AntiFix? 通用抗原修復(fù)緩沖液專為福爾馬林固定石蠟包埋 (FFPE) 組織的熱誘導(dǎo)表位修復(fù) (HIER) 而設(shè)計。該緩沖液使用專有試劑催化 FFPE 組織中甲醛交聯(lián)的逆轉(zhuǎn)以恢復(fù)抗原反應(yīng)性。

艾美捷抗原修復(fù)液#BTM-22030特征：

在中性 pH 條件下對多種靶標進行出色的抗原修復(fù)

簡化 HIER 優(yōu)化

通過使用酪胺擴增的熒光染色進行驗證

無毒不易燃

用福爾馬林（甲醛）固定組織可以保留組織形態(tài)，但甲醛引起的蛋白質(zhì)交聯(lián)可以修飾抗體結(jié)合位點或表位，因此免疫組織化學(xué)無法再檢測到它們。傳統(tǒng)上，通過使用蛋白酶處理或通過在低 pH 檸檬酸鹽緩沖液或高 pH Tris 緩沖液中加熱載玻片來恢復(fù)表位反應(yīng)性。不同表位的最佳去掩蔽方法各不相同，需要針對不同靶標使用多種緩沖液。

AntiFix? 通用抗原修復(fù)緩沖液經(jīng)過精心配制，可在中性 pH 條件下為各種靶標提供出色的熱暴露，從而減少對緩沖液優(yōu)化的需求。它已在使用 HRP 介導(dǎo)的酪胺信號放大的下一代熒光 CF? 染料對 FFPE 組織進行免疫熒光染色時得到驗證。

抗原檢索方案：

注：FFPE切片應(yīng)烘焙在帶正電的幻燈片上，以避免抗原回收過程中的組織損失

1.使用標準方案對FFPE切片進行除石蠟和再水合。

2.將幻燈片放入Coplin罐子或微波爐保險柜內(nèi)的幻燈片架中

容器注意：微波會導(dǎo)致玻璃罐破裂。集裝箱應(yīng)在使用前測試耐熱性。

3.準備1X AntiFix? 組合1的通用抗原回收緩沖液體積為10X的緩沖液，含9體積的dH2O并完全混合。

4.添加足夠的1X AntiFix? 緩沖液以完全覆蓋組織切片。通常，緩沖區(qū)被添加到磨砂幻燈片標簽的級別。典型的5載玻片的Coplin玻璃罐的體積為40 mL，24載玻片的體積為200 mL架子染色皿。

5.加熱緩沖區(qū)中的幻燈片。使用微波的兩種加熱方法（a）或下面描述多功能炊具（b）。微波是一種由來已久的技術(shù)HIER方法。一種帶數(shù)字溫度控制的廚房多功能鍋（例如，Instant Pot?）是微波爐的一種方便的替代品。其他加熱HIER常用的方法（如熱水浴或商業(yè)傾斜室）。

注：用于紙巾加工的廚房設(shè)備應(yīng)為專用設(shè)備用于研究實驗室，根據(jù)您的要求貼上生物危害標簽機構(gòu)或地方法規(guī)。

a） 使用微波爐：保持載玻片容器未覆蓋或松散覆蓋以避免壓力積聚。用微波爐加熱幻燈片，直到緩沖液沸騰了。持續(xù)監(jiān)控集裝箱，繼續(xù)煮10分鐘，根據(jù)需要每30-60秒停止一次微波爐以防止緩沖液沸騰。煮沸10分鐘后，讓容器冷卻至室溫。

b） 使用多功能鍋：放置隨鍋里的炊具。將滑動容器蓋松以避免壓力積聚。將滑動容器放在支架上，確保其固定安全地避免傾倒。把鍋里裝滿水，使水位達到一半向上滑動容器。關(guān)上鍋蓋，在98°C下加熱45分鐘沒有壓力。熱處理完成后，小心地移除將容器從鍋中的熱水中取出，冷卻至室溫溫度

6.用dH2沖洗載玻片3次O完全移除緩沖區(qū)。

7.根據(jù)您的方案進行染色。

抗原修復(fù)液相關(guān)研究：

Biotium公司是一家在熒光技術(shù)領(lǐng)域獨樹一幟的生物技術(shù)公司，公司位于美國加利福尼亞的BAY AREA------中外知名首要的生物科技中心。該公司一直致力于開發(fā)和生產(chǎn)用于生物醫(yī)學(xué)研究的熒光指示劑及其他特殊生化產(chǎn)品。其產(chǎn)品被廣泛應(yīng)用于細胞生 物學(xué)、蛋白質(zhì)組學(xué)、分子生物學(xué)、免疫學(xué)、微生物學(xué)、診斷學(xué)、生物化學(xué)、神經(jīng)科學(xué)、血液流動檢測及大規(guī)模藥物篩選等眾多領(lǐng)域。Biotium公司專利產(chǎn)品眾多，包括已經(jīng)被廣泛使用的實時PCR定量熒光染料EvaGreen、具有劃時代意義的凝膠核酸染料Gel Red和GelGreen，以及最新推出的Cheetah Taq熱啟動酶和CF系列蛋白質(zhì)標記染料等。 n目前，Biotium已將其許多專利技術(shù)授權(quán)給一些主要的國際生物技術(shù)公司，包括安捷倫、BD生物科學(xué)、Biolegend、BioRad、EMD Millipore、Illumina、PerkinElmer、Qiagen、Roche、Sartorius AG、Sigma-Aldrich、Thermo Fisher Scientific等。