EcoRI（“I”是“1”的意思）是一種限制性核酸內(nèi)切酶，來自某些特定品系的大腸桿菌（E. coli，也是其名稱由來），是此種細(xì)菌體內(nèi)參與限制修飾系統(tǒng)的酶。在分子生物學(xué)或其他分子層次的生物學(xué)研究上，EcoRI限制酶能專一識別GAATTC序列，并在G和A之間將這段序列切開切割后的小片段端點為5'端突出的黏狀末端（sticky end）。

經(jīng)過基因工程改造的EcoRI，ADCF，能夠在5~15分鐘內(nèi)消化DNA。它可用于鑒定質(zhì)粒DNA、PCR產(chǎn)物和基因組。EcoRI，ADCF具有以下特點：在5到15分鐘內(nèi)快速消化，極好的酶活性冗余，易于處理底物過量或具有挑戰(zhàn)性的模板消化。這種酶不含動物來源的成分

艾美捷內(nèi)切酶EcoRI, 無動物源性：

Cat #: C-BSM2504S

Size: 5000 U

Storage: -20°C

內(nèi)切酶EcoRI, 無動物源性使用方法：

1.快速DNA消化方案

① 按照指示的順序在冰上混合以下反應(yīng)組分：

a.DNA底物不應(yīng)含有苯酚、氯仿、乙醇、EDTA、洗滌劑或高濃度鹽，否則會影響EcoRI、ADCF的酶活性；甲基化DNA會抑制某些限制性內(nèi)切酶的消化

② 輕輕混合（不要渦流）并向下旋轉(zhuǎn)；

③ 在37°C下培養(yǎng)15分鐘-60分鐘，一般建議5～10 U酶/ug DNA，10～20 U酶/ugDNA，溫浴1小時，如果需要過夜酶消化，請將酶量調(diào)整為10；④通過在80°C下加熱20分鐘使酶失活，或通過基于柱的苯酚/氯仿純化終止反應(yīng)。

⑤ 添加到反應(yīng)中的酶的體積不應(yīng)超過總體積的10%，以避免過量的甘油，這可能導(dǎo)致星形活性。

⑥ 限制性內(nèi)切酶儲存緩沖液中的添加劑（如甘油和鹽）和底物中的污染物（如鹽、EDTA或乙醇等）是相似的。反應(yīng)體積越小，對酶消化反應(yīng)的抑制作用越強。

⑦ 對于小規(guī)模反應(yīng)，推薦的反應(yīng)組分如下。

DNA     0.1 μg    0.5 μg

EcoRI, ADCF    1 U       5 U

10× EcoRI Buffer 1 μl 2.5 μl

Total      10 μlb     25 μl

b.為了避免蒸發(fā)，10μl反應(yīng)緩沖液的孵育時間不應(yīng)超過1小時

Biogradetech全球生命科學(xué)和醫(yī)藥研發(fā)行業(yè)關(guān)鍵原料與試劑的領(lǐng)先供應(yīng)商：Biogradetech成立于2015年，總部位于美國加利福尼亞州，早期以產(chǎn)品技術(shù)研發(fā)服務(wù)起家，逐步發(fā)展了廣泛的產(chǎn)品線，并將其商業(yè)化銷售，包括蛋白質(zhì)、抗體、酶、培養(yǎng)基、試劑盒和儀器。適用于細(xì)胞生物學(xué)、蛋白質(zhì)組學(xué)、分子生物學(xué)、免疫學(xué)、微生物學(xué)、診斷學(xué)、生物化學(xué)、神經(jīng)科學(xué)、血液分析和高通量藥物篩選等領(lǐng)域。