豬白蛋白ELISA是一種高靈敏度的雙位點酶聯(lián)免疫測定法（ELISA）用于測定豬血清、血漿和尿液中的白蛋白。

作為ALPCO在中國的區(qū)域總代理，艾美捷科技強烈推薦ALPCO熱銷產(chǎn)品白蛋白(豬)ELISA試劑盒，96孔。產(chǎn)品僅用于科研，不可用于臨床診斷。

白蛋白(豬)ELISA試劑盒，96孔檢測原理：

如圖1所示，這種測定方法中，樣品中的白蛋白與已吸附在聚苯乙烯微孔板表面的抗白蛋白抗體反應(yīng)。通過洗滌去除未結(jié)合的蛋白質(zhì)后，加入與辣根過氧化物酶（HRP）偶聯(lián)的抗白蛋白抗體。這些酶標(biāo)記的抗體與之前結(jié)合的白蛋白形成復(fù)合物。經(jīng)過另一次洗滌步驟后，通過添加顯色底物3,3',5,5'-四甲基聯(lián)苯胺（TMB），檢測免疫吸附劑上的酶。結(jié)合的酶量與測試樣品中白蛋白的濃度直接相關(guān)；因此，450納米處的吸光度是測試樣品中白蛋白濃度的量度。測試樣品中的白蛋白量可以從標(biāo)準(zhǔn)曲線中插值得到，并根據(jù)樣品稀釋進行校正。

樣品收集和處理

所有血液成分和生物材料應(yīng)視為潛在危險物。處理和處置時應(yīng)遵循通用預(yù)防措施。

如果血液樣品出現(xiàn)凝固、嚴(yán)重溶血、脂血或樣品完整性受到懷疑，請做好記錄，并謹(jǐn)慎解釋結(jié)果。

以下列出的樣品收集和儲存條件僅供參考。樣品的穩(wěn)定性尚未評估。

- 血清樣品：應(yīng)通過靜脈穿刺收集血液。通過離心分離血清和細胞。取出血清并立即檢測或分裝后儲存于-80°C（最好）或-20°C。避免反復(fù)凍融。

- 血漿樣品：應(yīng)將血液收集到含有抗凝劑的容器中，然后進行離心。立即檢測或分裝后儲存于-80°C（最好）或-20°C。避免反復(fù)凍融。

- 尿液樣品：使用無菌或清潔的尿液收集器收集中段尿液。離心以去除細胞碎片。立即檢測或分裝后儲存于-80°C（最好）或-20°C。避免反復(fù)凍融。

- 已知干擾物質(zhì)：濃度高于0.1%的疊氮化物和硫柳汞會抑制酶反應(yīng)。

樣品稀釋

該檢測要求每個測試樣品在使用前進行稀釋。每次進行檢測時，所有樣品都應(yīng)以雙份量進行檢測。推薦的稀釋比例僅供參考。稀釋應(yīng)基于未知樣品的預(yù)期濃度，以使稀釋后的樣品落在標(biāo)準(zhǔn)曲線的動態(tài)范圍內(nèi)。如果不確定樣品值，強烈建議在運行整個板之前，先對一個或兩個代表性樣品進行系列稀釋檢測。

- 血清和血漿樣品：建議起始稀釋比例為1:400,000。要制備1:400,000的樣品稀釋液，將2微升樣品轉(zhuǎn)移到1998微升的1X稀釋液中。這會產(chǎn)生1:1,000的稀釋。接下來，將1:1,000的樣品通過將2微升轉(zhuǎn)移到798微升的1X稀釋液中進行稀釋。這會產(chǎn)生1:400,000的稀釋。每個階段都要徹底混合。

- 尿液樣品：建議起始稀釋比例為1:500。要制備1:500的樣品稀釋液，將2微升樣品轉(zhuǎn)移到998微升的1X稀釋液中。這會產(chǎn)生1:500的稀釋。徹底混合。

結(jié)果計算

1. 從所有孔的測試值中減去平均背景值（標(biāo)準(zhǔn)零的平均吸光度讀數(shù)）。

2. 對每個標(biāo)準(zhǔn)的平均重復(fù)讀數(shù)取平均值，并使用結(jié)果構(gòu)建標(biāo)準(zhǔn)曲線。通過使用能夠生成四參數(shù)邏輯（4-PL）曲線擬合的計算機軟件來減少數(shù)據(jù)，構(gòu)建標(biāo)準(zhǔn)曲線。也可以使用二階多項式（二次）或其他曲線擬合，但它們對數(shù)據(jù)的擬合將不夠精確。

3. 從標(biāo)準(zhǔn)曲線中插值得到測試樣品值。校正稀釋因子，以得到原始樣品中的白蛋白濃度。

ALPCO產(chǎn)品種類多樣，可測樣品來源包括人、大/小鼠、豚鼠、兔、豬、羊、狗、猴等，涉及神經(jīng)生物學(xué)、骨代謝、心血管疾病和氧化應(yīng)激、細胞因子與信號轉(zhuǎn)導(dǎo)、糖尿病和肥胖癥、內(nèi)分泌學(xué)、甲狀腺功能、腸胃病學(xué)、免疫學(xué)、生殖激素、抗體和抗原、分子診斷等多個研究領(lǐng)域，尤以糖尿病和肥胖癥研究領(lǐng)域見長。

作為ALPCO在中國區(qū)域的代理，艾美捷科技有限公司將為中國客戶提供全面的ALPCO產(chǎn)品。