三維（3D）凝膠允許研究細(xì)胞外基質(zhì)（ECM）的機(jī)械性能，如密度和剛度，對(duì)細(xì)胞發(fā)展、遷移和形態(tài)的影響。與二維（2D）系統(tǒng)不同，三維環(huán)境允許細(xì)胞延伸同時(shí)與所有細(xì)胞表面的整合素相互作用，從而激活特定的信號(hào)通路。凝膠的剛度或硬度也會(huì)影響細(xì)胞在三維與二維環(huán)境中的不同遷移方式。此外，由于基質(zhì)纖維與細(xì)胞延伸的糾纏，三維系統(tǒng)中可能出現(xiàn)整合素獨(dú)立的機(jī)械相互作用，但在二維系統(tǒng)中則不可能，因?yàn)榧?xì)胞附著在平坦的表面上。

Advanced BioMatrix提供PhotoCol，這是一種純化的甲基丙烯酰化I型牛膠原蛋白套件，它提供了具有獨(dú)特可調(diào)屬性的類似天然3D膠原蛋白凝膠，這些凝膠在不同濃度下制備并以紫外光交聯(lián)。

艾美捷PhotoCol甲基丙烯酸膠原蛋白，100 毫克，含Irgacure 套件（ABM-5201-1KIT）由純化的甲基丙烯酰化I型牛膠原蛋白作為核心組分，以及套件中的其他支持試劑組成。

甲基丙烯酸酯化I型膠原蛋白是從完整的牛膠原蛋白中生產(chǎn)的，其中膠原蛋白通過與自由胺基反應(yīng)進(jìn)行了改性，主要是賴氨酸殘基的ε-胺基團(tuán)以及N末端的α-胺基團(tuán)。膠原蛋白分子中超過20%的總賴氨酸殘基已經(jīng)被甲基丙烯酰化。該膠原蛋白從牛皮中提取，含有高單體含量。起始的膠原蛋白材料來自一個(gè)封閉的畜群，并通過控制的制造工藝進(jìn)行純化。

提供的20 mM醋酸溶液用于溶解凍干的甲基丙烯酰化膠原蛋白，濃度范圍從3到8 mg/ml。中和溶液由堿性的10X磷酸鹽緩沖液（PBS）組成，它在最終混合物中提供生理鹽水和中性pH值。光引發(fā)劑溶液由Irgacure 2959組成，需配制在甲醇中（未包含），這允許在365 nm的紫外光下交聯(lián)膠原蛋白。

甲基丙烯酸酯化I型膠原蛋白，Irgacure 光引發(fā)劑存儲(chǔ)/穩(wěn)定性：

產(chǎn)品在冷凍凝膠包中運(yùn)輸。收到后，將膠原蛋白、醋酸和光引發(fā)劑存放在2到10°C的溫度下。不要冷凍。將中和溶液存放在室溫下。產(chǎn)品標(biāo)簽和每個(gè)特定批次的分析證書上都印有有效期。當(dāng)產(chǎn)品按照指示處理和存儲(chǔ)時(shí)，有效期適用。在使用醋酸溶解膠原蛋白后，膠原蛋白溶液在2到10°C的溫度下存放時(shí)穩(wěn)定2個(gè)月。

甲基丙烯酸酯化I型膠原蛋白，Irgacure 光引發(fā)劑凝膠剛度：

PhotoCol?套件旨在提供不同凝膠剛度的膠原蛋白凝膠，這取決于膠原蛋白的濃度和交聯(lián)程度。圖1展示了在不同濃度下，有和沒有紫外光交聯(lián)時(shí)PhotoCol?典型凝膠剛度的結(jié)果。

文獻(xiàn)參考：

1. Gaudet, I. D., Characterization of MethacryatedType-I Collagen as a Dynamic PhotoactiveHydrogel, Biointerphases, 2012 Dec; 7(1): 25.

2. Drzewiecki K. E., Methacrylation Induces Rapid,Temperature-Dependent, Reversible Self-Assemblyof Type-I Collagen, Langmuir. 2014 Sep 23; 30(37):11204–11211.