TIM10（線粒體導(dǎo)入內(nèi)膜移位酶亞基TIM10）作為膜間伴侶，參與多通道跨膜蛋白導(dǎo)入和插入線粒體內(nèi)膜。

艾美捷抗TIM 10|線粒體輸入內(nèi)膜轉(zhuǎn)位酶亞基TIM 10：

貨號：AS23-4950

免疫原：來自擬南芥（Arabidopsis thaliana）TIM10蛋白序列的KLH偶聯(lián)獨(dú)特肽。UniProt: Q9ZW33 TAIR: AT2G29530  

宿主：兔  

克隆性：多克隆  

純度：抗原親和純化血清，溶于pH 7.4的PBS中  

形式：凍干  

數(shù)量：50 ug  

復(fù)溶：復(fù)溶時，加入50 ?l無菌或去離子水。  

儲存：凍干/復(fù)溶后存放于-20°C；復(fù)溶后請分裝以避免反復(fù)凍融。打開前請簡短離心以避免凍干物粘附于管蓋或管壁導(dǎo)致?lián)p失。  

測試應(yīng)用：Western blot (WB)  

推薦稀釋度：1: 500 - 1 : 2000 (WB)  

預(yù)期 | 表觀分子量：9.3 | 11 kDa  

確認(rèn)反應(yīng)性：擬南芥、豌豆  

預(yù)測反應(yīng)性：番木瓜（Carica papaya）、芥菜（Brassica rapa）、鹽芥（Eutrema salsugineum）、玉米（Zea mays）  

無反應(yīng)性：目前尚無已知的與預(yù)測反應(yīng)性不符的例外情況

樣品：

1 - 50 ug擬南芥幼苗分離的線粒體提取物#1  

2 - 50 ug擬南芥幼苗分離的線粒體提取物#2  

3 - 50 ug擬南芥細(xì)胞培養(yǎng)分離的線粒體提取物  

4 - 50 ug豌豆幼苗分離的線粒體提取物  

5 - 50 ug水稻幼苗分離的線粒體提取物  

標(biāo)記：藍(lán)色蛋白標(biāo)準(zhǔn)分子量標(biāo)記  

從擬南芥、豌豆和水稻幼苗中新鮮提取的總蛋白50 ug/孔。線粒體提取方法參照Murcha和Whelan（2015）的線粒體分離協(xié)議第1-12頁。樣品在冷條件下在14% SDS-PAGE上分離，并在冷條件下用半干法轉(zhuǎn)移至硝酸纖維素膜（孔徑0.45 um）1小時。膜用10%脫脂牛奶在4°C下振蕩封閉過夜。然后將膜在1X TBS-Tween中1: 500稀釋的一抗中振蕩過夜/4°C。棄去一抗溶液，膜簡短沖洗兩次，然后在室溫下振蕩用TBS-T洗滌一次15分鐘和三次5分鐘。膜在1X TBS-Tween中1: 10000稀釋的匹配二抗（抗兔IgG辣根過氧化物酶偶聯(lián)）中振蕩孵育1小時/室溫。膜按前述方法洗滌，并用化學(xué)發(fā)光檢測試劑顯影。曝光時間為10分鐘。  

線粒體提取方法參照此處描述的方法：MURCHA, M. W. & WHELAN, J. 2015. 從模式植物擬南芥和水稻中分離完整線粒體。見：WHELAN, J. & MURCHA, M. W. (編.) 植物線粒體：方法與協(xié)議. 紐約，NY：Springer New York.

感謝澳大利亞西澳大學(xué)的Valencia Marisa提供