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血管新生(或稱新生血管形成)是從現(xiàn)有血管延伸出新的血管的過程。主要參與的細(xì)胞是內(nèi)皮細(xì)胞,它們襯附在所有血管內(nèi)部,并構(gòu)成了毛細(xì)血管的幾乎全部結(jié)構(gòu)。血管新生涉及多個(gè)步驟:為了形成新的血管,內(nèi)皮細(xì)胞必須首先從其穩(wěn)定的附著位置逃脫,通過突破基底膜來實(shí)現(xiàn)。一旦完成這一過程,內(nèi)皮細(xì)胞會(huì)向血管新生刺激物(如腫瘤細(xì)胞或傷口相關(guān)巨噬細(xì)胞釋放的物質(zhì))方向遷移。此外,內(nèi)皮細(xì)胞還會(huì)增殖,以提供構(gòu)建新血管所需的足夠細(xì)胞數(shù)量。在增殖之后,新生成的內(nèi)皮細(xì)胞需要重新組織成三維管狀結(jié)構(gòu)。這些環(huán)節(jié)——基底膜破壞、細(xì)胞遷移、細(xì)胞增殖和管狀結(jié)構(gòu)形成——都可以成為干預(yù)的靶點(diǎn),并且可以在體外和體內(nèi)進(jìn)行測(cè)試。
作為Cell Biolabs全國總代理,艾美捷科技強(qiáng)烈推薦Cell Biolabs熱銷產(chǎn)品內(nèi)皮管形成試驗(yàn)(體外血管生成)。產(chǎn)品僅用于科研,不可用于臨床診斷。
| 產(chǎn)品名稱 | 貨號(hào) | 詳情 |
| 內(nèi)皮管形成試驗(yàn)(體外血管生成) | CBA-200 | 查看 |
體內(nèi)血管新生檢測(cè)方法:
目前,已經(jīng)開發(fā)出幾種體內(nèi)檢測(cè)系統(tǒng),包括雞胚絨毛尿囊膜(CAM)檢測(cè)法、體內(nèi)基質(zhì)膠(Matrigel)栓檢測(cè)法和角膜血管新生檢測(cè)法,這些方法可以更真實(shí)地評(píng)估血管新生反應(yīng)。然而,這些檢測(cè)方法耗時(shí)、繁瑣,并且需要專業(yè)的技術(shù)。
體外快速評(píng)估血管新生:
一種快速評(píng)估血管新生的方法是測(cè)量內(nèi)皮細(xì)胞形成三維結(jié)構(gòu)(管狀結(jié)構(gòu))的能力。內(nèi)皮細(xì)胞在膠原蛋白或纖維蛋白凝塊包被的培養(yǎng)皿上經(jīng)過幾天后會(huì)形成管狀結(jié)構(gòu)。Cell Biolabs的內(nèi)皮細(xì)胞管狀結(jié)構(gòu)形成試劑盒利用從Engelbreth–Holm–Swarm(EHS)腫瘤細(xì)胞中提取的細(xì)胞外基質(zhì)(ECM)凝膠。在ECM凝膠上形成的內(nèi)皮細(xì)胞管狀結(jié)構(gòu)能高度模擬體內(nèi)環(huán)境,可用于在體內(nèi)檢測(cè)之前測(cè)試血管新生抑制劑。
Cell Biolabs的內(nèi)皮細(xì)胞管狀結(jié)構(gòu)形成試劑盒提供了一個(gè)強(qiáng)大的體外血管新生評(píng)估系統(tǒng)。管狀結(jié)構(gòu)的形成可在18小時(shí)內(nèi)完成。使用試劑盒提供的熒光染料對(duì)管狀結(jié)構(gòu)進(jìn)行染色后,可以通過成像軟件定量分析管狀結(jié)構(gòu)的形成程度,例如平均管長和分支點(diǎn)數(shù)量。每套試劑盒提供的試劑量足夠在96孔板中進(jìn)行多達(dá)50次檢測(cè)。
試劑盒組成(干冰運(yùn)輸):
細(xì)胞外基質(zhì)(ECM)凝膠溶液(部件編號(hào)10010):五支0.5 mL的即用型管。
10倍染色緩沖液(部件編號(hào)10011):一支1 mL的管。
染色染料(部件編號(hào)10012):一支50 ?L的管,含有1 mM的Calcein AM(溶于DMSO)。
未提供材料:
內(nèi)皮細(xì)胞(如人臍靜脈內(nèi)皮細(xì)胞HUVEC、人微血管內(nèi)皮細(xì)胞HMEC)。
內(nèi)皮細(xì)胞培養(yǎng)基。
1倍PBS。
37℃培養(yǎng)箱,5% CO?環(huán)境。
光學(xué)顯微鏡。
熒光顯微鏡。
(可選)管狀結(jié)構(gòu)定量分析軟件。
保存條件:
所有組分需在-20℃保存。
試劑準(zhǔn)備:
ECM凝膠:在冰上或無霜4℃冰箱中過夜解凍,解凍后的ECM凝膠溶液可在4℃保存長達(dá)10天,不得再次冷凍。ECM凝膠溶液在室溫下會(huì)迅速凝膠化,整個(gè)過程必須始終將管置于冰上。
1倍染色緩沖液:將提供的10倍濃縮液按1:10的比例用去離子水稀釋,制備1倍染色緩沖液。稀釋后的溶液可在室溫保存。
1倍染色溶液:新鮮配制1倍染色緩沖液,將提供的染色染料稀釋至1 ?M的濃度。1倍染色溶液可在室溫保存。
結(jié)果示例:

下圖顯示了使用內(nèi)皮管的HUVEC細(xì)胞的成管結(jié)果地層分析。以下數(shù)據(jù)僅供參考。此數(shù)據(jù)不應(yīng)用于解讀實(shí)際結(jié)果
Cell Biolabs公司位于美國加利福尼亞州南部重要的工業(yè)城市圣迭戈(San Diego),是有名的細(xì)胞學(xué)試劑品牌,作為前沿的細(xì)胞學(xué)分析檢測(cè)試劑盒生產(chǎn)商,為生物技術(shù)和研究類客戶提供好的基于細(xì)胞功能研究以及疾病等方面的高端產(chǎn)品和技術(shù)服務(wù)。產(chǎn)品主要涵蓋細(xì)胞研究、細(xì)胞信號(hào)通路和蛋白質(zhì)生物學(xué)、代謝研究、病原體和毒素、干細(xì)胞研究等領(lǐng)域。全球眾多大學(xué)、政府研究機(jī)構(gòu)、生物、制藥企業(yè)的科研實(shí)驗(yàn)室均在使用Cell Biolabs的產(chǎn)品。

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