一、產(chǎn)品概述

由艾美捷Bethyl Laboratories推出的為針對(duì)SMARCB1/SNF5（亦稱INI1、BAF47）的兔源多克隆抗體（貨號(hào)：A301-087A），經(jīng)抗原親和純化，適用于免疫組化（IHC）、免疫沉淀（IP）及Western Blot（WB）檢測(cè)。SMARCB1是人SWI/SNF染色質(zhì)重塑復(fù)合物的核心亞基，在調(diào)控基因轉(zhuǎn)錄、細(xì)胞分化和腫瘤抑制中發(fā)揮關(guān)鍵作用。該基因突變或缺失與惡性橫紋肌樣瘤（MRT）、非典型畸胎樣/橫紋肌樣瘤（AT/RT）等多種惡性腫瘤密切相關(guān)。

二、關(guān)鍵規(guī)格參數(shù)

參數(shù) | 詳細(xì)信息

靶標(biāo) | SMARCB1 / SNF5 / INI1 / BAF47

反應(yīng)性 | 小鼠、人

宿主 | 兔

克隆性 | 多克隆

免疫原 | 人SMARCB1蛋白第100至150位氨基酸之間的區(qū)域（實(shí)際表位位于75-125區(qū)間）

亞型 | IgG

純化方式 | 抗原親和純化

濃度 | 1000 ?g/ml

存儲(chǔ)條件 | 2 - 8 °C

保質(zhì)期 | 收貨后1年

緩沖液 | Tris-檸檬酸鹽/磷酸鹽緩沖液，pH 7-8，含0.09%疊氮化鈉

三、免疫原與特異性識(shí)別

本抗體識(shí)別的表位位于人SMARCB1蛋白第75至125位氨基酸殘基之間（參考編號(hào)NP_003064.2，GeneID 6598）。該區(qū)域?qū)?yīng)SMARCB1蛋白的N末端結(jié)構(gòu)域，避開了與其它SWI/SNF家族亞基高度同源的區(qū)域，確保特異性識(shí)別。

抗體通過(guò)固相載體上固定的SMARCB1/SNF5特異性表位進(jìn)行親和純化，有效去除非特異性抗體。免疫球蛋白濃度采用比爾定律測(cè)定（1 mg/mL IgG在A280處吸光度為1.4）。

種屬交叉反應(yīng)性：已驗(yàn)證反應(yīng)性包括人和小鼠，適用于兩個(gè)物種的樣本檢測(cè)。

四、應(yīng)用方法與推薦條件

4.1 Western Blot（WB）

參數(shù) | 條件

稀釋比例 | 1:2000 - 1:10,000

封閉/稀釋液 | 5% 脫脂牛奶-TBST

一抗孵育 | 過(guò)夜孵育

二抗（細(xì)胞裂解液WB） | 山羊抗兔IgG重鏈和輕鏈抗體（貨號(hào)A120-101P）

二抗（免疫沉淀物WB） | 抗兔IgG輕鏈HRP結(jié)合抗體，封閉液中添加5%正常豬血清（貨號(hào)S100-020）

操作提示：SMARCB1在多種細(xì)胞系中廣泛表達(dá)（分子量約44 kDa），推薦起始稀釋度為1:2000。若信號(hào)過(guò)強(qiáng)，可上調(diào)至1:5000-1:10000。建議使用HeLa、HEK293或小鼠NIH/3T3細(xì)胞裂解液作為陽(yáng)性對(duì)照。

4.2 免疫沉淀（IP）

參數(shù) | 條件

推薦用量 | 6 ?g 抗體 / mg 細(xì)胞裂解蛋白

該用量可在人或小鼠細(xì)胞裂解液中有效富集SMARCB1及其結(jié)合的SWI/SNF復(fù)合物。若目的為分析復(fù)合物中其他亞基（如BRG1、BRM），建議使用非變性裂解緩沖液。

4.3 免疫組化（IHC）

參數(shù) | 條件

稀釋比例 | 1:1000 - 1:5000

抗原修復(fù) | 推薦使用檸檬酸鹽緩沖液（pH 6.0）進(jìn)行熱誘導(dǎo)抗原修復(fù)

樣本類型 | 福爾馬林固定、石蠟包埋（FFPE）組織切片

操作提示：SMARCB1在正常細(xì)胞核中呈均勻強(qiáng)陽(yáng)性表達(dá)，在橫紋肌樣瘤中因基因缺失而完全丟失。本抗體可有效區(qū)分SMARCB1表達(dá)正常（核陽(yáng)性）與完全缺失（核陰性）的樣本，是臨床診斷AT/RT和MRT的重要工具。建議使用扁桃體或正常腦組織作為陽(yáng)性對(duì)照，橫紋肌樣瘤組織作為陰性對(duì)照。稀釋比例可從1:1000起始，根據(jù)信號(hào)強(qiáng)度上調(diào)至1:5000，背景極低。

五、生物學(xué)功能

SMARCB1/SNF5/INI1是人SWI/SNF（亦稱BAF）染色質(zhì)重塑復(fù)合物的核心核心亞基，主要功能包括：

染色質(zhì)重塑：作為SWI/SNF復(fù)合物的必需組分，利用ATP水解能量重塑核小體結(jié)構(gòu)，調(diào)控基因的可及性

轉(zhuǎn)錄調(diào)控：參與多種發(fā)育相關(guān)基因、腫瘤抑制基因的轉(zhuǎn)錄激活或抑制

細(xì)胞周期調(diào)控：通過(guò)與p53、RB等通路相互作用，控制G1/S檢查點(diǎn)

腫瘤抑制：SMARCB1是經(jīng)典腫瘤抑制基因，雙等位基因失活導(dǎo)致橫紋肌樣瘤易感性

六、存儲(chǔ)與穩(wěn)定性

存儲(chǔ)溫度：2 - 8°C，請(qǐng)勿冷凍。高濃度（1000 ?g/ml）配方在冷藏條件下極為穩(wěn)定，避免反復(fù)開蓋。

保質(zhì)期：收貨后1年內(nèi)保持完整活性。

防腐劑：含0.09%疊氮化鈉，可抑制微生物污染。若下游應(yīng)用涉及HRP檢測(cè)，疊氮化鈉會(huì)抑制過(guò)氧化物酶活性，需通過(guò)透析或脫鹽柱去除。

緩沖液體系：Tris-檸檬酸鹽/磷酸鹽緩沖液（pH 7-8），兼容多數(shù)免疫檢測(cè)體系。

本產(chǎn)品適用于染色質(zhì)生物學(xué)、腫瘤病理學(xué)、表觀遺傳調(diào)控及發(fā)育相關(guān)研究領(lǐng)域。