人β防御素2（hBD-2）ELISA試劑盒是一種夾心ELISA試劑盒用于定量BD-2人細(xì)胞培養(yǎng)物和適當(dāng)合格的來自血清、唾液或其他組織液的樣本。For僅供研究使用（RUO）；不用于治療或診斷使用。

人β-防御素-2（BD-2）elisa試劑盒檢測(cè)原理：

人類β防御素2（Human Beta Defensin 2，BD-2）ELISA試劑盒基于樣品中的人類β防御素2與兩種抗體的結(jié)合，一種固定在微孔板井中，另一種與生物素結(jié)合，隨后與鏈霉親和素辣根過氧化物酶（HRP）偶聯(lián)物結(jié)合。經(jīng)過洗滌步驟后，加入顯色底物，并通過HRP在TMB底物上的酶促反應(yīng)產(chǎn)生顏色，該顏色與樣品中存在的BD-2量成正比。加入終止液以終止反應(yīng)，然后使用ELISA微孔板讀數(shù)器測(cè)量450nm處的吸光度。樣品中BD-2的濃度是根據(jù)指定濃度的純化重組人類BD-2的標(biāo)準(zhǔn)曲線計(jì)算得出的。

艾美捷人β-防御素-2（BD-2）elisa試劑盒：

貨號(hào)：ADI-100-250-BD2

儲(chǔ)存和穩(wěn)定性：如果未開封，微孔板和其他所有試劑在2-8攝氏度下穩(wěn)定，直至標(biāo)簽上打印的有效期。工作溶液的穩(wěn)定性在試劑準(zhǔn)備部分指明。

特異性：本試劑盒中使用的抗體經(jīng)過親和純化，使用純化的重組人類BD-2免疫吸附劑，并已通過ELISA顯示特異性與hBD-2反應(yīng)，基本上不與重組hBD-1、hBD-3或hNP1反應(yīng)。

需自備的材料：

- 能夠提供100微升和1-10毫升的移液器和移液管。推薦使用多通道移液器。

- 用于稀釋樣本和抗體HRP濃縮液的一次性玻璃或塑料5-15毫升管。

- 用于稀釋洗滌濃縮液的量筒；0.2至1升。

- 用于儲(chǔ)存稀釋洗滌液的儲(chǔ)液瓶；200毫升至1升。

- 用于稀釋試劑濃縮液的蒸餾水或去離子水。

- 450納米波長(zhǎng)的微孔板讀數(shù)器。

人β-防御素-2（BD-2）elisa試劑盒樣本收集和處理：

培養(yǎng)基、生物加工制劑、血清和其他生物液體在適當(dāng)稀釋以避免溶液基質(zhì)干擾的情況下可以使用作為樣本。對(duì)于血清，通過靜脈采血，允許凝血，并在室溫下通過離心分離血清。對(duì)于所有樣本，在用樣本稀釋液稀釋之前，通過離心和/或過濾澄清。如果樣本不會(huì)立即檢測(cè)，可冷藏保存數(shù)周，或冷凍長(zhǎng)期保存。

結(jié)果計(jì)算：

結(jié)果可以使用任何免疫分析軟件包進(jìn)行計(jì)算。推薦使用四參數(shù)曲線擬合。如果沒有軟件可用，BD-2濃度可以按照以下方式確定：

1. 計(jì)算重復(fù)樣本的平均OD值。

2. 在坐標(biāo)紙上，將標(biāo)準(zhǔn)品的平均OD值（y軸）與BD-2的濃度（pg/ml）（x軸）繪制出來。通過這些點(diǎn)繪制最佳擬合曲線，構(gòu)建標(biāo)準(zhǔn)曲線。點(diǎn)對(duì)點(diǎn)構(gòu)建是最常見和可靠的方法。

3. 通過插值從標(biāo)準(zhǔn)曲線確定未知樣本和對(duì)照物中的BD-2濃度。

4. 將樣本獲得的值乘以每個(gè)樣本的稀釋因子。

5. 產(chǎn)生信號(hào)高于200 pg/ml標(biāo)準(zhǔn)品的樣本應(yīng)進(jìn)一步稀釋并重新檢測(cè)。

人β-防御素-2（BD-2）elisa試劑盒典型結(jié)果：

Wells Standards, Control & Samples A450 pg/ml

A1, A2 Negative Diluent Control 0.04 0

B1, B2 6.25 pg/ml Standard 0.21 6.25

C1, C2 12.5 pg/ml Standard 0.36 12.5

D1, D2 25 pg/ml Standard 0.69 25

E1, E2 50 pg/ml Standard 1.39 50

F1, F2 100 pg/ml Standard 2.49 100

G1, G2 200 pg/ml Standard 3.21 200

H1, H2 Sample [Diluted 1:10] 1.55 68

Calculated: 10-fold dilution x 68 pg/ml = 680 pg/ml in serum