蛋白質(zhì)的磷酸化與去磷酸化是調(diào)節(jié)參與基因表達(dá)、細(xì)胞黏附、細(xì)胞周期、細(xì)胞增殖和分化等功能蛋白特性的重要信號(hào)機(jī)制之一。蛋白質(zhì)可以通過蛋白激酶在特定的絲氨酸、蘇氨酸或酪氨酸殘基上發(fā)生磷酸化。抗磷酸化蛋白抗體在Western Blot中的應(yīng)用已成為信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)研究的常用工具。不幸的是，各種細(xì)胞裂解液中內(nèi)源性磷酸化蛋白的水平通常很低，即使使用高濃度抗體和長時(shí)間曝光，也往往難以檢測到。大多數(shù)商業(yè)化的Western Blot封閉液（例如脫脂奶粉、血清）足以封閉膜上未反應(yīng)的位點(diǎn)，減少檢測過程中非特異性抗體結(jié)合的量；然而，它們并非為在轉(zhuǎn)膜過程中保護(hù)磷酸化蛋白抗原而設(shè)計(jì)。

作為Cell Biolabs全國總代理，艾美捷科技強(qiáng)烈推薦Cell Biolabs熱銷產(chǎn)品磷酸阻斷劑。產(chǎn)品僅用于科研，不可用于臨床診斷。

Cell Biolabs的PhosphoBLOCKER?含有專有配方，與傳統(tǒng)封閉液相比具有多項(xiàng)優(yōu)勢：

專為磷酸化蛋白轉(zhuǎn)膜設(shè)計(jì)

在不增加背景的情況下增強(qiáng)低水平磷酸化蛋白信號(hào)

預(yù)混合的干粉，使用方便

方法

在TBST或PBST中新鮮配制5% PhosphoBLOCKER?溶液。使用5% PhosphoBLOCKER?溶液封閉轉(zhuǎn)膜。在檢測轉(zhuǎn)膜時(shí)，使用5% PhosphoBLOCKER?溶液稀釋一抗和二抗。

注意事項(xiàng)：

復(fù)溶后的PhosphoBLOCKER?溶液在4℃下僅能保存一周。

出現(xiàn)深色顆粒是制造過程中的正常現(xiàn)象，不會(huì)影響產(chǎn)品的性能。如果需要，可在復(fù)溶后通過標(biāo)準(zhǔn)實(shí)驗(yàn)室濾紙過濾去除顆粒。

結(jié)果示例

以下圖表展示了典型的滴定結(jié)果。以下數(shù)據(jù)僅供參考，不應(yīng)用于解釋實(shí)際結(jié)果。

圖1. A549細(xì)胞裂解液中Phospho-p38的Western Blot

最近的產(chǎn)品引用：

1. Tr?da, C. et al. (2023). Increased EGFRvIII Epitope Accessibility after Tyrosine Kinase Inhibitor Treatment of Glioblastoma Cells Creates More Opportunities for Immunotherapy. Int J Mol Sci.24(5):4350. doi: 10.3390/ijms24054350.

2. Goddi, A. et al. (2022). Laminin-α4 negatively regulates adipocyte beiging through the suppression of AMPKα in male mice. Endocrinology. doi: 10.1210/endocr/bqac154.

3. Egbert, C. et al. (2022). The integration of proteome-wide PTM data with protein structural and sequence features identifies phosphorylations that mediate 14-3-3 interactions. J Mol Biol. doi:10.1016/j.jmb.2022.167890.

4. Pinheiro, I. et al. (2022). A Nine-Strain Bacterial Consortium Improves Portal Hypertension and Insulin Signaling and Delays NAFLD Progression In Vivo. Biomedicines. 10(5):1191. doi:

10.3390/biomedicines10051191.

Cell Biolabs公司位于美國加利福尼亞州南部重要的工業(yè)城市圣迭戈（San Diego），是有名的細(xì)胞學(xué)試劑品牌，作為前沿的細(xì)胞學(xué)分析檢測試劑盒生產(chǎn)商，為生物技術(shù)和研究類客戶提供好的基于細(xì)胞功能研究以及疾病等方面的高端產(chǎn)品和技術(shù)服務(wù)。產(chǎn)品主要涵蓋細(xì)胞研究、細(xì)胞信號(hào)通路和蛋白質(zhì)生物學(xué)、代謝研究、病原體和毒素、干細(xì)胞研究等領(lǐng)域。全球眾多大學(xué)、政府研究機(jī)構(gòu)、生物、制藥企業(yè)的科研實(shí)驗(yàn)室均在使用Cell Biolabs的產(chǎn)品。