IL-6 ELISA Kit是一種夾心酶免疫分析法，用于體外定量測量小鼠血清、血漿、組織勻漿、細胞裂解液和細胞培養(yǎng)上清中的IL-6。

antibodies-online提供試劑盒組分的驗證數據（WB），因此這是一種由高質量試劑組成的可靠ELISA試劑盒產品。

艾美捷IL-6 ELISA Kit：

貨號：ABIN6574135

目標：白細胞介素6（IL-6）

反應性：小鼠

檢測方法：比色法

方法類型：夾心ELISA

檢測范圍：7.8 pg/mL - 500 pg/mL

最低檢測限：7.8 pg/mL

應用：ELISA

樣本類型：細胞培養(yǎng)上清、細胞裂解液、血漿、血清、組織勻漿

分析方法：定量

特異性：該測定法對檢測白細胞介素6（IL-6）具有高靈敏度和極佳的特異性。

交叉反應性（詳情）：未觀察到白細胞介素6（IL-6）與其類似物之間有顯著的交叉反應或干擾。

靈敏度：3.0 pg/mL

樣本體積：100 μL

測定時間：3小時

板：預涂覆

使用注意事項：與本試劑盒配套使用的停止液是酸性溶液。使用此材料時，請佩戴眼睛、手、面部和衣物保護。

儲存：4 °C/-20 °C

對于未開封的試劑盒：所有試劑應根據瓶身上的標簽存放。標準品、檢測試劑A、檢測試劑B和96孔條板應在收到后存放在-20°C，而其他試劑應存放在4°C。

對于已開封的試劑盒：剩余的試劑必須按照上述儲存條件存放。此外，請將未使用的孔放回含有干燥劑的鋁箔袋中，并用拉鏈密封鋁箔袋。

僅限研究使用

IL-6 ELISA Kit組分：

預涂覆、即用型96孔條板，平底

96孔板封蓋

參考標準

標準品稀釋液

檢測試劑A

檢測試劑B

測定稀釋液A

測定稀釋液B

試劑稀釋液（如果檢測試劑為凍干）

TMB底物

停止液

洗滌緩沖液（30倍濃縮）

說明書

特定信息：

IL-6 ELISA試劑盒ABIN6574135能用來做什么？這個小鼠IL-6 ELISA試劑盒適用于可靠地檢測細胞培養(yǎng)上清、細胞裂解液、血漿、血清和其他樣本類型中的IL-6/白細胞介素6。最低檢測限為7.8 pg/ml，檢測范圍為7.8 pg/ml至500 pg/ml。

這個IL-6 ELISA試劑盒有哪些驗證數據？提供了5張顯示試劑盒組分性能的圖片。該試劑盒在49篇PubMd出版物中被引用。使用我們的高質量IL-6 ELISA試劑盒可靠地檢測IL-6。

IL-6的功能是什么？白細胞介素6（IL-6）是一種蛋白質，既充當促炎細胞因子，也充當抗炎肌因子。它由人類IL6基因編碼。成骨細胞分泌IL-6以刺激破骨細胞的形成。此外，許多血管的中膜平滑肌細胞產生IL-6作為一種促炎細胞因子。IL-6通過抑制TNF-alpha和IL-1并激活IL-1ra和IL-10，充當抗炎肌因子。

關于標準物質的信息：

標準品可能是重組蛋白或天然蛋白，這將取決于特定的試劑盒。此外，表達系統(tǒng)可能是大腸桿菌、酵母或哺乳動物細胞。標準品中含有0.05%的proclin 300作為防腐劑。

關于試劑的信息：

試劑盒中使用的停止液是濃度為1 mol/L的硫酸。洗滌液是TBS。標準品稀釋液中含有0.02%的疊氮鈉，測定稀釋液A和測定稀釋液B中含有0.01%的疊氮鈉。有些試劑盒中可能含有BSA。

