牛活化蛋白C背景：

活化蛋白C(APC)是一種抗凝血絲氨酸蛋白酶，來源于雙鏈維生素K依賴性酶原蛋白C。α-凝血酶和凝血調(diào)節(jié)蛋白之間的復(fù)合物催化蛋白C重鏈中Arg-12（牛中的 Arg-14）的單次切割，以生成APC。幾種非生理相關(guān)的蛋白酶，如RVV-X激活劑、胰蛋白酶和PROTAC也能夠激活蛋白C。APC作為抗凝劑起作用，催化輔助因子、因子Va和VIIIa的蛋白水解失活，從而抑制凝血酶原和Xase因子復(fù)合物。因子 Va和VIIIa的失活依賴于Ca2+和磷脂。維生素K依賴性輔助因子蛋白S通過與APC形成1:1復(fù)合物(Kd=6x10-9M)適度增加這種失活率。有幾個因素會減弱 APC 的抗凝血活性。因子Xa通過競爭因子Va上的相似結(jié)合位點來保護(hù)因子Va免受APC的蛋白水解作用。凝血酶也被提議通過蛋白S的蛋白水解失活來調(diào)節(jié) APC。依賴性蛋白C抑制劑 (PAI-3)、循環(huán)肝素非依賴性蛋白C抑制劑、血小板衍生蛋白C抑制劑和PAI-1。據(jù)報道，APC與兩種類型的 PAI之間形成的復(fù)合物可解釋輸注APC或體內(nèi)APC生成時觀察到的纖維蛋白溶解增加。也可以使用氯甲基酮。活化的C蛋白是通過用凝血酶活化然后通過離子交換層析從純化的C蛋白制備的。APC以50%（體積/體積）甘油/水的形式提供，應(yīng)儲存在-20°C下。通過 SDS-PAGE 分析確定純度，并使用顯色底物測定法測量活性。根據(jù)APC抗性測定的要求，還測試了所有 APC 生產(chǎn)批次延長正常人血漿 aPTT 的能力。該測試的結(jié)果以aPTT (+/- APC)比率(10nM APC) 的形式提供給每批次。

艾美捷牛活化蛋白C#BCAPC-1080參數(shù)：

本地化：等離子

作用方式：抗凝，滅活因子Va和VIIIa

分子量：56200（人）（5）

52650（牛）（5）

56200（鼠）-根據(jù)人類價值推斷

消光系數(shù)：E1 cm，280 nm=14.5（人）（5）

=13.7（牛）（5）

=14.5（鼠）-根據(jù)人類價值推斷

等電點：4.4-4.8（人）（9）

4.2-4.5（牛）（9）

結(jié)構(gòu)：兩條鏈，Mr=35000和21000，二硫鍵連接，

NH2-末端gla結(jié)構(gòu)域兩個EGF結(jié)構(gòu)域

碳水化合物百分比：23%（人體）（5）

14%（牛）（5）

翻譯后修飾：11個gla殘基（牛），

一種β-羥基天冬氨酸

免費熒光基質(zhì)：HTI目錄號SN-54和SN-59

牛活化蛋白C文獻(xiàn)參考：

1 .  Kalafatis, M ., and Mann, K .G ., J . Biol . Chem ., 268, 27246 (1993) .

2 .  Kalafatis, M ., et al., J . Biol . Chem ., 269, 31869 (1994) .

3 .  Esmon, C .T ., Progress in Thromb . and Hemostas ., 10, 25 (1984) .

4 .  Esmon, C .T ., J . Biol . Chem ., 264, 4743 (1989) .

5 .  Kisiel, W ., et al., Methods Enzymol ., 80, 320 (1981) .

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8 .  Walker, F .J ., et al., J . Biol . Chem ., 256, 11128 (1981) .

9 .  Discipio, R .G ., et al., Biochemistry, 18, 899 (1979) .

10 . Dahlback, B ., and Hildebrand, B ., Proc . Natl . Acad . Sci . USA, 91, 1396 (1994) .

11 .  Svensson, P .J ., and Dahlback, B ., New Engl . J . Med ., 330, 517 (1994) .

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