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一、產(chǎn)品概述
由艾美捷Bethyl Laboratories推出的本品為針對小鼠MafA蛋白的兔源多克隆抗體(貨號:A300-611A),經(jīng)抗原親和純化,適用于Western Blot(WB)檢測。MafA屬于含堿性亮氨酸拉鏈結(jié)構(gòu)的轉(zhuǎn)錄因子家族,在胰島β細(xì)胞中特異性高表達(dá),對胰島素基因的葡萄糖反應(yīng)性轉(zhuǎn)錄調(diào)控具有關(guān)鍵作用。
二、關(guān)鍵規(guī)格參數(shù)
參數(shù) | 詳細(xì)信息
靶標(biāo) | MafA
反應(yīng)性 | 小鼠
宿主 | 兔
克隆性 | 多克隆
免疫原 | 小鼠MafA蛋白第309位至C末端之間的區(qū)域
亞型 | IgG |
純化方式 | 抗原親和純化
濃度 | 1000 ug/ml
存儲條件 | 2 - 8 °C
保質(zhì)期 | 收貨后1年
緩沖液 | Tris-檸檬酸鹽/磷酸鹽緩沖液,pH 7-8,含0.09%疊氮化鈉
三、免疫原與特異性識別
本抗體識別的表位位于小鼠MafA蛋白第300位至C末端(第359位)之間(參考編號NP_919331.1,GeneID 378435)。該區(qū)域?qū)?yīng)MafA蛋白的C末端結(jié)構(gòu)域,包含對轉(zhuǎn)錄激活功能至關(guān)重要的序列。
抗體經(jīng)固相載體固定化免疫原肽段親和純化,免疫球蛋白濃度通過比爾定律測定(1 mg/mL IgG在A280處吸光度為1.4)。
四、應(yīng)用方法
4.1 Western Blot操作流程
封閉與稀釋液:5% Milk-TBST
一抗孵育:過夜孵育
推薦稀釋比例:1:1000 - 1:10,000
二抗推薦:山羊抗兔IgG重鏈和輕鏈抗體(貨號A120-101P)
4.2 實(shí)驗(yàn)要點(diǎn)提示
1. 建議根據(jù)目標(biāo)蛋白表達(dá)豐度,在1:1000至1:10,000范圍內(nèi)優(yōu)化稀釋比例
2. 使用含5%脫脂牛奶的TBST作為封閉液和抗體稀釋液
3. 一抗4°C過夜孵育通常可獲得最佳信噪比
4. 細(xì)胞裂解液樣本適用于本抗體檢測
五、產(chǎn)品特性說明
5.1 純度與質(zhì)量
經(jīng)抗原親和純化處理后,非特異性背景顯著降低。每批次抗體均通過質(zhì)量檢測,確保批次間一致性。
5.2 防腐劑說明
緩沖液中含0.09%疊氮化鈉作為防腐劑。注意:疊氮化鈉會抑制過氧化物酶活性,若二抗系統(tǒng)為HRP標(biāo)記,需在實(shí)驗(yàn)前通過透析或脫鹽柱去除疊氮化鈉。
六、生物學(xué)功能
MafA是Maf轉(zhuǎn)錄因子家族成員,具有堿性亮氨酸拉鏈結(jié)構(gòu)。該蛋白在胰島β細(xì)胞中特異性富集,主要功能包括:
參與β細(xì)胞特異性胰島素基因轉(zhuǎn)錄調(diào)控
介導(dǎo)葡萄糖反應(yīng)性胰島素基因表達(dá)
在胰島β細(xì)胞分化中發(fā)揮關(guān)鍵作用
表達(dá)模式:
MafA特異性表達(dá)于將分化為胰島β細(xì)胞的細(xì)胞群中,是β細(xì)胞身份維持的重要標(biāo)志物。
七、存儲與穩(wěn)定性
存儲溫度:2 - 8°C,請勿冷凍
保質(zhì)期:收貨后1年內(nèi)保持活性
避免操作:反復(fù)開蓋可能導(dǎo)致污染或活性下降,建議分裝使用
八、其他名稱
Mafa homolog
Pancreatic beta-cell-specific transcriptional activator
RIPE3b1
Transcription factor MafA
V-maf musculoaponeurotic fibrosarcoma oncogene homolog A
本產(chǎn)品適用于小鼠胰島β細(xì)胞中MafA蛋白的表達(dá)檢測及相關(guān)轉(zhuǎn)錄調(diào)控研究。
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