SpongeCol?是一種具有交織的柱狀多孔結(jié)構(gòu)的膠原海綿。SpongeCol?包含一種獨(dú)特的柱狀多孔網(wǎng)絡(luò)，使細(xì)胞和營養(yǎng)物質(zhì)能夠完全流過交織的孔隙，為細(xì)胞的附著、生長和遷移提供了增加的表面積。SpongeCol?由高度純化的I型膠原組成，最能夠支持細(xì)胞的附著、增殖和功能。這種膠原海綿經(jīng)輕度交聯(lián)，具有增加的機(jī)械強(qiáng)度和耐久性，適用于短期和長期組織培養(yǎng)，但在較長時(shí)間內(nèi)仍然可生物降解。孔的直徑范圍從100到400微米，平均直徑約為200微米。膠原圓盤直徑約為4毫米，厚度為1.5毫米。海綿圓盤適合放入96孔培養(yǎng)板或衛(wèi)生盧爾連接器進(jìn)行流動灌注。每包含二十五個(gè)膠原海綿圓盤。該產(chǎn)品經(jīng)過終端滅菌處理，可立即使用。

艾美捷SpongeCol，膠原蛋白海綿，柱狀孔結(jié)構(gòu)，直徑 4 毫米圓盤（ABM-5135-25EA）特性描述：

孔徑尺寸：約為200微米孔徑，范圍在100至400微米之間。

尺寸：SpongeCol?為圓盤形狀，直徑約為4毫米，厚度為1.5毫米。

pH值：在PBS或組織培養(yǎng)培養(yǎng)基中懸浮時(shí)，約為7.0至7.4。

內(nèi)毒素：用于生產(chǎn)該產(chǎn)品的膠原的內(nèi)毒素水平為<1.0 EU/ml。

無菌性：SpongeCol?經(jīng)過輻照處理并通過了無菌性測試。

存儲/穩(wěn)定性：室溫存放 - 不建議加熱超過40?C。存放在陰涼干燥的地方。該產(chǎn)品的穩(wěn)定性正在評估中。

本產(chǎn)品僅用于研發(fā)目的，不適用于人類或其他用途。請參閱材料安全數(shù)據(jù)表以獲取有關(guān)危害和安全操作規(guī)程的信息。

SpongeCol，膠原蛋白海綿，柱狀孔結(jié)構(gòu)，直徑 4 毫米圓盤的制備和使用：

A. 制備和接種：

注意：細(xì)胞附著到海綿上通常是組織培養(yǎng)中最關(guān)鍵的一步。溫度、pH值、氣體交換和細(xì)胞濃度會影響附著的速率和效率。最佳接種速率取決于被培養(yǎng)的細(xì)胞類型。

1. 在無菌層流工作臺中從包裝中無菌取出海綿圓盤。

2. 使用無菌器械小心地將海綿放入96孔組織培養(yǎng)板的孔中。在轉(zhuǎn)移海綿時(shí)小心不要損壞海綿。建議使用未經(jīng)處理的組織培養(yǎng)塑料器皿。

注意：涂有組織的塑料器皿可能需要用瓊脂糖涂層，以防止細(xì)胞附著在塑料而不是海綿上。

3. 將細(xì)胞懸浮在所需濃度（1x104 –1x105 cells/mL）并將足夠體積的細(xì)胞溶液分配到放置在孔中的海綿頂部。

注意：另一種方法是將細(xì)胞懸浮在中和的膠原溶液中（如PureCol? I型膠原目錄號5005-100ML或PureCol? EZ凝膠目錄號5074-35ML）。將膠原/細(xì)胞溶液分配到放置在孔中的海綿頂部。

4. 轉(zhuǎn)移到37?C孵育箱中約1 - 2小時(shí)，以便細(xì)胞初始附著。

注意：如果使用膠原懸浮法，膠原將在37?C聚合并將您的細(xì)胞封裝在膠原基質(zhì)和海綿中。

5. 經(jīng)過1 - 2小時(shí)后，從孵育箱中取出板，并檢查細(xì)胞附著情況。可能需要進(jìn)行額外的測試以優(yōu)化細(xì)胞附著到海綿上所需的時(shí)間。檢查細(xì)胞的形態(tài)。細(xì)胞的附著和擴(kuò)展將決定附著所需的時(shí)間。

6. 一旦細(xì)胞充分附著到海綿上，增加每個(gè)孔中的最終體積，以完全覆蓋并為培養(yǎng)系統(tǒng)提供足夠的培養(yǎng)基。

B. 更換培養(yǎng)基：

1. 在初始接種后的12至24小時(shí)更換培養(yǎng)基。更換頻率將由細(xì)胞類型、細(xì)胞附著效率、pH值（保持在pH 7.0至7.4）、培養(yǎng)中可用的培養(yǎng)基營養(yǎng)物質(zhì)決定。與2D培養(yǎng)系統(tǒng)相比，可能需要更頻繁地更換培養(yǎng)基。

C. 細(xì)胞收獲：

注意：蛋白酶消化是從海綿釋放細(xì)胞的標(biāo)準(zhǔn)方法。細(xì)胞與膠原海綿的附著強(qiáng)度將因細(xì)胞系而異。酶濃度和消化時(shí)間將取決于酶的活性和細(xì)胞的濃度。膠原酶和/或胰蛋白酶可能是首選方法。

1. 使用EDTA-PBS洗滌海綿可能有助于蛋白酶消化。添加足夠的體積以覆蓋海綿。

2. 從孔中抽吸EDTA-PBS溶液。

3. 向孔中加入足夠的解離溶液，完全覆蓋海綿。

4. 轉(zhuǎn)移到37?C孵育箱中。定期檢查細(xì)胞的脫離情況。

5. 一旦細(xì)胞完全脫離，將細(xì)胞取出并分配到離心管中。

6. 根據(jù)需要離心細(xì)胞。