基于人類免疫缺陷病毒1型（HIV-1）的慢病毒載體已成為基因轉(zhuǎn)移研究中極具前景的工具。慢病毒載體的優(yōu)勢在于其能夠?qū)⒒蜣D(zhuǎn)移到分裂和非分裂細(xì)胞中并實(shí)現(xiàn)整合。通過使用水皰性口炎病毒包膜G（VSV-G）蛋白進(jìn)行假型包裝，慢病毒載體的靶細(xì)胞范圍得以顯著擴(kuò)展。研究表明，慢病毒載體能夠?qū)⒒蜻f送至神經(jīng)元、淋巴細(xì)胞和巨噬細(xì)胞等細(xì)胞類型，而這些細(xì)胞類型是傳統(tǒng)逆轉(zhuǎn)錄病毒載體無法使用的。此外，慢病毒載體已被證明在體內(nèi)對大腦、肝臟、肌肉和視網(wǎng)膜進(jìn)行基因轉(zhuǎn)導(dǎo)時(shí)既有效又無毒性或免疫反應(yīng)。近年來，慢病毒系統(tǒng)被廣泛用于在體外和體內(nèi)將小干擾RNA（siRNA）高效整合到多種細(xì)胞系和原代細(xì)胞中。

提供的GFP慢病毒對照是一種VSVG假型的泛嗜性病毒，能夠感染分裂和非分裂細(xì)胞。該病毒含有綠色熒光蛋白，為轉(zhuǎn)導(dǎo)提供了一個(gè)有用的對照工具。此外，這種對照病毒還可用于生成GFP穩(wěn)定表達(dá)的細(xì)胞系，并可通過綠色熒光分選來選擇穩(wěn)定克隆。

作為Cell Biolabs全國總代理，艾美捷科技強(qiáng)烈推薦Cell Biolabs熱銷產(chǎn)品GFP慢病毒控制。產(chǎn)品僅用于科研，不可用于臨床診斷。

質(zhì)量控制：

本管含有200 ?L的對照GFP上清液，其p24水平為100 ng/mL（顆粒滴度），這是通過p24 ELISA試劑盒（產(chǎn)品編號：VPK-108-HIV p24）測定的；同時(shí)，其感染滴度至少為1.0 × 10? TU/mL（感染性滴度），這是通過感染293細(xì)胞后綠色熒光檢測得出的（見圖）。

圖：293細(xì)胞中的GFP表達(dá)：293細(xì)胞以每孔100,000個(gè)細(xì)胞的密度接種于6孔板中，過夜培養(yǎng)。細(xì)胞在含有8 ?g/mL聚凝胺（Polybrene）的條件下用GFP慢病毒進(jìn)行感染，持續(xù)72小時(shí)。

安全注意事項(xiàng)

請記住，您將操作含有傳染性病毒的樣本。請遵循NIH推薦的針對所有含有BSL-2生物體的材料的指南。必須采取預(yù)防措施，避免直接接觸病毒上清液。

文獻(xiàn)參考：

1. Naldini, L., U. Blomer, P. Gallay, D. Ory, R. Mulligan, F. H. Gage, I. M. Verma, and D. Trono (1996)Science 272, 263-267.

2. Verma, I. M., and N. Somia (1997) Nature 389, 239-242

3. Kahl C. A., Marsh J., Fyffe J., Sanders D. A., and K. Cornetta (2004) J Virol. 78:1421-30.

4. White S. M., Renda M., Nam N. Y., Klimatcheva E., Zhu Y., Fisk J., Halterman M., Rimel B. J.,Federoff H., Pandya S., Rosenblatt J. D., and V. Planelles (1999) J Virol. 73:2832-40.

5. Kafri T., van Praag H., Ouyang L., Gage F. H., and I. M. Verma (1999) J Virol. 73:576-84.

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