針對(duì)組蛋白H3在賴氨酸4位點(diǎn)乙酰化（H3K4ac）的多克隆抗體，使用KLH偶聯(lián)的合成肽作為免疫原。

作為BPS Bioscience在中國(guó)的區(qū)域總代理，艾美捷科技強(qiáng)烈推薦BPS Bioscience熱銷產(chǎn)品Anti-H3K4ac多克隆抗體。產(chǎn)品僅用于科研，不可用于臨床診斷。

Anti-H3K4ac多克隆抗體：

克隆性：多克隆  

宿主物種/表達(dá)系統(tǒng)：兔  

純化方法：親和純化  

形式：水溶液緩沖液  

配方：含有0.05%疊氮化物和0.05% ProClin 300的PBS溶液  

濃度：50 ?g/34 ?l  

免疫原：合成肽  

儲(chǔ)存/穩(wěn)定性  

在–80°C下可保存長(zhǎng)達(dá)2年。首次解凍后離心以最大化產(chǎn)品回收。分裝以避免反復(fù)凍融循環(huán)。分裝可在–20°C下保存至少一個(gè)月。

染色質(zhì)免疫沉淀（ChIP）結(jié)果  

使用野生型（WT）和H3K4R突變型S. pombe細(xì)胞，針對(duì)H3K4ac的抗體（產(chǎn)品編號(hào)25251）以及優(yōu)化的qPCR引物對(duì)進(jìn)行染色質(zhì)免疫沉淀（ChIP）實(shí)驗(yàn)。實(shí)驗(yàn)中使用10 ?g DNA對(duì)應(yīng)的剪切染色質(zhì)和0.5 ?g抗體。通過qPCR分析，使用特異性引物檢測(cè)兩個(gè)不同的近著絲粒重復(fù)區(qū)域和常染色質(zhì)adh1基因。圖1顯示了回收率，以輸入DNA的百分比表示（免疫沉淀DNA與輸入DNA的相對(duì)量）。

抗體滴度測(cè)定  

通過ELISA實(shí)驗(yàn)測(cè)定抗體滴度，使用針對(duì)H3K4ac的抗體（產(chǎn)品編號(hào)25251）的系列稀釋液，并在抗原包被的孔中進(jìn)行檢測(cè)。實(shí)驗(yàn)中使用的抗原是含有目標(biāo)組蛋白修飾的肽段。通過繪制抗體稀釋度與吸光度的關(guān)系圖（圖2），估算純化抗體的滴度為1:27,800。

交叉反應(yīng)性測(cè)試  

通過點(diǎn)樣（Dot Blot）分析測(cè)試針對(duì)H3K4ac的抗體（產(chǎn)品編號(hào)25251）與其他組蛋白H3修飾以及未修飾H3K4序列的交叉反應(yīng)性。將含有相應(yīng)修飾的肽段（100至0.2 pmol）點(diǎn)樣于膜上，抗體稀釋度為1:10,000。圖3顯示該抗體對(duì)目標(biāo)修飾具有高度特異性。

Western Blot分析  

使用針對(duì)H3K4ac的抗體（產(chǎn)品編號(hào)25251）對(duì)HeLa細(xì)胞的組蛋白提取物（15 ?g）進(jìn)行Western Blot分析，抗體稀釋度為1:500，使用含有5% BSA的TBS-Tween緩沖液。左側(cè)顯示分子量標(biāo)記（單位：kDa），右側(cè)標(biāo)記了目標(biāo)蛋白的位置。

免疫熒光實(shí)驗(yàn)  

野生型和H3K4R突變型S. pombe細(xì)胞用針對(duì)H3K4ac的抗體（產(chǎn)品編號(hào)25251）（紅色）和Hoechst染色（藍(lán)色，左側(cè)）進(jìn)行染色，或單獨(dú)使用H3K4ac抗體（右側(cè)）。抗體稀釋度為1:300。

應(yīng)用  

- 染色質(zhì)免疫沉淀（ChIP）：0.5 ?g/ChIP  

- 酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)（ELISA）：1:500  

- 點(diǎn)樣（Dot Blot，DB）：1:10,000  

- Western Blot（WB）：1:500  

- 免疫熒光（IF）：1:300  

運(yùn)輸溫度：–20°C或–80°C  

物種反應(yīng)性：人、酵母  

注意事項(xiàng)：每IP的最佳抗體用量應(yīng)由最終用戶確定。建議測(cè)試1–5 ?g/IP。  

警告：避免反復(fù)凍融循環(huán)。  

科學(xué)分類：抗體  

監(jiān)管狀態(tài)：僅限研究使用

BPS Bioscience是一家通過ISO 9001:2015認(rèn)證的生命科學(xué)領(lǐng)域的供應(yīng)商，公司一直致力于開發(fā)藥物研發(fā)領(lǐng)域的重組蛋白酶、蛋白酶活性/抑制劑篩選試劑盒和慢病毒等工具。公司由Henry Zhu博士于2005年創(chuàng)立，從創(chuàng)立至今一直致力于提供藥物研發(fā)領(lǐng)域的創(chuàng)新解決方案，以推動(dòng)新的藥物發(fā)現(xiàn)a。公司主要關(guān)注的領(lǐng)域包括免疫療法、表觀遺傳學(xué)、新型冠狀病毒、CRISPR、細(xì)胞信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)等，主要提供激酶、磷酸二酯酶、磷酸酶、組蛋白去甲基化酶、組蛋白甲基化轉(zhuǎn)移酶、HDACs、聚ADP核糖聚合酶等。 

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