IgG檢測(cè)試劑盒是一種高靈敏度的雙位點(diǎn)酶聯(lián)免疫測(cè)定法（ELISA），用于測(cè)量大鼠血清和血漿樣本中的IgG。

作為ALPCO在中國(guó)的區(qū)域總代理，艾美捷科技強(qiáng)烈推薦ALPCO熱銷產(chǎn)品IgG(大鼠)ELISA, 96孔。產(chǎn)品僅用于科研，不可用于臨床診斷。

IgG(大鼠)ELISA, 96孔檢測(cè)原理：

雙抗體夾心ELISA的原理如圖1所示。在該檢測(cè)中，樣品中的IgG與已吸附在聚苯乙烯微量滴定孔表面的抗IgG抗體反應(yīng)。在通過(guò)洗滌去除未結(jié)合的蛋白質(zhì)后，加入與辣根過(guò)氧化物酶（HRP）偶聯(lián)的抗IgG抗體。這些酶標(biāo)記的抗體與先前結(jié)合的IgG形成復(fù)合物。經(jīng)過(guò)另一輪洗滌后，結(jié)合的酶標(biāo)記抗IgG抗體通過(guò)添加顯色底物3,3',5,5'-四甲基苯胺（TMB）進(jìn)行檢測(cè)。結(jié)合的酶量與所測(cè)試樣品中IgG的濃度成正比；因此，在450 nm處的吸光度可以用來(lái)測(cè)量測(cè)試樣品中IgG的濃度。測(cè)試樣品中IgG的量可以通過(guò)根據(jù)標(biāo)準(zhǔn)品構(gòu)建的標(biāo)準(zhǔn)曲線進(jìn)行插值得到，并已根據(jù)樣品稀釋進(jìn)行校正。

樣本收集和處理

所有血液成分和生物材料應(yīng)視為潛在危險(xiǎn)物質(zhì)進(jìn)行處理。在處理和處置時(shí)應(yīng)遵循普遍安全預(yù)防措施。如果血樣凝固、明顯溶血、乳糜，或樣本的完整性存在問(wèn)題，請(qǐng)做好記錄并謹(jǐn)慎解釋結(jié)果。以下列出的樣本收集和存儲(chǔ)條件僅作為一般指南，樣本的穩(wěn)定性尚未評(píng)估。

血清樣本：應(yīng)通過(guò)靜脈穿刺采集血液。血液凝固后，應(yīng)通過(guò)離心分離血清與細(xì)胞。去除血清并立即檢測(cè)，或分裝并將樣本存儲(chǔ)于-80°C（優(yōu)選）或-20°C。避免反復(fù)凍融。

血漿樣本：應(yīng)將血液采集到含有抗凝劑的容器中，然后離心。立即檢測(cè)或分裝并將樣本存儲(chǔ)于-80°C（優(yōu)選）或-20°C。避免反復(fù)凍融。

已知干擾物質(zhì)：濃度高于0.1%的疊氮化鈉和硫柳汞會(huì)抑制酶反應(yīng)。

樣本稀釋

該檢測(cè)要求每個(gè)測(cè)試樣本在使用前進(jìn)行稀釋。每次進(jìn)行檢測(cè)時(shí)，所有樣本應(yīng)重復(fù)檢測(cè)兩次。推薦的稀釋比例僅為建議，稀釋應(yīng)基于未知樣本的預(yù)期濃度，使稀釋樣本落在標(biāo)準(zhǔn)曲線的動(dòng)態(tài)范圍內(nèi)。如果不確定樣本值，強(qiáng)烈建議在運(yùn)行整個(gè)板之前，先對(duì)一兩個(gè)代表性樣本進(jìn)行系列稀釋檢測(cè)。

血清樣本：推薦的起始稀釋比例為1:80,000。要準(zhǔn)備1:80,000的樣本稀釋液，將5 ?L的樣本轉(zhuǎn)移到995 ?L的1X稀釋液中。這將得到1:200的稀釋液。接下來(lái)，通過(guò)將2 ?L轉(zhuǎn)移到798 ?L的1X稀釋液中，將1:200的稀釋液進(jìn)一步稀釋。這將得到最終的1:80,000稀釋液。每個(gè)步驟都要充分混合。

血漿樣本：推薦的起始稀釋比例為1:80,000。要準(zhǔn)備1:80,000的樣本稀釋液，將5 ?L的樣本轉(zhuǎn)移到995 ?L的1X稀釋液中。這將得到1:200的稀釋液。接下來(lái)，通過(guò)將2 ?L轉(zhuǎn)移到798 ?L的1X稀釋液中，將1:200的稀釋液進(jìn)一步稀釋。這將得到最終的1:80,000稀釋液。每個(gè)步驟都要充分混合。

試劑準(zhǔn)備

使用前將所有試劑帶至室溫（16°C至25°C）。

稀釋液濃縮液：所提供的稀釋液為5X濃縮液，必須與蒸餾水或去離子水以1:5的比例稀釋（1份緩沖液濃縮液，4份去離子水）。

洗滌液濃縮液：所提供的洗滌液為濃縮液，必須與蒸餾水或去離子水以1:20的比例稀釋（1份緩沖液濃縮液，19份去離子水）。在低溫儲(chǔ)存時(shí)，濃縮液中可能會(huì)形成晶體。將濃縮液加熱至30-35°C后再稀釋，可以溶解晶體。

酶-抗體偶聯(lián)物：通過(guò)將10 ?L酶-抗體偶聯(lián)物加入990 ?L的1X稀釋液，計(jì)算每個(gè)微量滴定板測(cè)試條所需的工作偶聯(lián)物溶液的量。使用前立即稀釋并避免光照。均勻混合，但要輕柔，避免產(chǎn)生泡沫。

預(yù)涂ELISA微孔板：按照提供的方式準(zhǔn)備即可使用。打開(kāi)鋁箔袋，取出板。去除所有不在檢測(cè)中的條和孔，將其放回袋中并與干燥劑重新封口。

大鼠IgG標(biāo)定物：根據(jù)批次特定的分析證書(shū)準(zhǔn)備。

ALPCO產(chǎn)品種類多樣，可測(cè)樣品來(lái)源包括人、大/小鼠、豚鼠、兔、豬、羊、狗、猴等，涉及神經(jīng)生物學(xué)、骨代謝、心血管疾病和氧化應(yīng)激、細(xì)胞因子與信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)、糖尿病和肥胖癥、內(nèi)分泌學(xué)、甲狀腺功能、腸胃病學(xué)、免疫學(xué)、生殖激素、抗體和抗原、分子診斷等多個(gè)研究領(lǐng)域，尤以糖尿病和肥胖癥研究領(lǐng)域見(jiàn)長(zhǎng)。

作為ALPCO在中國(guó)區(qū)域的代理，艾美捷科技有限公司將為中國(guó)客戶提供全面的ALPCO產(chǎn)品。