快速內(nèi)切酶DpnII專為快速酶切而設計.5-15分鐘即可完全酶切,讓DNA酶切變得簡單。組分：FlyCut? DpnII，10× CutOne? Buffer，10× CutOne? Color Buffer，保存建議-20℃

艾美捷快速內(nèi)切酶DpnII：

Cat #: C-BSM533

Size: 50 rxns

Storage: -20°C

快速內(nèi)切酶DpnII使用方法：

1.快速DNA消化方案

①將以下反應組分按所示順序在冰上混合：

a. 對于純化的PCR產(chǎn)物。如果PCR產(chǎn)物未純化，則應將10倍CutOne“”緩沖液的量減少到2μl，以減少未純化PCR產(chǎn)物中的剩余金屬離子。如果用于克隆，我們建議在消化前純化PCR產(chǎn)物，因為一些DNA聚合酶的核酸外切酶活性可能會改變切割DNA的末端。

②輕輕混合并向下旋轉；

③ 在37°C下培養(yǎng)15分鐘（質粒DNA）或15～30分鐘（PCR產(chǎn)物）或30～60分鐘（基因組

DNA）；

④ 可選：80°C加熱20分鐘滅活酶；

⑤如果在反應中使用CutOne“”顏色緩沖液，則將反應混合物的等分試樣直接加載在凝膠上。

2.DNA的雙重和多重消化

① 使用每種酶1μl，并適當擴大反應條件；

② 反應混合物中酶的總體積不應超過總反應體積的1/10；③如果酶需要不同的反應溫度，從需要較低溫度的酶開始，然后加入第二種酶并在較高溫度下孵育。

3.擴大質粒DNA消化反應

在推薦的反應條件下，該酶可在5~15分鐘內(nèi)消化單位底物。酶的極適反應溫度為37°C。

當?shù)孜顳NA被DAM甲基化酶甲基化時，這種限制性酶的切割可能被阻斷或受損。

當?shù)孜顳NA被EcoBI甲基化酶甲基化時，這種限制性酶的切割可能被阻斷或受損。

該酶可以在80°C下孵育20分鐘進行熱滅活。孵育3小時不會顯示星形活性，但孵育時間較長可能會導致星形活性。

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