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ALPCO Chemerin ELISA, 96孔檢測原理說明及注意事項

發(fā)布者:艾美捷科技    發(fā)布時間:2024-09-15     
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Chemerin,也稱為tazarotene誘導(dǎo)基因2(TIG2)或視黃酸受體響應(yīng)因子2(RARRES2),是一種由163個氨基酸組成的前體蛋白,包括一個20個氨基酸的N端信號肽。不活躍的循環(huán)前體Chemerin含有六個半胱氨酸殘基,因此可能形成三個分子內(nèi)二硫鍵(1)。

已在肝臟、肺、垂體、淋巴結(jié)、胃和脂肪組織中證實了前體Chemerin的表達(1, 2)。它已在血液、卵巢和肝癌患者的腹水以及關(guān)節(jié)炎患者的滑膜液中被檢測到(1)。在脾臟、淋巴結(jié)、小腸、肺組織以及巨噬細胞和未成熟樹突狀細胞中發(fā)現(xiàn)了不同的受體(1, 3)。

前體Chemerin通過絲氨酸或半胱氨酸蛋白酶轉(zhuǎn)化為其生物活性形式,分別產(chǎn)生活性蛋白的促炎或抗炎作用。Chemerin的蛋白水解裂解已由以下絲氨酸蛋白酶描述:胰蛋白酶、纖溶酶、彈性蛋白酶、組織蛋白酶G以及半胱氨酸蛋白酶組織蛋白酶S和鈣蛋白酶(4-6)。

活性蛋白參與先天和適應(yīng)性免疫反應(yīng),例如作為未成熟樹突狀細胞和巨噬細胞的強效趨化因子。它通過與其特異性受體結(jié)合影響細胞內(nèi)信號傳導(dǎo)。Chemerin的C末端結(jié)構(gòu)域允許與受體ChemR23/CMKLR1結(jié)合,并通過誘導(dǎo)Ca2+內(nèi)流和ERK1/2激活來引發(fā)促炎刺激。此外,Chemerin的N末端結(jié)構(gòu)域與CCRL2受體結(jié)合,并允許將C末端結(jié)構(gòu)域呈現(xiàn)給鄰近細胞。在前體Chemerin和半胱氨酸蛋白酶裂解的情況下,產(chǎn)生的肽對ChemR23/CMKLR1受體具有抑制作用,因此具有抗炎效應(yīng)。

最近,發(fā)現(xiàn)Chemerin在脂肪生成和脂肪細胞代謝中的重要性(2, 7)。Goralski等人在小鼠中證明,Chemerin及其受體(ChemR23)在內(nèi)臟和皮下脂肪組織的脂肪細胞中表達。在脂肪細胞分化過程中,表達和分泌增加。在脂肪細胞的培養(yǎng)基中發(fā)現(xiàn)了16 kDa的活性Chemerin。Chemerin還影響脂肪細胞內(nèi)的信號傳導(dǎo)網(wǎng)絡(luò),例如,已證明其刺激MAPK p42/44(ERK1/2)磷酸化。此外,作者還展示了Chemerin對脂肪細胞基因表達的后分化效應(yīng)。

基于這些結(jié)果,提出了Chemerin對代謝綜合征和胰島素抵抗的影響。研究表明,Chemerin在肥胖人類的脂肪組織中表達更高,并且能夠損害肌肉細胞的胰島素敏感性以及脂肪細胞中的胰島素介導(dǎo)的脂肪分解和脂肪生成(8, 9)。已經(jīng)表明Chemerin與炎癥標(biāo)志物和代謝綜合征的成分(10, 11)以及腎功能(12)相關(guān)聯(lián)。

Chemerin ELISA用于定量測定人血清和血漿樣本中的總Chemerin。僅供研究使用。不用于診斷程序


作為ALPCO在中國的區(qū)域總代理,艾美捷科技強烈推薦ALPCO熱銷產(chǎn)品Chemerin ELISA, 96孔產(chǎn)品僅用于科研,不可用于臨床診斷。

