種RecQ家族DNA解旋酶,在DNA復制與修復過程中發揮關鍵作用。BLM基因突變或功能失活可導致Bloom綜合征,臨床表現為侏儒癥、不孕、紅斑、學習障礙、免疫缺陷及癌癥易感性。研究表明,BLM參與構成BRCA1相關基因組監視復合體(BASC),該復合體包含BRCA1、MSH2、MSH6、MLH1、ATM、PMS2及RAD50-MRE11-NBS1蛋白復合物。
由艾美捷代理Bethyl Laboratories推出的本文介紹的兔抗BLM抗體親和純化(貨號A300-110A)由美國生產,經抗原親和純化,適用于小鼠及人源樣本的免疫沉淀(IP)和免疫印跡(WB)檢測。
二、核心規格參數
參數 | 詳細信
靶標 | BLM(Bloom綜合征蛋白)
反應性 | 小鼠,人
宿主 | 兔
克隆性 | 多克隆
形式 | 全IgG
免疫原 | 人BLM蛋白第1367位氨基酸至C末端區間
同型 | IgG
標記 | 非偶聯
純度 | 抗原親和純化
抗原物種 | 人
濃度 | 1000 ug/ml
儲存條件 | 2 - 8 °C
保質期 | 收貨后1年
緩沖液 | Tris-檸檬酸鹽/磷酸鹽緩沖液,pH 7-8,含0.09%疊氮化鈉
免疫原與識別表位
本抗體采用針對BLM蛋白表位特異性的親和純化方法制備。具體而言,將識別表位固定在固相支持物上,從抗血清中親和捕獲特異性抗體。
A300-110A所識別的表位位于人Bloom綜合征蛋白第1375位殘基至C末端(第1417位殘基)之間。編號依據NCBI參考序列NP_000048.1(GeneID 641)。
三、濃度測定方法
免疫球蛋白濃度采用比爾定律測定,其中1 mg/mL IgG在280 nm波長處的吸光度(A280)為1.4。
應用與實驗條件
通用說明
所有免疫印跡實驗均采用5%脫脂牛奶-TBST作為封閉液及抗體稀釋液。一抗孵育條件為過夜孵育。
推薦稀釋比例
應用 | 推薦稀釋比例/用量
免疫沉淀(IP) | 6 ug/mg 裂解物
免疫印跡(WB) | 1:2000 - 1:10000
二抗選擇說明
細胞裂解物免疫印跡:
使用山羊抗兔IgG重鏈和輕鏈抗體(貨號A120-101P)。
免疫沉淀產物的免疫印跡:
使用抗兔IgG輕鏈HRP偶聯抗體,并在封閉緩沖液中添加5%正常豬血清(貨號S100-020)。這一設計可有效避免免疫沉淀中變性釋放的重鏈和輕鏈信號干擾目標蛋白檢測。
四、產品使用與儲存
儲存注意事項
抗體應儲存于2 - 8°C。緩沖液中含有0.09%疊氮化鈉作為防腐劑,請勿冷凍,以免反復凍融導致抗體活性下降。
質量控制
每批次產品均經過抗原親和純化驗證,確保抗體特異性。生產過程中使用固定于固相支持物上的BLM特異性表位進行純化。
五、應用要點總結
1. 免疫沉淀:每mg細胞裂解物使用6 ug抗體,可有效富集BLM蛋白及其相互作用復合物。
2. 免疫印跡:推薦稀釋范圍1:2000至1:10000,建議根據具體樣本類型和表達水平進行梯度預實驗確定最佳稀釋度。
3. 交叉反應性:經驗證可識別小鼠和人源BLM蛋白,適用于跨物種研究。
4. 表位定位:抗體識別C末端區域(1375-1417位氨基酸),該區域在BLM功能調控中具有重要作用。
本抗體為研究BLM在DNA復制、修復及基因組穩定性維持中的功能提供了可靠工具,適用于癌癥發生機制、Bloom綜合征病理研究及藥物靶點驗證等實驗場景。
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