生長激素結(jié)合蛋白（GHBP）由238個氨基酸組成，包括四個糖基化位點和三個二硫鍵。在人類中，GHBP是通過金屬蛋白酶（ADAM17）對生長激素受體進行脫落而形成的。在平衡狀態(tài)下，大約50%的循環(huán)生長激素（GH）與GHBP結(jié)合，但只有2%的循環(huán)GHBP與GH分子以1:1的化學(xué)計量比結(jié)合。只有在超生理水平的GHBP情況下，才會出現(xiàn)2:1的比例。GH和GHBP的復(fù)合物的大致分子量為80 kDa（GHBP 60 kDa）。在動物模型（豚鼠）中，復(fù)合物的形成將半衰期從11-20分鐘增加到大約100分鐘，一般來說，與GHBP的結(jié)合抑制了GH的細(xì)胞作用。

GHBP生理學(xué)

GHBP濃度獨立于GH的脈沖分泌，并且不顯示晝夜節(jié)律。GHBP水平在生命的前2-6個月很低，在頭兩年急劇上升，然后直到成年早期緩慢上升。從第四個十年開始，GHBP血清濃度緩慢下降。

作為ALPCO在中國的區(qū)域總代理，艾美捷科技強烈推薦ALPCO熱銷產(chǎn)品生長激素結(jié)合蛋白(GHBP) ELISA試劑盒，96孔。產(chǎn)品僅用于科研，不可用于臨床診斷。

生長激素結(jié)合蛋白(GHBP) ELISA試劑盒，96孔檢測原理：

該檢測基于多克隆抗體和在真核細(xì)胞中表達的重組GHBP。GHBP的ELISA是一種所謂的三明治檢測法。它利用兩種特異性、高親和力的抗體。首先，樣品中的GHBP與微量滴定板上的固定抗體結(jié)合。分兩步走結(jié)合生物素偶聯(lián)的抗GHBP抗體和鏈霉抗生物素蛋白過氧化物酶。隨后，過氧化物酶催化酶反應(yīng)，導(dǎo)致藍色。這個藍色的強度取決于樣品的GHBP含量。反應(yīng)被停止

通過測量吸收來量化停止溶液的添加和顏色強度。GHBP ELISA允許安全和可重復(fù)地測量人體體液中的GHBP是研究GHBP作為能量和脂肪代謝生物標(biāo)志物的合適工具。

警告和注意事項

僅限研究和專業(yè)使用。

本試劑盒僅適用于體外使用，不適用于人體和動物內(nèi)部使用。嚴(yán)格遵循測試協(xié)議。使用試劑盒中提供的說明書的有效版本。確保已經(jīng)理解所有內(nèi)容。ALPCO不對因不遵守所提供說明而造成的任何損失或損害（法定要求除外）承擔(dān)責(zé)任。不要使用明顯損壞的、微生物污染的或已溢出的材料。

注意：本試劑盒包含人和/或動物來源的材料。因此，所有組分和樣本應(yīng)被視為潛在的傳染性物質(zhì)。在試劑盒的儲存、處理和處置過程中，必須采取適當(dāng)?shù)念A(yù)防措施和良好的實驗室操作規(guī)范。試劑盒組分的處置必須根據(jù)當(dāng)?shù)胤ㄒ?guī)進行。

人血清

以下組分含有人血清：對照血清KS、KS2和標(biāo)準(zhǔn)A-F。

本試劑盒中的對照血清的人源血清經(jīng)過檢測，結(jié)果對乙型肝炎表面抗原（HBsAg）、丙型肝炎病毒（HCV）和人類免疫缺陷病毒1型和2型（HIV）呈非反應(yīng)性。沒有已知的方法可以完全確保沒有傳染性病原體的存在；因此，所有組分和樣本應(yīng)被視為潛在的傳染性物質(zhì)。

標(biāo)準(zhǔn)曲線：

圖1：標(biāo)準(zhǔn)曲線示例

特異性：

在GHBP ELISA中用于檢測GHBP的抗體的特異性是通過尺寸排除色譜分析富集了重組生長激素的人血清（圖2）以及隨后使用GHBP抗體分析SEC分?jǐn)?shù)來評估的。

圖2：人血清中添加了3 ?g/mL重組生長激素（GH），在4°C下孵育超過20小時后，通過尺寸排除色譜（Superdex 10/300；流速：0.5 mL/min；分?jǐn)?shù)大小：0.4 mL/min）分離富含的血清。在用稀釋緩沖液稀釋后，通過GHBP抗血清和GH ELISA測量GHBP和GH。分析顯示GHBP抗體在100 kDa處檢測到信號，并且一個小的肩部可以被解釋為在340 kDa處的額外信號。正如預(yù)期的那樣，GH在22 kDa（未結(jié)合的GH）、100 kDa處被檢測到，并且在大于340 kDa處出現(xiàn)第二個峰。這表明GHBP抗體檢測到的蛋白質(zhì)與GH結(jié)合，這表明檢測到的蛋白質(zhì)具有GH結(jié)合特性。GH/GHBP復(fù)合物的預(yù)期分子量為80 kDa，略小于抗體檢測到的GH/GHBP復(fù)合物的大小。這可能是由于方法學(xué)變異或天然GHBP的不同糖基化造成的。

ALPCO產(chǎn)品種類多樣，可測樣品來源包括人、大/小鼠、豚鼠、兔、豬、羊、狗、猴等，涉及神經(jīng)生物學(xué)、骨代謝、心血管疾病和氧化應(yīng)激、細(xì)胞因子與信號轉(zhuǎn)導(dǎo)、糖尿病和肥胖癥、內(nèi)分泌學(xué)、甲狀腺功能、腸胃病學(xué)、免疫學(xué)、生殖激素、抗體和抗原、分子診斷等多個研究領(lǐng)域，尤以糖尿病和肥胖癥研究領(lǐng)域見長。

作為ALPCO在中國區(qū)域的代理，艾美捷科技有限公司將為中國客戶提供全面的ALPCO產(chǎn)品。