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TeloCol-6 牛膠原蛋白溶液源自酸提取過(guò)程,產(chǎn)生完整的端肽膠原蛋白。膠原鏈兩端的前肽區(qū)域、N-端肽區(qū)域和C-端肽區(qū)域均得以保留。 TeloCol-6 膠原蛋白約 95% 為 I 型膠原蛋白,其余為 III 型膠原蛋白。每個(gè)產(chǎn)品包括一瓶含有 50 毫升膠原蛋白溶液的瓶子,以及一瓶預(yù)先配制的用于形成膠原蛋白凝膠的中和溶液。該產(chǎn)品的供應(yīng)濃度約為 6 mg/ml,每個(gè)特定批次的濃度均在產(chǎn)品標(biāo)簽和購(gòu)買每種產(chǎn)品時(shí)提供的分析證書(shū)上提供。 TeloCol-6 經(jīng)過(guò)無(wú)菌過(guò)濾,并以用戶友好的包裝提供,以便使用和儲(chǔ)存。 TeloCol-6 非常適合表面涂層、為培養(yǎng)細(xì)胞提供薄層的制備或用作固體凝膠。
艾美捷TeloCol-6,牛端膠原蛋白溶液,6 mg/ml,50 mL + 中和溶液(ABM-5225-1KIT)涂層程序:
注意:采用無(wú)菌操作方式,在整個(gè)膠原蛋白產(chǎn)品的制備和處理過(guò)程中保持產(chǎn)品的無(wú)菌性。
1. 如有需要,將所需量的TeloCol?-6膠原溶液從瓶中轉(zhuǎn)移到稀釋容器。使用無(wú)菌0.01N HCl溶液進(jìn)一步稀釋至所需濃度。典型的工作濃度可能在50至100微克/毫升之間。
注意:使用這些建議作為指導(dǎo),確定您培養(yǎng)系統(tǒng)的合適涂層條件。
2. 輕輕攪拌混合物直至完全混合。
3. 向培養(yǎng)表面添加適量稀釋后的TeloCol?-6物質(zhì),確保整個(gè)表面都被涂覆。
4. 室溫孵育,蓋上,持續(xù)1-2小時(shí)。吸去任何剩余物質(zhì)。或者,室溫孵育直至表面干燥。
5. 孵育后,吸去任何剩余物質(zhì)。
6. 用無(wú)菌培養(yǎng)基或PBS仔細(xì)沖洗涂層表面,避免刮傷表面。
7. 涂層表面已準(zhǔn)備就緒。如果保持無(wú)菌性,也可在2-8°C潮濕或干燥存儲(chǔ)。
使用提供的中和溶液進(jìn)行3D凝膠制備程序:
注意:采用無(wú)菌操作方式,在整個(gè)膠原蛋白和其他溶液的制備和處理過(guò)程中保持產(chǎn)品的無(wú)菌性。
注意:建議在制備膠原蛋白時(shí)將膠原和其他工作溶液冷藏并放在冰上。
1. 確定所需的膠原量。
2. 將1份冷藏的中和溶液慢慢轉(zhuǎn)移至無(wú)菌混合容器或試管中。
3. 將9份冷藏的TeloCol?-6膠原溶液轉(zhuǎn)移到無(wú)菌混合容器或試管中,總共10份。
4. 輕輕攪拌混合或上下移液管混合。不建議使用渦旋器。
5. 將膠原混合物分裝到所需的無(wú)菌培養(yǎng)皿或培養(yǎng)容器中。
6. 在37°C孵育1小時(shí)以形成凝膠。
不使用提供的中和溶液進(jìn)行3D凝膠制備程序:
注意:建議在制備膠原時(shí)將膠原和其他工作溶液冷藏并放在冰上。
1. 將1份冷藏的10倍PBS或10倍培養(yǎng)基緩慢加入8份冷藏的膠原溶液中,并輕輕攪拌。
2. 使用無(wú)菌0.1M NaOH將混合物的pH調(diào)整到7.0-7.5。仔細(xì)監(jiān)控pH調(diào)整(pH計(jì)、酚紅或pH試紙)。輕輕攪拌混合。
3. 使用無(wú)菌水將最終體積調(diào)整為10份并混合。
4. 為防止凝膠化,保持混合物溫度在2-10°C。將TeloCol?-6膠原混合物分裝到所需的無(wú)菌培養(yǎng)皿或培養(yǎng)容器中。
5. 要形成凝膠,加熱至37°C。大約30至60分鐘形成凝膠。
存儲(chǔ)/穩(wěn)定性:產(chǎn)品存儲(chǔ)在2-10°C,并在冷凍凝膠包中發(fā)貨。不要冷凍。產(chǎn)品標(biāo)簽和每個(gè)特定批次的分析證書(shū)上列有有效期限。產(chǎn)品在按指示處理和存儲(chǔ)時(shí)適用有效期。
本品僅供研發(fā)使用,不適用于人類或其他用途。
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