BRD4 (BD1) TR-FRET檢測試劑盒，藥物發現和高通量小分子抑制劑篩選

BRD4 (BD1) TR-FRET檢測試劑盒，藥物發現和高通量小分子抑制劑篩選

組蛋白賴氨酸殘基的乙酰化在基因的調控過程中扮演著重要角色.被識別的賴氨酸殘基的乙酰化位點就是已知的布羅莫結構域，這些結構能調控乙酰化核酸，因此可以控制染色體的結構和基因的表達.BET家族蛋白含有一系列的布羅莫結構域和一個外末端結構域，包括BRD2，BRD3，BRD4和BRDT.BRD2和BRD4能綁定乙酰化組蛋白的尾巴，調節目的蛋白的表達.布羅莫結構域的小分子抑制劑能有效的治療人類疾病.

BRD4（BD1）TR-FRET檢測試劑盒旨在以均勻的384反應形式測量BRD4（BD 1）與其底物結合的抑制作用。這種基于FRET的檢測不需要耗時的洗滌步驟，使其特別適合高通量篩選應用。測定程序簡單明了；將含有鋱標記供體、染料標記受體、BRD4、底物和抑制劑的樣品溫育60分鐘。然后，使用熒光閱讀器測量熒光強度。

艾美捷BRD4 (BD1) TR-FRET檢測試劑盒（BPS-32613）組成：

Component Amount Storage

BRD4,BD1(49-170) 5μg -80℃

BET Bromodomain Ligand 50μ -80°℃

Non-acetylated Ligand 1 15μl -80℃

Tb donor 2x10μl -20℃

Dye-labeled acceptor 2x10μ -20℃

3x BRD TR-FRET Assay Buffer 1 4 ml -20℃

White,nonbinding,low volume,microtiter plate 1  Roomtemp.

材料或儀器需求但未提供：能夠測量時間分辨熒光共振能量轉移（TR-FRET）的熒光微孔板閱讀器。可調節的微量移液器和無菌吸頭。

應用：非常適合用于藥物發現和高通量篩選（HTS）應用中的小分子抑制劑篩選。

穩定性：按照指示存儲時，從收到之日起至少6個月。

參考文獻：Filippakopoulos, P., 等人，Cell 2012; 149:214。

檢測協議：所有樣品和對照應成對測試。

BRD4 (BD1) 檢測的協議：

將3倍BRD TR-FRET檢測緩沖液1與2倍蒸餾水混合稀釋（3倍稀釋），制備1倍BRD TR-FRET檢測緩沖液1。只制備檢測所需的足夠量；將剩余的儲備溶液分裝后在-20°C下儲存。

將Tb標記的供體和染料標記的受體在1倍BRD TR-FRET檢測緩沖液1中稀釋100倍。只制備檢測所需的足夠量；將剩余的儲備溶液分裝后在-20°C下儲存。

向標記為“測試抑制劑”、“陰性對照”和“陽性對照”的每個孔中分別加入5 ?l稀釋后的Tb標記的供體和5 ?l稀釋后的染料標記的受體。

向標記為“測試抑制劑”的每個孔中加入2 ?l抑制劑溶液。向標記為“陰性對照”和“陽性對照”的孔中加入2 ?l相同溶液但不含有抑制劑（抑制劑緩沖液）。

BRD4 (BD1) TR-FRET檢測試劑盒化驗結果示例：

JQ1（BPS Cat.#24701）對BRD4（BD1）的抑制作用，使用BPS Bioscience#32613的BRD4（BD 1）TR FRET檢測試劑盒進行測量。所示數據是特定批次的。

文獻參考：

Filippakopoulos, P., et al., Cell 2012; 149:214.

BRD4 (BD1) TR-FRET檢測試劑盒相關產品：

Product     Name  Catalog Size

BET Bromodomain Ligand  33000  0.5mL

Bromodomain    Non-acetylated Ligand 133005  0.5mL

BRD1(561-668),His-tag  31010  100μg

BRD2(65-187),His-tag  31022  100μg

BRD2(339-459),His-tag  31020  100μg

BRD2      (65-459),His-tag  31025  100μg

BRD3(29-145),His-tag  31030  100μg

BRD3(306-417),His-tag  31031  100μg

BRD4(49-460),His-tag  31045  100μg

BRD4(49-170),His-tag  31042  100μg

BRD4(342-460),His-tag  31043  100μg

BRD1 Inhibitor Screening Kit  32521  384 pxns

BRD2(BD2)Inhibitor   Screening Kit 32522  384 rxns

BRD3(BD1)Inhibitor   Screening Kit 32513  384  rxns

BRD3(BD2)Inhibitor   Screening Kit 32523  384  rxns

BRD4(BD1)Inhibitor   Screening Kit 32514  384 rxns.

BRD4(BD2)InhibitorScreening Kit 32524  384  rxns

(+)-JQ1 Inhibitor  27401  1   mg