小鼠抗ssDNA總Ig ELISA試劑盒是一種免疫測定試劑盒適用于定量或滴定總抗體活性（IgG、IgA以及IgM），其對血清或血漿中的ssDNA具有特異性。其他生物可以驗證包括組織培養(yǎng)基在內(nèi)的流體的使用。

小鼠抗ssDNA IG（總（A+G+M））ELISA試劑盒檢測原理：

鼠抗單鏈DNA總Ig ELISA試劑盒基于小鼠抗單鏈DNA IgG、IgA和IgM與微孔板上固定的單鏈DNA的結(jié)合，通過抗小鼠IgG+IgA+IgM-HRP偶聯(lián)物檢測總抗單鏈DNA抗體。經(jīng)過洗滌步驟后，加入顯色底物（TMB）并產(chǎn)生顏色（藍(lán)色），該顏色與樣本中存在的抗單鏈DNA Ig的量成正比。加入終止液以終止反應(yīng)（將藍(lán)色轉(zhuǎn)為黃色），然后使用ELISA讀數(shù)器測量A450nm。樣本中總小鼠抗體的活性是相對于校準(zhǔn)物計算的。

艾美捷小鼠抗ssDNA IG（總（A+G+M））ELISA試劑盒：

貨號：ADI-5310

特異性：使用純化的單鏈DNA涂層微孔板；因此，該檢測專門針對針對單鏈DNA的抗體。抗小鼠IgG+IgA+IgM (H+L) HRP偶聯(lián)物與結(jié)合到板上單鏈DNA的小鼠IgG、IgA和IgM類抗體反應(yīng)。IgE抗體不會在背景信號之上被測量。

檢測靈敏度：單鏈DNA涂層水平、HRP偶聯(lián)物濃度和低非特異性結(jié)合樣本稀釋液被優(yōu)化，以區(qū)分小鼠血清樣本稀釋1:100后抗單鏈DNA Ig與背景（非抗體）信號。

試劑盒內(nèi)容：如果未開封，微孔板和其他所有試劑在2-8攝氏度下穩(wěn)定，直至盒標(biāo)簽上打印的有效期。工作溶液的穩(wěn)定性在試劑準(zhǔn)備部分指明。

結(jié)果計算：

方法：樣品稀釋曲線的滴度

建議從每個樣品的稀釋曲線計算抗體活性的滴度作為最準(zhǔn)確的定量方法。使用以下指南可以獲得最佳的精確度：

1. 使用處于檢測中段范圍的OD值指數(shù)（2.0 – 0.5 OD）；這為比較實驗組和重復(fù)實驗提供了最佳的靈敏度和可重復(fù)性。常用的任意1.0 OD值。

2. 準(zhǔn)備每個樣品的連續(xù)稀釋，以產(chǎn)生高于和低于所選指數(shù)的信號。如果稀釋準(zhǔn)確，每個樣品運行至少4個稀釋級時，可能不需要重復(fù)實驗。

3. 5倍稀釋方案有助于有效覆蓋產(chǎn)生高于和低于1.0 OD的廣泛范圍。稀釋方案可以收緊到3倍或2倍，以獲得更精確的比較數(shù)據(jù)。

4. 可以使用處于中OD范圍的校準(zhǔn)值（例如，200 U/ml）來標(biāo)準(zhǔn)化不同檢測間的值。

計算方法：

1. 在以樣品稀釋倒數(shù)的對數(shù)尺度為x軸的圖表上，繪制每個陽性樣品的兩個稀釋級的OD值，這些樣品的OD值高于和低于所選指數(shù)的OD值（任意或選定的校準(zhǔn)器）。

2. 從兩點之間繪制的直線上，讀取與所選指數(shù)的OD值相對應(yīng)的稀釋值（x軸）= 總Ig抗體活性單位

示例：

使用1.0 OD指數(shù)來確定4種抗體的滴度。

滴度值

樣品A = 1.72 kU

樣品B = 5.70 kU

樣品C = 1.85 kU

樣品D = 7.90 kU