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螢火蟲(chóng)熒光素酶已被用作研究廣泛生物反應(yīng)的敏感報(bào)告物。它首先從北美的Photinus pyralis中克隆出來(lái),在ATP和鎂的存在下催化D-熒光素的氧化,發(fā)出黃光。該反應(yīng)具有高量子產(chǎn)率,螢光素酶和熒光素都具有低毒性。這些特性使螢火蟲(chóng)熒光素酶成為一種常用的工具。另一方面,腎熒光素酶是ATP非依賴性的,在有氧的情況下將腔腸素轉(zhuǎn)化為腔腸酰胺,發(fā)出藍(lán)光。與熒光蛋白相比,這兩種螢光素酶的半衰期相對(duì)較低,可以進(jìn)行動(dòng)態(tài)研究。螢火蟲(chóng)熒光素酶報(bào)告基因?qū)δ撤N刺激的反應(yīng)的準(zhǔn)確性可以通過(guò)在同一樣本中歸一化為對(duì)照?qǐng)?bào)告基因(如Renilla熒光素酶報(bào)道基因)來(lái)提高。
兩步螢光素酶(螢火蟲(chóng)和雷尼拉)檢測(cè)系統(tǒng)旨在高通量、快速定量單個(gè)哺乳動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)樣本中的螢火蟲(chóng)和雷尼拉螢光素酶。它配備了足夠的試劑,可以在96孔板中進(jìn)行100次100μl的測(cè)定。
該分析系統(tǒng)具有幾個(gè)相關(guān)特征:
靈敏-高度靈敏地檢測(cè)螢火蟲(chóng)和雷尼拉熒光素酶活性。
穩(wěn)定-螢光素酶信號(hào)輸出穩(wěn)定一個(gè)多小時(shí),提供了孵育時(shí)間的靈活性。
高通量-其簡(jiǎn)單的同質(zhì)協(xié)議最大限度地減少了處理步驟,并支持高通量篩選應(yīng)用。
兼容性-適用于各種含有高達(dá)10%血清和酚紅的常見(jiàn)介質(zhì)。

圖1:兩步螢光素酶(螢火蟲(chóng)和雷尼拉)檢測(cè)系統(tǒng)方案概述。
螢火蟲(chóng)熒光素酶試劑直接加入細(xì)胞培養(yǎng)基中。該試劑裂解細(xì)胞,并含有一種底物,使螢火蟲(chóng)熒光素酶產(chǎn)生發(fā)光信號(hào)。接下來(lái),將Renilla螢光素酶試劑加入到同一孔中。該試劑淬滅螢火蟲(chóng)熒光素酶的發(fā)光,并為Renilla熒光素酶產(chǎn)生Renilla螢光素酶發(fā)光信號(hào)提供底物。兩種反應(yīng)產(chǎn)生的信號(hào)都可以在光度計(jì)上方便地測(cè)量。

圖2:兩步螢光素酶(螢火蟲(chóng)和雷尼拉)檢測(cè)系統(tǒng)中涉及的化學(xué)反應(yīng)。
A.螢火蟲(chóng)熒光素酶試劑緩沖液(組分A)和螢火蟲(chóng)熒光素酶試劑底物(組分B)產(chǎn)生信號(hào)所涉及的化學(xué)反應(yīng)。B.由蓮子熒光素酶試劑緩沖液(組分C)和蓮子熒光素酶試劑底物(組分D)產(chǎn)生信號(hào)所涉及的化學(xué)反應(yīng)。
作為BPS Bioscience在中國(guó)的區(qū)域總代理,艾美捷科技強(qiáng)烈推薦BPS Bioscience熱銷產(chǎn)品兩步熒光素酶(螢火蟲(chóng)和海腎)測(cè)定系統(tǒng) 。產(chǎn)品僅用于科研,不可用于臨床診斷。
| 產(chǎn)品名稱 | 貨號(hào) | 詳情 |
兩步熒光素酶(螢火蟲(chóng)和海腎)測(cè)定系統(tǒng) | BPS-60683 | 查看 |
兩步熒光素酶(螢火蟲(chóng)和海腎)測(cè)定系統(tǒng):
同義詞:熒光素,螢火蟲(chóng)熒光素酶,熒光素酶緩沖液,海腎熒光素酶,熒光素酶檢測(cè)緩沖液
未提供所需材料:
與讀數(shù)儀器兼容的多孔組織培養(yǎng)板。
哺乳動(dòng)物細(xì)胞在實(shí)驗(yàn)啟動(dòng)子下表達(dá)螢火蟲(chóng)熒光素酶,在控制啟動(dòng)子下表達(dá)海腎熒光素酶。
適當(dāng)?shù)募?xì)胞培養(yǎng)基。
實(shí)驗(yàn)室平臺(tái)振蕩器。
發(fā)光光度計(jì)
儲(chǔ)存/穩(wěn)定性:當(dāng)材料按照指示儲(chǔ)存時(shí),該檢測(cè)試劑盒在收到之日起6個(gè)月內(nèi)性能最佳。
應(yīng)用:監(jiān)測(cè)培養(yǎng)的哺乳動(dòng)物細(xì)胞中螢火蟲(chóng)(Photinus pyralis)和海腎熒光素酶的活性。基于發(fā)光的高通量藥物篩選
運(yùn)輸溫度: -20°C
兩步熒光素酶(螢火蟲(chóng)和海腎)測(cè)定系統(tǒng) 產(chǎn)品數(shù)據(jù)庫(kù):

BPS Bioscience是一家通過(guò)ISO 9001:2015認(rèn)證的生命科學(xué)領(lǐng)域的供應(yīng)商,公司一直致力于開(kāi)發(fā)藥物研發(fā)領(lǐng)域的重組蛋白酶、蛋白酶活性/抑制劑篩選試劑盒和慢病毒等工具。公司由Henry Zhu博士于2005年創(chuàng)立,從創(chuàng)立至今一直致力于提供藥物研發(fā)領(lǐng)域的創(chuàng)新解決方案,以推動(dòng)新的藥物發(fā)現(xiàn)。公司主要關(guān)注的領(lǐng)域包括免疫療法、表觀遺傳學(xué)、新型冠狀病毒、CRISPR、細(xì)胞信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)等,主要提供激酶、磷酸二酯酶、磷酸酶、組蛋白去甲基化酶、組蛋白甲基化轉(zhuǎn)移酶、HDACs、聚ADP核糖聚合酶等。
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