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小鼠抗Sm IG(總(A+G+M))ELISA試劑盒特異性和靈敏度分析

發(fā)布者:艾美捷科技    發(fā)布時(shí)間:2024-10-31     
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小鼠抗Sm總Ig ELISA試劑盒是一種穆諾斯塞適用于定量或滴定總抗體活性(IgG、IgA血清或血漿中Sm(Smith)抗原特異性抗體(IgM)。其他生物流體,包括組織培養(yǎng)基,可以是驗(yàn)證使用。

 

小鼠抗Sm IG(總(A+G+M))ELISA試劑盒檢測(cè)原理:

小鼠抗Sm總Ig ELISA試劑盒基于樣品中小鼠抗Sm IgG、IgA和IgM與固定在微孔板上的Sm的結(jié)合,總抗Sm抗體通過(guò)與辣根過(guò)氧化物酶(HRP)酶偶聯(lián)的特異性抗小鼠IgG+IgA+IgM(H+L)抗體來(lái)檢測(cè)。經(jīng)過(guò)洗滌步驟后,加入顯色底物(TMB),并通過(guò)HRP在底物上的酶促反應(yīng)產(chǎn)生顏色,該顏色與樣品中存在的抗Sm Ig的量成正比。加入終止液以終止反應(yīng),然后使用ELISA微孔板讀數(shù)器測(cè)量450nm處的吸光度。樣品中總小鼠抗體的活性是相對(duì)于小鼠抗Sm校準(zhǔn)物計(jì)算的。

 

艾美捷小鼠抗Sm IG(總(A+G+M))ELISA試劑盒

貨號(hào):ADI-5405

特異性:使用純化的SMA(Smith抗原)涂層微孔板;因此,該檢測(cè)專門針對(duì)針對(duì)SMA的抗體。抗小鼠IgG+IgA+IgM (H+L) HRP偶聯(lián)物與結(jié)合到板上Sm的小鼠IgG、IgA和IgM類抗體反應(yīng)。IgE抗體不會(huì)在背景信號(hào)之上被測(cè)量。

檢測(cè)靈敏度:SMA涂層水平、HRP偶聯(lián)物濃度和低非特異性結(jié)合樣本稀釋液被優(yōu)化,以區(qū)分小鼠血清樣本稀釋1:100后抗Sm Ig與背景(非抗體)信號(hào)。

校準(zhǔn)物值:校準(zhǔn)物是對(duì)SMA有反應(yīng)的小鼠抗體稀釋液。值被賦予為任意的抗Sm活性單位(見(jiàn)檢測(cè)的限制)。

試劑盒內(nèi)容:如果未開(kāi)封,微孔板和其他所有試劑在2-8攝氏度下穩(wěn)定,直至盒標(biāo)簽上打印的有效期。工作溶液的穩(wěn)定性在試劑準(zhǔn)備部分指明。

 

結(jié)果計(jì)算:

方法. 樣品稀釋曲線的滴度

從每個(gè)樣品的稀釋曲線計(jì)算抗體活性的滴度被推薦為最準(zhǔn)確的定量方法。使用以下指南可以獲得最佳的精確度:

1. 使用處于檢測(cè)中段范圍的OD值指數(shù)(2.0 – 0.5 OD);這為比較實(shí)驗(yàn)組和重復(fù)實(shí)驗(yàn)提供了最佳的靈敏度和可重復(fù)性。常用的任意1.0 OD值。

2. 準(zhǔn)備每個(gè)樣品的連續(xù)稀釋,以產(chǎn)生高于和低于所選指數(shù)的信號(hào)。如果稀釋準(zhǔn)確,每個(gè)樣品運(yùn)行至少4個(gè)稀釋級(jí)時(shí),可能不需要重復(fù)實(shí)驗(yàn)。

3. 5倍稀釋方案有助于有效覆蓋產(chǎn)生高于和低于1.0 OD的廣泛范圍。稀釋方案可以收緊到3倍或2倍,以獲得更精確的比較數(shù)據(jù)。

4. 可以使用處于中OD范圍的校準(zhǔn)值(例如,200 U/ml)來(lái)標(biāo)準(zhǔn)化不同檢測(cè)間的值。

 

小鼠抗Sm IG(總(A+G+M))ELISA試劑盒文獻(xiàn)參考:

1. On a log scale of inverse of Sample Dilution as the x-axis,plot the OD values of the two dilutions of each positive sample having ODs above and below the OD value of the Index (arbitrary or selected Calibrator).

2. From a point-to-point line drawn between the two sample ODs, read the dilution value (x-axis) corresponding to the OD of the selected Index

 

示例:

II. 使用1.0 OD指數(shù)來(lái)確定4種抗體的滴度。

小鼠抗Sm IG(總(A+G+M))ELISA試劑盒

滴度值

樣品A=1.72 kU

樣品B=5.70kU

樣品C=1.85 kU

樣品D=7.90kU


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