使用苯乙烯/馬來酸共聚物來穩(wěn)定膜蛋白的方法最初由Knowles及其同事描述(1)。這些共聚物可以在沒有清潔劑的情況下，通過包裹在脂質(zhì)雙層上形成類似盤狀粒子或納米盤的方式，從天然膜中提取膜蛋白并穩(wěn)定在雙層中。基于HEPES的SMALP產(chǎn)品包含共聚物和50 mM HEPES緩沖液，調(diào)節(jié)至pH 7.5，因此只需添加雙蒸餾水即可直接應(yīng)用。所選的pH值非常適合蛋白質(zhì)的溶解。Cube Biotech的SMALP 200是苯乙烯和馬來酸高度純化的共聚物(SMA)，分子量(Mw)為6,500。在溶解后，共聚物的濃度為1.5%至6.0%，當(dāng)添加到膜蛋白時會導(dǎo)致高濃度。共聚物提供了一個面向脂質(zhì)的疏水表面，以及一個外部的親水表面。這種設(shè)置使納米盤在水溶液中高度溶解，并允許在沒有清潔劑的情況下溶解膜蛋白。該產(chǎn)品可與磷脂一起使用，例如二十四碳二酰基甘油磷酰膽堿(DMPC)或棕櫚酰亞油酰磷脂酰膽堿(POPC)，結(jié)合十二烷基硫酸鈉。SMA和膜蛋白的復(fù)合物可用于許多生物物理分析，如SDS-PAGE、SEC、Western Blot、UV/Vis光譜和許多色譜程序。Cube SMA共聚物溶液的重組Cube SMA共聚物經(jīng)過凍干處理，原液中含有50 mM HEPES，pH 7.5。每個小分子含有50毫克蛋白質(zhì)。加入0.5毫升雙蒸餾水將恢復(fù)含有10%共聚物濃度的原始溶液。根據(jù)不同的應(yīng)用協(xié)議，這種儲備液可以進一步稀釋。

作為Cube Biotech在中國的區(qū)域總代理，艾美捷科技強烈推薦SMALP 200 10 g。產(chǎn)品僅用于科研，不可用于臨床診斷。

技術(shù)細(xì)節(jié)

名稱：苯乙烯馬來酸共聚物鈉鹽 / SMA / SMALP 200，50 mM HEPES，pH 7.5

吸光度（280 nm，1% 溶液）：> 0.3

分子量：6,500 克/摩爾

S:MA 比例：2.3:1

溶解度：> 10%（H2O）

顏色：微黃

氣味：無味

pH（溶解后）：7.5 ± 0.1

運輸和存儲

運輸溫度：常溫

凍干共聚物存儲：-20°C，可保存數(shù)年

溶解共聚物存儲：2-8°C，可保存數(shù)天

文獻參考：

1. Knowles, T. J., Finka, R., Smith, C., Lin, Y.-P., Dafforn, T., & Overduin, M. (2009). Membrane Proteins Solubilized Intact in LipidContaining Nanoparticles Bounded by Styrene Maleic Acid Copolymer. Journal of the American Chemical Society, 131(22),7484–7485. doi:10.1021/ja810046q .

2. Lee, S. C., Knowles, T. J., Postis, V. L. G., Jamshad, M., Parslow, R. A., Lin, Y., … Dafforn, T. R. (2016). A method for detergent-freeisolation of membrane proteins in their local lipid environment. Nature Protocols, 11(7), 1149–1162. doi:10.1038/nprot.2016.070

Cube Biotech 是一家專注于蛋白純化產(chǎn)品的德國生產(chǎn)商，尤其擅長蛋白純化及膜蛋白純化。Cube Biotech 研發(fā)團隊擁有近50年經(jīng)驗在膜蛋白的表達(dá)、純化和結(jié)晶等研究，為制藥和生物技術(shù)行業(yè)以及學(xué)術(shù)環(huán)境提供這些經(jīng)驗。膜蛋白的結(jié)構(gòu)分析仍是一個巨大的挑戰(zhàn)，尤其是關(guān)于人源膜蛋白。德國 Cube Biotech 為研究和進步釋放膜蛋白的力量，以團隊所有科學(xué)專業(yè)知識支持制藥和生物技術(shù)界。通過運用前沿科學(xué)技術(shù)，德國 Cube Biotech 提供的系列產(chǎn)品解決膜蛋白質(zhì)純化和穩(wěn)定化研究。Cube Biotech可提供一系列用于蛋白質(zhì)親和層析填料和蛋白質(zhì)穩(wěn)定化的高品質(zhì)產(chǎn)品，產(chǎn)品的配套試劑包括去污劑、無細(xì)胞表達(dá)裂解物、納米盤支架蛋白和膜蛋白結(jié)晶板。

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