產(chǎn)品名稱貨號詳情

Chemerin ELISA, 96孔

ALP-22-CHMHU-E01查看


Chemerin ELISA, 96孔檢測原理:

Chemerin ELISA是一種所謂的三明治檢測。它利用兩種針對這種蛋白質(zhì)的特異性和高親和力抗體。樣品中的Chemerin與微量滴定板上固定的第一抗體結(jié)合。在接下來的步驟中,生物素化和鏈霉抗生物素蛋白過氧化物酶偶聯(lián)的第二特異性抗Chemerin抗體依次與固定的Chemerin結(jié)合。在閉合底物反應(yīng)中,顏色變化是高度特異性的反應(yīng),定量取決于樣品的Chemerins水平。


警告和注意事項:

僅限研究使用。不用于診斷程序。

在開始檢測前,完整且仔細地閱讀說明書。使用隨試劑盒提供的說明書的有效版本。確保理解所有內(nèi)容。

溫度會影響檢測的吸光度讀數(shù)。然而,樣本的值不會受到影響。

注意:本試劑盒包含人和/或動物來源的材料。本試劑盒提供的對照血清的人血清來源已進行檢測,結(jié)果對乙型肝炎表面抗原(HBsAg)、丙型肝炎病毒(HCV)和人類免疫缺陷病毒1型和2型(HIV)抗體呈非反應(yīng)性。沒有已知的檢測方法能完全保證沒有傳染性病原體的存在;因此,應(yīng)將所有組分和樣本視為潛在的傳染性。

容器和未使用內(nèi)容物的處置應(yīng)按照聯(lián)邦和當(dāng)?shù)氐谋O(jiān)管要求進行。

必須盡可能快地進行樣本和試劑的移液,并在每個步驟中按照相同的順序進行。對每個樣本、對照和試劑使用單獨的移液槍頭,以避免交叉污染。僅對單一試劑使用儲液槽。這一點特別適用于底物儲液槽。使用儲液槽分裝之前用于偶聯(lián)液的底物溶液可能會導(dǎo)致溶液變色。不要把試劑倒回瓶中,因為可能會發(fā)生試劑污染。徹底混合微孔板孔內(nèi)的內(nèi)容物,以確保良好的測試結(jié)果。不要重復(fù)使用微孔。不要讓孔在檢測過程中變干;在完成沖洗步驟后立即添加試劑。


標(biāo)準(zhǔn)曲線:

22-CHMHU-E01.png

圖1。具有3個多項式曲線擬合的標(biāo)準(zhǔn)曲線示例。


文獻參考:

1. Wittamer V, Franssen JD, Vulcano M, Mirjolet JF, Le Poul E, Migeotte I, et al. Specificrecruitment of antigen-presenting cells by chemerin, a novel processed ligand from humaninflammatory fluids. J Exp Med 2003;198:977-85.

2. Bozaoglu K, Bolton K, McMillan J, Zimmet P, Jowett J, Collier G, et al. Chemerin is a noveladipokine associated with obesity and metabolic syndrome. Endocrinology 2007;148:4687-94.

3. Roh SG, Song SH, Choi KC, Katoh K, Wittamer V, Parmentier M, Sasaki S. Chemerin--a newadipokine that modulates adipogenesis via its own receptor. Biochem Biophys Res Commun2007;362:1013-8.


ALPCO產(chǎn)品種類多樣,可測樣品來源包括人、大/小鼠、豚鼠、兔、豬、羊、狗、猴等,涉及神經(jīng)生物學(xué)、骨代謝、心血管疾病和氧化應(yīng)激、細胞因子與信號轉(zhuǎn)導(dǎo)、糖尿病和肥胖癥、內(nèi)分泌學(xué)、甲狀腺功能、腸胃病學(xué)、免疫學(xué)、生殖激素、抗體和抗原、分子診斷等多個研究領(lǐng)域,尤以糖尿病和肥胖癥研究領(lǐng)域見長。


作為ALPCO在中國區(qū)域的代理,艾美捷科技有限公司將為中國客戶提供全面的ALPCO產(chǎn)品。


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