PDHE1-B（丙酮酸脫氫酶E1組分亞基β-1）是丙酮酸脫氫酶復(fù)合物（PDC）的E1β亞基，催化丙酮酸向乙酰輔酶A和CO2的整體轉(zhuǎn)化。

艾美捷抗PDHE 1-B|丙酮酸脫氫酶E1組分亞基β-1,線粒體：

貨號：AS23-4975

免疫原：來自擬南芥（Arabidopsis thaliana）PDHE1-B蛋白序列的KLH偶聯(lián)獨特肽，UniProt: Q38799 TAIR: AT5G50850  

宿主：兔  

克隆性：多克隆  

純度：抗原親和純化血清，溶于pH 7.4的PBS中  

形式：凍干  

數(shù)量：50 ug  

復(fù)溶：復(fù)溶時，加入50 ?l無菌或去離子水。  

儲存：凍干/復(fù)溶后存放于-20°C；復(fù)溶后請分裝以避免反復(fù)凍融。打開前請簡短離心以避免凍干物粘附于管蓋或管壁導(dǎo)致?lián)p失。  

測試應(yīng)用：Western blot (WB)  

推薦稀釋度：1 : 500 - 1: 2000 (WB)  

預(yù)期 | 表觀分子量：39.2 | 37 kDa（信號肽被移除）  

確認反應(yīng)性：擬南芥  

預(yù)測反應(yīng)性：花生（Arachis hypogaea）、短柄草（Brachypodium distachyon）、甘藍型油菜（Brassica napus）、大麻（Cannabis sativa）、辣椒（Capsicum annuum）、柑橘（Citrus sp.）、黃瓜（Cucumis sativus）、大豆（Glycine max）、棉花（Gossypium sp.）、大麥（Hordeum vulgare）、蘋果（Malus domestica）、木薯（Manihot esculenta）、苜蓿（Medicago truncatula）、煙草（Nicotiana tabacum）、水稻（Oryza sativa）、豌豆（Pisum sativum）、楊樹（Populus sp.）、番茄（Solanum lycopersicum）、馬鈴薯（Solanum tuberosum）、高粱（Sorghum bicolor）、菠菜（Spinacia oleracea）、可可（Theobroma cacao）、小麥（Triticum sp.）、葡萄（Vitis vinifera）、玉米（Zea mays）  

無反應(yīng)性：目前尚無已知的與預(yù)測反應(yīng)性不符的例外情況  

樣品：

1 - 40 ug擬南芥Col-0全葉提取物。  

2 - 40 ug擬南芥突變體iar4（AT1G24180），擬南芥丙酮酸脫氫酶E1a樣亞基。  

3 - 40 ug擬南芥突變體iar4l-1（AT1G59900），擬南芥丙酮酸脫氫酶E1a亞基。  

4 - 40 ug擬南芥突變體iar4l-2（AT1G59900），擬南芥丙酮酸脫氫酶E1a亞基。  

5 - 40 ug擬南芥突變體SALK_004367C（AT5G50850），擬南芥丙酮酸脫氫酶E1組分亞基β-1。T-DNA插入位于AT5G50850的3'UTR區(qū)域，因此SALK_004367C可能不是mtPDH-E1b的敲除突變體。  

從擬南芥全蓮座葉中新鮮提取的總蛋白40 ug/孔。精確的緩沖液成分包括：50 mM Tris-HCl（pH 7.5）、150 mM NaCl、0.5 mM EDTA、10%（v/v）甘油、1%（v/v）Nonidet P-40（NP-40）、1%（w/v）脫氧膽酸鈉、0.1%（w/v）SDS、1 × Complete蛋白酶抑制劑混合物（Roche）、1 mM PMSF，并用5xSDS樣品緩沖液（300 mM Tris-HCL(pH 6.8)、10% SDS、0.1%溴酚藍、50%甘油、500 mM DTT）在95°C/5分鐘下變性。樣品在室溫下在10% SDS-PAGE上分離，并用iBlotu Dry Blotting System（Invitrogen）在室溫下轉(zhuǎn)移到硝酸纖維素膜（孔徑0.2 um）7分鐘。膜用5%牛奶在室溫下振蕩封閉3小時。然后將膜在2%牛奶中1: 500稀釋的一抗中振蕩過夜/4°C。棄去一抗溶液，膜簡短沖洗兩次，然后在室溫下振蕩用PBS-T洗滌5次，每次5分鐘。膜在2%牛奶中1: 5000稀釋的匹配二抗（抗兔IgG辣根過氧化物酶偶聯(lián)）中振蕩孵育1小時/室溫。膜按前述方法洗滌，并用AS16 ECL-N-10 Agrisera Bright化學(xué)發(fā)光檢測試劑顯影。曝光時間為1分鐘。

為了提高信噪比，一抗可以使用1: 1000或1: 2000稀釋度，在室溫下孵育1小時。

感謝瑞士日內(nèi)瓦大學(xué)植物學(xué)與植物生物學(xué)系的Mengping Li博士提供