細(xì)胞周期直接負(fù)責(zé)細(xì)胞增殖，是各種療法的主要靶標(biāo)。因此，細(xì)胞周期分析是研究細(xì)胞如何增殖以及其調(diào)控下的治療機(jī)制的重要工具。經(jīng)典的細(xì)胞周期檢測(cè)需要先將細(xì)胞用乙醇固定，用RNase處理，最后用DAPI或碘化丙啶染色并進(jìn)行分析。根據(jù)使用的細(xì)胞系和實(shí)驗(yàn)者的需求，這些額外的步驟可能需要從幾個(gè)小時(shí)到整整一天的時(shí)間。然而，細(xì)胞周期檢測(cè)試劑盒（紅色）（產(chǎn)品編號(hào)C3851）使用一種特殊的表面活性劑來(lái)滲透細(xì)胞膜，僅足以讓一種DNA特異性熒光染料（7-AAD，激發(fā)波長(zhǎng)Z大值=549nm，發(fā)射波長(zhǎng)Z大值=648nm）進(jìn)入，而不會(huì)讓DNA離開細(xì)胞。通過(guò)這種方式，可以在不進(jìn)行預(yù)固定的情況下進(jìn)行細(xì)胞周期分析。只需收集你感興趣的細(xì)胞，與試劑盒中包含的緩沖液/染料一起孵化Z少15分鐘，然后進(jìn)行測(cè)量。

細(xì)胞周期測(cè)定試劑盒（紅色）#C3851組成：

7-AAD for 100 assays

Cell staining buffer for 100 assays

艾美捷東京化成（TCI）細(xì)胞周期測(cè)定試劑盒（紅色）應(yīng)用：

觀察HeLa細(xì)胞的細(xì)胞周期

將試劑盒中包含的7-AAD溶解在100微升的DMSO中（未包含）。

將步驟1中的1微升7-AAD溶液與包含的200微升細(xì)胞染色緩沖液混合。

用胰蛋白酶處理HeLa細(xì)胞，并用PBS洗滌一次。

在試管中收集5.0x10^4個(gè)細(xì)胞。離心后吸取上清液，加入步驟2中的溶液，并孵化15分鐘。

在流式細(xì)胞儀上進(jìn)行細(xì)胞周期分析（?）。

(? 激光波長(zhǎng)=488納米，濾光片波長(zhǎng)/帶寬=700納米/54納米)

圖使用所示方法對(duì)來(lái)自相同群體的HeLa細(xì)胞進(jìn)行染色，并在流式細(xì)胞儀上進(jìn)行分析。

（a）細(xì)胞用C3851染色。（b）使用傳統(tǒng)的乙醇固定和PI/RNase方法對(duì)細(xì)胞進(jìn)行染色。

這兩種方法都能夠清晰地分辨G0/G1、S和G2/M峰。

東京化成（TCI）細(xì)胞周期測(cè)定試劑盒（紅色）文獻(xiàn)參考：

New use for an old reagent: Cell cycle analysis of DNA content using flow cytometry in formamide treated cells

M. Carbonari, Cytom. A 2016, 89, 498.

作為TCI（東京化成）在中國(guó)的區(qū)域特約合作伙伴，艾美捷科技有限公司將為中國(guó)客戶提供全面的TCI的產(chǎn)品及服務(wù)。