Biogradetech PtdIns 瓊脂糖珠的作用及在瓊脂糖珠純化中的應用

脂質包被珠被設計用于蛋白質下拉實驗。用于檢測純化蛋白質、細胞裂解物中蛋白質的脂質結合，或放射性標記的體外翻譯產物的結合。

PtdIns珠由瓊脂糖組成，每毫升珠含有10納摩爾的結合PtdIns，足以進行幾次蛋白質結合實驗。每1mL珠粒包括少量對照珠粒。更多數量的控制珠也可供購買。

作為Biogradetech獨家代理，艾美捷科技強烈推薦Biogradetech熱銷產品 PtdIns 瓊脂糖珠。產品僅用于科研，不可用于臨床診斷。

磷脂酰肌醇(PtdIns)是細胞膜中的關鍵組成部分，對細胞信號傳導至關重要。本文旨在探討PtdIns在細胞信號傳導中的作用，并分析其在利用瓊脂糖珠進行生物分子純化過程中的應用。

PtdIns在細胞信號傳導中的作用

PtdIns通過其磷酸化形式，如PtdIns(4,5)P2，參與細胞內鈣離子的調控、細胞骨架的重組以及細胞增殖等多種生理過程。PtdIns的磷酸化狀態受到多種激酶和磷酸酶的調控，這些酶的活性變化直接影響細胞的生理反應。

瓊脂糖珠在生物分子純化中的應用

瓊脂糖珠是一種多孔的凝膠顆粒，常用于DNA、RNA和蛋白質的提取和純化。它們具有高吸附容量和良好的生物相容性，是分子生物學實驗中不可或缺的工具。

PtdIns與瓊脂糖珠的結合應用

在某些特定的實驗中，PtdIns可以與瓊脂糖珠結合，用于特定的生物分子的富集和純化。例如，在研究PtdIns相關信號通路時，可以通過瓊脂糖珠富集特定的PtdIns結合蛋白，進而分析其功能和作用機制。

PtdIns在細胞信號傳導中扮演著重要角色，而瓊脂糖珠作為一種有效的純化工具，可以幫助科學家更好地理解和研究PtdIns的功能。未來，隨著技術的發展，PtdIns與瓊脂糖珠的結合應用將為細胞生物學和分子生物學研究提供更多的可能性。

脂質珠 - 蛋白質協議：

我們提供以下協議作為指南，并強烈鼓勵研究人員查閱科學文獻并進行優化實驗，以確立對其感興趣的蛋白質z有利的條件。

充分混合珠（不要使用渦旋）。將50 – 100 微升的50%珠懸液轉移到0.5 – 1.5 毫升的管中。

以1000 x g或更低的速度離心珠。小心移除上清液，避免丟失珠。

用10倍過量的洗滌緩沖液洗滌珠。輕輕混合，孵育1-2分鐘。重復洗滌步驟兩次。

小心移除洗滌上清液，并將珠在含有您的蛋白質的結合緩沖液中重新懸浮。 a. 對于純化的蛋白質，使用1-10 微克的蛋白質，用足夠的結合緩沖液稀釋形成50%脂質珠懸液。 b. 對于細胞裂解物、提取物、亞細胞組分：使用大約1 毫克的總蛋白質對1 毫升結合緩沖液。將整個1毫升的制備樣品加入到您洗滌過的珠中。

孵育蛋白質-珠溶液1-3小時。孵育可以在室溫或4°C下進行，取決于您蛋白質的穩定性。需要連續運動以保持珠懸浮。

離心珠并小心移除上清液。如果需要，上清液可以用來監測未結合的蛋白質。

用10倍過量的洗滌緩沖液洗滌珠。輕輕混合，孵育1-2分鐘。重復洗滌步驟五次。如果您選擇在結合緩沖液中使用牛血清白蛋白（BSA），請確保在進行下一步之前將其徹底洗出。

在最后一次洗滌后，通過向珠中加入等體積的2X Laemmli樣品緩沖液（或類似物）并加熱至70°C 10分鐘來洗脫結合的蛋白質。

加熱后，離心珠并移除上清液。將上清液儲存在4°C下，直到分析。丟棄珠。

蛋白質可以通過SDS-PAGE分離，并通過凝膠的Coomassie藍染色、蛋白質轉移和免疫印跡來檢測感興趣的蛋白質，或進行自顯影。

文獻參考：

1. Gálvez-Santisteban, M., Rodriguez-Fraticelli, A. and Martin-Belmonte, F. (2014). Phosphoinositides Coated Beads Binding Assay. Bio-protocol 4(3): e1039. 

Biogradetech成立于2015年，總部位于美國加利福尼亞州，早期以產品技術研發服務起家，逐步發展了廣泛的產品線，并將其商業化銷售，包括蛋白質、抗體、酶、培養基、試劑盒和儀器。適用于細胞生物學、蛋白質組學、分子生物學、免疫學、微生物學、診斷學、生物化學、神經科學、血液分析和高通量藥物篩選等領域。