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人孕烯醇酮ELISA Kit的操作注意事項

發(fā)布者:艾美捷科技    發(fā)布時間:2024-05-29     
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孕烯醇酮(3β-羥基孕甾-5-烯20-酮)是第1種在甾體生成過程中從膽固醇中衍生出來的類固醇,也是所有腎上腺和性腺類固醇的常見前體。通過P-450SCC酶切割膽固醇的C-20側鏈,在線粒體中產生膽固醇。生產后,孕烯醇酮可通過兩種甾體生成途徑利用。孕烯醇酮可以通過17α-羥化酶的酶作用轉化為17-OH孕烯醇酮,也可以通過3β-羥基類固醇脫氫酶的酶作用轉變?yōu)樵型T邢┐纪缴咭韵忍煨阅I上腺增生(CAH)的形式出現(xiàn),這是由于3β-羥基甾體氫化酶缺乏或17α-羥化酶缺乏所致。據(jù)報道,特發(fā)性多毛癥婦女的水平也較高。關于性別和年齡差異的孕烯醇酮水平研究表明,女性和男性的最高水平分別出現(xiàn)在17歲和16歲左右,而女性和男性分別出現(xiàn)在37歲和38歲左右。一般來說,與男性相比,女性的價值略高。孕烯醇酮生理學的許多領域仍有待研究。目前的研究表明,血清中孕烯醇酮的測定可能有助于研究其代謝產物硫酸孕烯醇酮,據(jù)報道,硫酸孕烯醇在哺乳動物大腦和中樞神經(jīng)系統(tǒng)中具有多種作用。

 

艾美捷Biogradetech-人孕烯醇酮ELISA Kit(BGT-KET-150)人孕烯醇酮 ELISA Kit預期用途:

用于人血清中孕烯醇酮的直接定量測定,采用酶免疫分析法。僅限于體外診斷使用。

 

人孕烯醇酮ELISA Kit檢測原理:

以下酶免疫分析檢測的原理遵循典型的競爭性結合場景。未標記的抗原(存在于標準品、對照品和患者樣本中)與酶標記的抗原(結合物)在微孔板上有限數(shù)量的抗體結合位點之間發(fā)生競爭。洗滌和倒液步驟去除未結合的物質。洗滌步驟后,加入酶底物。酶促反應通過加入終止液來終止。在微孔板閱讀器上測量吸光度。形成的色澤強度與樣本中孕烯醇酮的濃度成反比。使用一組標準品繪制標準曲線,從而可以直接讀取患者樣本和對照品中孕烯醇酮的濃度。

 

操作注意事項和警告:

1. 用戶應徹底理解本協(xié)議,以成功使用此試劑盒。只有通過嚴格遵守和仔細遵循所提供的說明,才能獲得可靠的性能。

2. 建議所有客戶準備自己的控制材料或血清池,應在每次運行中包含高濃度和低濃度水平,以評估結果的可靠性。

3. 當指定使用水進行稀釋或重懸時,請使用去離子水或蒸餾水。

4. 為了減少接觸潛在有害物質的風險,處理試劑盒試劑和人類樣本時應佩戴手套。

5. 所有試劑盒試劑和樣本在使用前應放置至室溫,并輕輕但徹底地混合。避免試劑和樣本反復凍融。

6. 每次運行時都必須建立標準曲線。

7. 試劑盒中提供的對照品應包含在每次運行中,并且必須落在既定的置信限內。

8. 如果對照品的檢測值沒有反映出既定范圍,可能表明操作程序不當、移液不精確、洗滌不完全或試劑儲存不當。

9. 讀取微孔板時,孔中的氣泡會影響光密度(OD)。在執(zhí)行讀取步驟之前,仔細去除任何氣泡。

10. 底物溶液(TMB)對光敏感,如果儲存得當,應保持無色。出現(xiàn)藍色表示不穩(wěn)定或受污染,此時不應使用。

11. 分裝底物和終止液時,不要使用這些液體會接觸到任何金屬部件的移液管。

12. 為了防止試劑污染,分裝每個試劑、樣本、標準品和對照品時,使用新的一次性移液管尖。

13. 不要在測試中混合不同批號的試劑盒組分,并且不要使用任何超出標簽上打印的有效期的組分。

14. 試劑盒試劑必須被視為危險廢物,并根據(jù)國家規(guī)定進行處置。


人孕烯醇酮ELISA Kit

僅對曲線進行采樣。不要使用來計算結果。

 

人孕烯醇酮ELISA Kit文獻參考:

1. Abraham GE, et al. Radioimmunoassay of Plasma Pregnenolone, 17-hydroxy-pregnenolone and Dehydroepiandrosterone Under Various Physiological Conditions. J Clin Endocrinol Metab. 1973; 37(1):140–4.

2. Hill M, et al. Age Relationships and Sex Differences in Serum Levels of Pregnenolone and 17-hydroxypregnenolone in Healthy Subjects; Clin Chem Lab Med. 1999; 37(4):439–47.

3. Robel P, et al. Biosynthesis and Assay of Neurosteroids in Rats and Mice. J Steroid Biochem Mol Biol.1995; 53:355–60.

4. Weusten JJ, et al. Early Time Sequence in Pregnenolone Metabolism to Testosterone in Homogenates ofHuman and Rat Testis. Endocrinlogy. 1987; 120(5):1909–13.

5. Akwa Y, et al. Neurosteroids: Biosynthesis, Metabolism and Function of Pregnenolone andDehydroepiandrosterone in the brain. J Steroid Biochem Mol Biol. 1991; 40(1-3):71–81.

6. McKenna TJ, Brown RD. Pregnenolone in Man: Plasma Levels in States of Normal and AbnormalSteroidogenesis. J Clin Endocrinol Metab. 1974; 38(3):480–5.

7. McKenna TJ, et al. Pregnenolone, 17-OH-Pregnenolone, and Testosterone in Plasma of Patients withCongenital Adrenal Hyperplasia. J Clin Endocrinol Metab. 1976; 42(5):918–25.

8. McKenna TJ, et al. Plasma Pregnenolone in Patients with Adrenal Tumors, ACTH Excess, or IdiopathicHirsutism. J Clin Endocrinol Metab. 1977; 44(2):231–6.

9. Wilson JD, Foster, DW, eds. Williams Textbook of Endocrinology 8th Edition. London: W.B. SaundersCompany; 1992:495-7.

10. Check JH, et al. Falsely Elevated Steroidal Assay Levels Related to Heterophile Antibodies Against VariousAnimal Species. Gynecol Obstet Invest. 1995; 40(2):139–40.


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