關于抗體的信息：

不同試劑盒中提供的抗體及其宿主會有所不同。

方案：

準備所有試劑、樣本和標準品，

向每個孔中加入100μL的標準品或樣本。在37°C下孵化1小時，

抽吸并加入100μL準備好的檢測試劑A。在37°C下孵化1小時，

抽吸并洗滌3次，

加入100μL準備好的檢測試劑B。在37°C下孵化30分鐘，

抽吸并洗滌5次，

加入90μL底物溶液。在37°C下孵化10-20分鐘，

加入50μL停止液。立即在450nm處讀取。

試劑準備：

使用前將所有試劑盒組分和樣本平衡至室溫（18-25°C）。如果試劑盒不會一次性用完，請只取出當前實驗所需的條帶和試劑，并將剩余的條帶和試劑留在所需的條件下。

標準品 - 用1.0 mL的標準品稀釋液重組標準品，室溫下放置10分鐘，輕輕搖晃（不要產生泡沫）。庫存溶液中標準品的濃度為2,000pg/mL。首先將庫存溶液稀釋至500pg/mL，稀釋后的標準品作為最高標準（500pg/mL）。然后準備7個含有0.5 mL標準品稀釋液的試管，并使用稀釋后的標準品制作雙倍稀釋系列。在下一個轉移前徹底混合每個試管。設置7個稀釋標準點，如500pg/mL、250pg/mL、125pg/mL、62.5pg/mL、31.2pg/mL、15.6pg/mL、7.8pg/mL，最后一個微量離心管與標準品稀釋液為空白，即0pg/mL。

檢測試劑A和檢測試劑B - 如果為凍干品，用150μL的試劑稀釋液重組檢測試劑A，室溫下放置10分鐘，輕輕搖晃（不要產生泡沫）。使用前請短暫離心或旋轉庫存檢測A和檢測B。分別用測定稀釋液A和B將它們稀釋至工作濃度100倍。

洗滌液 - 將20 mL的洗滌液濃縮液（30倍）與580 mL的去離子或蒸餾水稀釋，制備600 mL的洗滌液（1倍）。

TMB底物 - 用無菌吸頭吸取所需劑量的溶液，不要將殘余溶液重新倒入瓶中。

注意：

不允許直接在孔中進行連續(xù)稀釋。

請在測定前15分鐘內準備標準品。請不要直接在37°C下溶解試劑。

請根據說明書仔細重組標準品或工作檢測試劑A和B，并避免產生泡沫，輕輕混合直至晶體完全溶解。為了減少移液引起的不精確性，請使用小體積，并確保移液器已校準。建議一次性吸取超過10μL。

重組的標準品、檢測試劑A和檢測試劑B只能使用一次。

如果洗滌液濃縮液（30倍）中形成晶體，請加熱至室溫并輕輕混合，直至晶體完全溶解。

受污染的水或試劑準備容器會影響檢測結果。

樣本準備：

建議使用新鮮樣本，避免長時間儲存，否則樣本中的蛋白質可能會降解和變性，導致假結果。因此，樣本應在2 - 8°C下短期儲存，或分裝后在-20°C（≤1個月）或-80°C（≤3個月）下儲存。應避免反復凍融。測定前，冷凍樣本應緩慢解凍并離心以去除沉淀物。

如果說明書中未指定樣本類型，需要進行初步測試以確定與試劑盒的兼容性。

如果使用裂解緩沖液制備組織勻漿或細胞培養(yǎng)上清，引入的化學物質可能會導致偏差。推薦的稀釋因子僅供參考。

請在進行測試前估算樣本的濃度。如果值不在標準曲線范圍內，則必須確定特定實驗的最佳樣本稀釋度。然后，應使用PBS（pH =7.0-7.2）稀釋樣本。

測定精度

內部測定精度（測定內的精度）：在一塊板上分別測試3個低、中、高目標水平的樣本，每個樣本測試20次。

外部測定精度（測定間的精度）：在3個不同的板上測試3個低、中、高目標水平的樣本，每個板上8個重復。

CV(%) = SD/meanX100

內部測定：CV < 10%

外部測定：CV < 12%

蛋白標準WB：針對高純度大腸桿菌表達的重組小鼠IL6的不同對照抗體。

文獻參考：

Tian, Wang, Liu, Yang, Wu, Wei, Chen: "Preparation and Evaluation of the Fully Humanized Monoclonal Antibody GD-mAb Against Respiratory Syncytial Virus." in: Frontiers in cellular and infection microbiology, Vol. 9, pp. 275, (2019)

Gao, Wang, Yu, Sheng, Wu, Wang, Zhang, Lin, Gong: "Chlorogenic Acid Attenuates Dextran Sodium Sulfate-Induced Ulcerative Colitis in Mice through MAPK/ERK/JNK Pathway." in: BioMed research international, Vol. 2019, pp. 6769789, (2019)

Qiu, Yuan, Li, Yang, Hu, Su, Chen: "Bidirectional effects of moxifloxacin on the pro?inflammatory response in lipopolysaccharide?stimulated mouse peritoneal macrophages." in: Molecular medicine reports, Vol. 18, Issue 6, pp. 5399-5408, (2019)