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標(biāo)準(zhǔn)桿數(shù)穩(wěn)態(tài)由標(biāo)準(zhǔn)桿數(shù)聚合酶(PARPs)和PARG(聚(ADP-核糖)糖水解酶)家族調(diào)節(jié),以應(yīng)對(duì)細(xì)胞應(yīng)激條件。ADP核糖基化是將ADP核糖添加到蛋白質(zhì)中,是主要參與DNA損傷反應(yīng)(DDR)途徑的蛋白質(zhì)的可逆翻譯后修飾。聚ADP核糖基化(稱為PARylation)是ADP核糖直鏈或支鏈的加成。PARP和PARG活性與炎癥、缺血、中風(fēng)和癌癥的細(xì)胞反應(yīng)有關(guān)。PARP抑制劑已成功用于癌癥治療,當(dāng)同源重組修復(fù)(HRR)已經(jīng)存在缺陷時(shí),會(huì)導(dǎo)致合成致死。PARG在癌癥中過表達(dá),并與腫瘤生長(zhǎng)和存活相關(guān)。PARG活性的降低可以增強(qiáng)當(dāng)前癌癥療法(如化療和放療)的效果,使選擇性抑制劑抑制PARG成為癌癥和免疫療法中一種有前途的方法。對(duì)PARP和PARG的進(jìn)一步研究將闡明PAR酸化蛋白的水平如何導(dǎo)致疾病,并可以調(diào)節(jié)以提供治療益處。
LysA?通用PARylation檢測(cè)試劑盒是一種基于夾心ELISA的試劑盒,旨在測(cè)量和量化細(xì)胞提取物中存在的總聚ADP核糖基化量。該試劑盒采用方便的96孔格式,包含所需的所有試劑,包括標(biāo)準(zhǔn)桿數(shù)標(biāo)準(zhǔn),該標(biāo)準(zhǔn)允許建立定量測(cè)量的標(biāo)準(zhǔn)曲線。它含有足夠的抗體、阻斷緩沖液和檢測(cè)試劑,以96孔板的形式測(cè)量細(xì)胞提取物中的PARylation水平。它還包括細(xì)胞裂解物作為測(cè)定性能的對(duì)照。
注:該測(cè)定僅適用于聚ADP核糖基化檢測(cè)。該測(cè)定在100 pM至20 nM的PARylation范圍內(nèi)呈線性。

圖1:LysA?通用PARylation檢測(cè)工作流程圖。
使用抗PAR抗體來涂覆96細(xì)胞板。來自細(xì)胞的裂解物被添加到包被的孔中,因此存在于細(xì)胞裂解物中的標(biāo)準(zhǔn)桿數(shù)(PARylated proteins)被抗體捕獲。隨后用抗PAR一級(jí)抗體和二級(jí)HRP-標(biāo)記抗體孵育。添加化學(xué)發(fā)光的HRP底物提供了發(fā)光信號(hào),其與細(xì)胞提取物中存在的標(biāo)準(zhǔn)桿數(shù)的量直接相關(guān)
作為BPS Bioscience在中國的區(qū)域總代理,艾美捷科技強(qiáng)烈推薦BPS Bioscience熱銷產(chǎn)品LysA 通用PAR化檢測(cè)試劑盒 。產(chǎn)品僅用于科研,不可用于臨床診斷。
| 產(chǎn)品名稱 | 貨號(hào) | 詳情 |
LysA 通用PAR化檢測(cè)試劑盒 | BPS-82123 | 查看 |
LysA 通用PAR化檢測(cè)試劑盒:
同義詞:PARP1, PARP2, PARG
試劑盒格式:化學(xué)發(fā)光
物種:人類
未提供但需要的材料:
改良的RIPA裂解緩沖液(中等強(qiáng)度)(BPS Bioscience #82126)
LysA?蛋白酶抑制劑雞尾酒試劑盒(BPS Bioscience #82199)
ADP-核糖基化循環(huán)抑制劑混合物(BPS Bioscience #82130)
儲(chǔ)存/穩(wěn)定性
如果按照指示儲(chǔ)存材料,這個(gè)試劑盒從收到日期起在6個(gè)月內(nèi)將表現(xiàn)最佳。
應(yīng)用:
在培養(yǎng)的細(xì)胞中定量總PAR水平。
在培養(yǎng)的細(xì)胞中篩選或確定PARP或PARG抑制劑的IC50。
在細(xì)胞模型中驗(yàn)證PARP或PARG抑制劑。
運(yùn)輸溫度:-80°C
LysA 通用PAR化檢測(cè)試劑盒產(chǎn)品數(shù)據(jù)庫:

文獻(xiàn)參考:
Marques M., et al., 2019 Oncogene 38 (12): 2177-2191.
James D. I., et al., 2016 ACS Chem Biol 11 (11): 3179-3190.
Drown B. S., et al., 2018 Cell Chem Bio 25 (12): 1562-1570.
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