IgG檢測試劑盒是一種高靈敏度的雙位點酶聯(lián)免疫測定（ELISA）試劑盒，用于檢測小鼠血清和血漿樣本中免疫球蛋白G（IgG）的定量測定。For僅供研究使用。不用于診斷程序。

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小鼠IgG ELISA試劑盒檢測原理：

IgG檢測試劑盒是一種高靈敏度的雙位點酶聯(lián)免疫測定（ELISA）試劑盒，用于檢測小鼠血清和血漿樣本中免疫球蛋白G（IgG）的定量測定。For僅供研究使用。不用于診斷雙抗體夾心ELISA的原理如圖1所示。在該試驗中樣品中存在的IgG與吸附在聚苯乙烯微量滴定孔的表面。通過洗滌去除未結(jié)合的蛋白質(zhì)后，加入與辣根過氧化物酶（HRP）結(jié)合的抗IgG抗體。這些酶被標記抗體與先前結(jié)合的IgG形成復(fù)合物。在另一個洗滌步驟之后通過添加顯色底物3,3'，5,5'來測定結(jié)合酶-四甲基聯(lián)苯胺（TMB）。結(jié)合酶的量與濃度成正比檢測樣本中的IgG；因此，450nm處的吸光度是濃度的度量檢測樣本中的IgG。測試樣本中的IgG含量可以從由標準品構(gòu)建并校正樣品稀釋的標準曲線。

所需材料（未提供）

精密移液器（2 ?L 到 1000 ?L），用于制備和分配稀釋液

試管

噴瓶或微孔洗滌器/吸引器

蒸餾水或去離子水

微孔板讀數(shù)儀

用于制備試劑和緩沖液的各種玻璃器皿

計時器

抗凝劑（用于采集血漿樣本）

離心機

樣本采集與處理

所有血液成分和生物材料應(yīng)視為潛在危險品進行處理。處理和處置時請遵循普遍預(yù)防措施。如果血樣發(fā)生凝固、嚴重溶血、乳糜或樣本完整性存在疑慮，請做記錄，并謹慎解讀結(jié)果。

以下樣本采集和儲存條件僅作為一般指導(dǎo)，樣本的穩(wěn)定性尚未評估。

血清樣本：應(yīng)通過靜脈穿刺采集血液。血液凝固后，通過離心分離血清。取出血清后立即進行檢測，或?qū)颖痉盅b并儲存于-80°C（優(yōu)選）或-20°C。避免反復(fù)凍融。

血漿樣本：應(yīng)將血液采集到含抗凝劑的容器中，然后進行離心。立即檢測，或?qū)颖痉盅b并儲存于-80°C（優(yōu)選）或-20°C。避免反復(fù)凍融。

已知干擾物質(zhì)：氮化鈉和硫柳汞濃度高于0.1%會抑制酶反應(yīng)。

樣本稀釋

該檢測要求在使用前對每個測試樣本進行稀釋。每次進行檢測時，所有樣本應(yīng)以重復(fù)方式檢測。建議的稀釋倍數(shù)僅供參考。稀釋應(yīng)根據(jù)未知樣本的預(yù)期濃度進行，以確保稀釋樣本落在標準曲線的動態(tài)范圍內(nèi)。如果不確定樣本值，強烈建議在運行整個板之前，先對一至兩個代表樣本進行系列稀釋檢測。

血清和血漿樣本：推薦的起始稀釋倍數(shù)為1:400,000。要制備1:400,000的稀釋樣本，將2 ?L的樣本轉(zhuǎn)移至1,998 ?L的1X稀釋液中。這將產(chǎn)生1:1,000的稀釋。接下來，將1:1,000的樣本通過將2 ?L轉(zhuǎn)移到798 ?L的1X稀釋液中進一步稀釋。這將產(chǎn)生1:400,000的稀釋。在每個步驟中均需充分混合。

試劑準備

在使用前，將所有試劑放置至室溫（16°C至25°C）。

稀釋液濃縮液：提供的稀釋液為5X濃縮液，需用蒸餾水或去離子水以1:5的比例稀釋（1份緩沖液濃縮液，4份dH2O）。

洗滌液濃縮液：提供的洗滌液為20X濃縮液，需用蒸餾水或去離子水以1:20的比例稀釋（1份緩沖液濃縮液，19份dH2O）。濃縮液在低溫存儲時可能會結(jié)晶。在稀釋前，將濃縮液加熱至30-35°C可以溶解結(jié)晶。

酶-抗體結(jié)合物：通過將10 ?L酶-抗體結(jié)合物添加到990 ?L的1X稀釋液中，計算每個微孔板測試條所需的工作結(jié)合物溶液的量。使用前立即稀釋并避免光照。輕輕均勻混合，避免起泡。

預(yù)涂ELISA微孔板：可直接使用。打開鋁箔袋，取出板塊。移除不用于檢測的所有條形和孔，并將其放回袋中，連同干燥劑一起重新封口。

小鼠IgG標準品：根據(jù)批次特定的分析證書進行準備。

ALPCO產(chǎn)品種類多樣，可測樣品來源包括人、大/小鼠、豚鼠、兔、豬、羊、狗、猴等，涉及神經(jīng)生物學、骨代謝、心血管疾病和氧化應(yīng)激、細胞因子與信號轉(zhuǎn)導(dǎo)、糖尿病和肥胖癥、內(nèi)分泌學、甲狀腺功能、腸胃病學、免疫學、生殖激素、抗體和抗原、分子診斷等多個研究領(lǐng)域，尤以糖尿病和肥胖癥研究領(lǐng)域見長。

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