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特色產品納米盤首次由Sligar及其同事描述(1, 2)。它們提供了由膜支架蛋白(MSPs)維持的磷脂雙分子層系統。MSPs是載脂蛋白(apo) A-I的截短形式,包裹著一塊脂質雙分子層,提供一個面向脂質的疏水表面,以及一個外部的親水表面。這種設置使得納米盤在水溶液中高度溶解,并允許在無洗滌劑的情況下溶解膜蛋白。這些納米雙層顆粒直徑約為7,取決于所使用的MSP變異體。最常用的是MSP1D1、MSP1E3D1和MSP1D1-ΔH5,但也有其他MSP1D1的缺失突變體適用于。最常用的磷脂是二酰亞油磷脂膽堿(POPC)與膽酸鈉的組合。Cube Biotech提供納米盤組裝試劑盒,其中包含所需的脂質和膽酸鈉。請參閱專用協議以生成納米盤。它們旨在準備預組裝的納米盤,可添加至細胞。在蛋白質合成過程中,新生的膜蛋白會整合到納米盤中。根據2毫克MSP蛋白,該協議產生約50微升濃度約為10毫克/毫升的納米盤,相當于約0.5E.coli細胞提取物,具體取決于膜蛋白的表達速率。這相當于1微升濃縮至0.5毫摩爾的納米盤溶液。使用這種方法,不需要洗滌劑,最大限度地減少可能的人為因素。在細胞表達系統中獲得的產量通常僅限于幾微克蛋白,但提供了包括生物素化或同位素標記等修飾的可能性。Cube Biotech提供不同MSP蛋白:脂質組合的預組裝納米盤。此外,Cube Biotech還提供帶標簽和無標簽版本。它們可用于將溶解到洗滌劑膠束中的膜蛋白。納米盤也是我們膜蛋白服務的重要組成部分。空納米盤和重組膜蛋白重新組裝到納米盤中均可提供。
作為Cube Biotech在中國的區域總代理,艾美捷科技強烈推薦納米磷脂盤組裝試劑盒 MSP1D1_POPC。產品僅用于科研,不可用于臨床診斷。
| 產品名稱 | 貨號 | 詳情 |
納米磷脂盤組裝試劑盒 MSP1D1_POPC | CBB-26233 | 查看 |
技術細節
MSP1D1蛋白:
純度:> 90%(SDS-PAGE)
氨基酸數目:201
分子質量:23,329 Da
消光系數(在水中)ε280:23,950 M-1cm-1
棕櫚酰-油酰-磷脂膽堿(POPC):
CAS號:26853-31-6
分子質量:760.08 Da
化學式:C42H82NO8P
膽酸鈉:
CAS號:361-09-1
分子質量:430.57 Da
化學式:C24H39NaO5
運輸與儲存
運輸溫度:常溫
凍干組分儲存:-20°C,可保存數月
重組組分儲存:2-8°C,可保存數天
文獻參考:
1. Bayburt, T.H. et al. Reconstitution and imaging of a membrane protein in a nanometer-sizephospholipid bilayer. J. Struct. Biol. (1998), 123(1):37-44
2. Civjan, N.R. et al. Direct solubilization of heterologously expressed membrane proteinsby incorporation into nanoscale lipid bilayers. BioTechniques (2003) 35:556-563
3. Hagn, F. et al. Optimized phospholipid bilayer nanodiscs facilitate high-resolution structuredetermination of membrane proteins. J.Am.Chem. Soc. (2013), 135:1919-1925
4. Proverbio D., et al. Functional properties of cell-free expressed human endothelin A andendothelin B receptors in artifical membrane environments. Biochim.Biophys. Acta (2013),1828(9):2182-92
5. Roos, C., et al. 2014, High-level Cell-free production of membrane proteins with Nanodiscs. In:Alexandrov, K., and Johnston W.A. (eds) Cell-free protein synthesis: Methods and Protocols.Methods in Molecular Biology, vol. 1118, Springer Science+Business Media.
Cube Biotech 是一家專注于蛋白純化產品的德國生產商,尤其擅長蛋白純化及膜蛋白純化。Cube Biotech 研發團隊擁有近50年經驗在膜蛋白的表達、純化和結晶等研究,為制藥和生物技術行業以及學術環境提供這些經驗。膜蛋白的結構分析仍是一個巨大的挑戰,尤其是關于人源膜蛋白。德國 Cube Biotech 為研究和進步釋放膜蛋白的力量,以團隊所有科學專業知識支持制藥和生物技術界。通過運用前沿科學技術,德國 Cube Biotech 提供的系列產品解決膜蛋白質純化和穩定化研究。Cube Biotech可提供一系列用于蛋白質親和層析填料和蛋白質穩定化的高品質產品,產品的配套試劑包括去污劑、無細胞表達裂解物、納米盤支架蛋白和膜蛋白結晶板。
作為Cube Biotech在中國的區域總代理,艾美捷科技有限公司將為中國客戶提供全面的Cube Biotech以及客戶訂制化服務。

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