Smith及其同事首次描述了使用苯乙烯/丙烯酸共聚物穩(wěn)定膜蛋白的方法（1）。這些共聚物可以在沒有清潔劑的情況下，將膜蛋白從天然膜中包裹在一個(gè)脂雙層片段周圍，形成類似盤狀或納米盤狀的粒子。AASTY HEPES基產(chǎn)品含有該共聚物和50 mM HEPES緩沖液，調(diào)至pH 7.5，因此只需加入雙蒸餾水即可直接應(yīng)用。所選的pH值非常有效地用于蛋白質(zhì)的溶解。Cube Biotech的AASTY 11-50是一種高純度的苯乙烯和丙烯酸共聚物，分子量（Mw）為5,500。共聚物在溶解后的濃度為1.5至6.0％，當(dāng)加入膜蛋白時(shí)，會(huì)導(dǎo)致高濃度。共聚物在與脂質(zhì)接觸的表面具有疏水性，而在外部具有親水性表面。這種結(jié)構(gòu)使納米盤在水溶液中高度可溶，從而在沒有清潔劑的情況下溶解膜蛋白。該產(chǎn)品可與磷脂一起使用，例如二十四碳二酰基甘油磷膽堿（DMPC）或棕櫚酰油酰基磷脂酰膽堿（POPC），并與膽酸鈉結(jié)合。AASTY和膜蛋白的復(fù)合物可用于許多生物物理學(xué)分析，如SDS-PAGE、SEC、Western Blot、UV/Vis光譜和許多色譜程序。

作為Cube Biotech在中國的區(qū)域總代理，艾美捷科技強(qiáng)烈推薦AASTY 11-50，10x1g。產(chǎn)品僅用于科研，不可用于臨床診斷。

共聚物溶液的再構(gòu)建

Cube AASTY共聚物以凍干形式交付，原溶液含有50 mM HEPES，pH值為7.5。每個(gè)小分子含有50毫克或1克聚合物。每50毫克聚合物需加入0.5毫升雙蒸餾水，即可恢復(fù)原始溶液，共聚物濃度為10%。根據(jù)不同的應(yīng)用方案要求，這個(gè)儲(chǔ)備液可以根據(jù)需要進(jìn)一步稀釋。

技術(shù)細(xì)節(jié)：

產(chǎn)品名稱：苯乙烯丙烯酸共聚物，鈉鹽，50 mM HEPES，pH值7.5

吸光度（280 nm，1% 溶液）：大于0.1

AA/STY比例：50:50

溶解度：大于10%（H2O）

緩沖液：HEPES

二價(jià)陽離子耐受性：6 mM

pH值（溶解后）：7.5 ± 0.3

分子量：10,000 - 11,000 g/mol

運(yùn)輸和儲(chǔ)存

運(yùn)輸溫度：常溫

凍干共聚物的儲(chǔ)存：-20°C，可保存數(shù)年

溶解共聚物的儲(chǔ)存：2-8°C，可保存數(shù)天

對于從稀溶液中純化帶有His標(biāo)簽的蛋白質(zhì)，我們推薦使用PureCube Ni-NTAMagBeads。對于GST標(biāo)記的、Rho1d4標(biāo)記的或Strep?標(biāo)記的蛋白質(zhì)的親和純化，Cube Biotech提供專用瓊脂糖樹脂、磁珠和預(yù)包裝柱。

文獻(xiàn)參考：

1. Anton A.A. Smith, Henriette E. Autzen, Bryan Faust, Joseph L. Mann, Benjamin W. Muir, Shaun Howard, AlmarPostma, Andrew J. Spakowitz, Yifan Cheng, and Eric A. Appel; Lipid Nanodiscs via Ordered Copolymers Chem 6,2782–2795, October 8, 2020.

2. M Timcenko, AAA Autzen, HE Autzen Characterization of divalent cation interactions with AASTY nativenanodiscs. Biorxiv, doi: https://doi.org/10.1101/2021.10.07.463511

Cube Biotech 是一家專注于蛋白純化產(chǎn)品的德國生產(chǎn)商，尤其擅長蛋白純化及膜蛋白純化。Cube Biotech 研發(fā)團(tuán)隊(duì)擁有近50年經(jīng)驗(yàn)在膜蛋白的表達(dá)、純化和結(jié)晶等研究，為制藥和生物技術(shù)行業(yè)以及學(xué)術(shù)環(huán)境提供這些經(jīng)驗(yàn)。膜蛋白的結(jié)構(gòu)分析仍是一個(gè)巨大的挑戰(zhàn)，尤其是關(guān)于人源膜蛋白。德國 Cube Biotech 為研究和進(jìn)步釋放膜蛋白的力量，以團(tuán)隊(duì)所有科學(xué)專業(yè)知識(shí)支持制藥和生物技術(shù)界。通過運(yùn)用前沿科學(xué)技術(shù)，德國 Cube Biotech 提供的系列產(chǎn)品解決膜蛋白質(zhì)純化和穩(wěn)定化研究。Cube Biotech可提供一系列用于蛋白質(zhì)親和層析填料和蛋白質(zhì)穩(wěn)定化的高品質(zhì)產(chǎn)品，產(chǎn)品的配套試劑包括去污劑、無細(xì)胞表達(dá)裂解物、納米盤支架蛋白和膜蛋白結(jié)晶板。

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