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HMW和總脂聯(lián)素ELISA用于定量測(cè)定人血清和血漿(EDTA、肝素和檸檬酸鹽)樣本中的HMW和總脂聯(lián)素。脂聯(lián)素是一種基于研究的生物標(biāo)志物,迄今為止還沒(méi)有任何臨床應(yīng)用價(jià)值。該檢測(cè)方法是作為生命科學(xué)研究工具開發(fā)的,僅供研究使用。不用于診斷程序。
艾美捷高分子量,總脂聯(lián)素ELISA試劑盒(ALP-80-ADPHU-E01)檢測(cè)原理:
HMW和總脂聯(lián)素ELISA是一種同時(shí)進(jìn)行的夾心法,它使用兩種小鼠單克隆抗體:一種作為吸附在96孔微孔板上的捕獲物,另一種作為與生物素結(jié)合的主要檢測(cè)器。將標(biāo)準(zhǔn)品、稀釋樣品(用SampleTreatment Enzyme處理或未處理)、對(duì)照品和生物素化檢測(cè)抗體加入板中,并在室溫下在700-900rpm的搖床上孵育捕獲抗原檢測(cè)三明治。SA-HRP孵育后,將平板洗滌六次,將TMB底物加入每個(gè)孔中,并在700-900rpm的微孔板振蕩器上孵育微孔板。加入終止溶液,用分光光度計(jì)在450nm處測(cè)量光密度(OD)。產(chǎn)生的顏色強(qiáng)度與樣品中HMW和/或總脂聯(lián)素的含量成正比。
所需材料
1用于分發(fā)高達(dá)1000 ?L的精密移液管(帶一次性吸頭)
2用于分發(fā)高達(dá)100 ?L的可重復(fù)或多通道移液管
3用于試劑準(zhǔn)備的量筒和移液管
4用于試劑準(zhǔn)備的蒸餾/去離子水
5微孔板洗滌器或洗滌瓶
6能夠達(dá)到700-900轉(zhuǎn)每分鐘的微孔板振蕩器
7帶有450nm濾光片的微孔板讀取器
8離心機(jī)(10000 xg至16000 xg)、漩渦混合器和冰,用于樣本準(zhǔn)備
9微量離心管(1.5 mL或更大)用于樣本準(zhǔn)備(每個(gè)樣本2個(gè)管)
10能夠達(dá)到37°C的熱塊或水浴
注意事項(xiàng)
1. 試劑盒中包含的人類血液產(chǎn)品已檢測(cè)HIV(人類免疫缺陷病毒)、HBV(乙型肝炎病毒)和HCV(丙型肝炎病毒)的存在。這些病毒的檢測(cè)方法不能保證病毒的完全不存在;因此,所有試劑應(yīng)被視為潛在的傳染性物質(zhì)。處理和處置應(yīng)符合所有適當(dāng)?shù)膰?guó)家和地方法規(guī),以處理潛在的生物危害材料。
2. 所有來(lái)自動(dòng)物來(lái)源的材料均為牛海綿狀腦病(BSE)陰性。然而,所有材料應(yīng)被視為潛在的傳染性物質(zhì)。
3. 避免與皮膚直接接觸。
4. 本產(chǎn)品不可內(nèi)服。
5. 使用本產(chǎn)品時(shí),避免進(jìn)食、飲水或吸煙。
6. 不要使用口吸移液任何試劑。
7. 試劑盒中的試劑是特定批次的,不得替換。
8. 不要使用超過(guò)有效期的試劑。
9. 不建議修改測(cè)試程序,可能會(huì)影響測(cè)試結(jié)果。
儲(chǔ)存條件
試劑盒應(yīng)存放在2-8°C。試劑盒在盒標(biāo)簽上的有效期前是穩(wěn)定的。如果需要,重懸的對(duì)照品和標(biāo)準(zhǔn)品可以分裝后在≤ -20°C下儲(chǔ)存長(zhǎng)達(dá)6個(gè)月。重懸的樣本處理酶可以在≤ -20°C下儲(chǔ)存長(zhǎng)達(dá)1個(gè)月。冷凍重懸的材料不應(yīng)反復(fù)凍融。
高分子量,總脂聯(lián)素ELISA試劑盒典型標(biāo)準(zhǔn)曲線
以下結(jié)果僅供演示之用,不能替代每次測(cè)定獲得的數(shù)據(jù)。每次測(cè)定運(yùn)行和測(cè)試板時(shí),都必須進(jìn)行標(biāo)準(zhǔn)曲線的繪制。在這個(gè)例子中,使用帶有1/y2加權(quán)的四參數(shù)曲線擬合進(jìn)行數(shù)據(jù)分析。

高分子量,總脂聯(lián)素ELISA試劑盒文獻(xiàn)參考:
1. Finlay JWA, Dillard RF. Appropriate Calibration Curve Fitting in Ligand Binding Assays. AAPS Journal. 2007; 9(2): E260-E267.
2. Scherer PE, Williams S, Fogliano M, Baldini G, Lodish HF 1995 A novel serum proteinsimilar to C1q, produced exclusively in adipocytes. J Biol Chem 270:26746-26749
3. Hu E, Liang P, Spiegelman BM 1996 AdipoQ is a novel adipose-specific genedysregulated in obesity. J Biol Chem 18:10697-10703
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