納米磷脂盤最初由Sligar及其同事描述(1, 2)。它們提供由膜支架蛋白(MSPs)維持的磷脂雙層系統(tǒng)。MSPs是載脂蛋白(apo) A-I的截短形式，環(huán)繞著一塊脂質(zhì)雙層，提供一個面向脂質(zhì)的疏水表面，以及一個外部的親水表面。這種設(shè)置使得納米磷脂盤在水溶液中高度溶解，并允許在無洗滌劑的情況下溶解膜蛋白。這些納米雙層顆粒直徑約為7，取決于所使用的MSP變種的突變。最廣泛應(yīng)用的是MSP1D1、MSP1E3D1和MSP1D1-ΔH5，但也有其他MSP1D1的缺失突變適用于。最常用的磷脂是棕櫚酰二亞硫酸磷脂膽堿(POPC)與膽酸鈉的組合。Cube Biotech提供納米盤組裝試劑盒，其中包含一定量的脂質(zhì)和膽酸鈉。請查看專用協(xié)議以生成納米磷脂盤。它們旨在準備預(yù)組裝的納米磷脂盤，可添加到細胞中。在蛋白質(zhì)合成過程中，新生膜蛋白整合到納米盤中。根據(jù)2毫克MSP蛋白，該協(xié)議可產(chǎn)生約50微升濃度約為10毫克/毫升的納米盤，相當于約0.5大腸桿菌無細胞提取物，取決于膜蛋白表達速率。這相當于將1微升濃縮至0.5毫摩爾的納米盤溶液加入總細胞。通過這種方法，不需要洗滌劑，從而最大程度減少可能的人為因素。在細胞表達系統(tǒng)中獲得的產(chǎn)量通常限制在幾微克蛋白，但提供了包括生物素化或同位素標記在內(nèi)的修飾的可能性。Cube Biotech提供具有不同MSP蛋白：脂質(zhì)組合的預(yù)組裝納米盤。此外，Cube Biotech提供帶標簽和無標簽版本。它們可用于將溶解到洗滌劑膠團中的膜蛋白納入其中。納米磷脂盤也是我們膜蛋白服務(wù)提供的重要組成部分。空白納米盤和重組膜蛋白重組到納米盤中均可獲得。請查看詳情。

作為Cube Biotech在中國的區(qū)域總代理，艾美捷科技強烈推薦納米磷脂盤組裝試劑盒 MSP1D1 dH5_DMPC。產(chǎn)品僅用于科研，不可用于臨床診斷。

技術(shù)細節(jié)

MSP1D1ΔH5蛋白：

純度：> 90% (SDS-PAGE)

氨基酸數(shù)目：168

分子量：19,488 Da

消光系數(shù)（在水中）ε280：18,450 M-1cm-1

二肉豆蔻基甘油磷酰膽堿（DMPC）：

CAS號：18194-24-6

分子量：677.93

化學式：C36H72NO8P

膽酸鈉：

CAS號：361-09-1

分子量：430.57克/摩爾

化學式：C24H39NaO5

運輸與儲存

運輸溫度：常溫

凍干組分儲存：-20°C，可保存數(shù)月

重組組分儲存：2-8°C，可保存數(shù)天

蛋白質(zhì)概述和氨基酸序列：

文獻參考：

1. Bayburt, T.H. et al. Reconstitution and imaging of a membrane protein in a nanometer-sizephospholipid bilayer. J. Struct. Biol. (1998), 123(1):37-44

2. Civjan, N.R. et al. Direct solubilization of heterologously expressed membrane proteinsby incorporation into nanoscale lipid bilayers. BioTechniques (2003) 35:556-563

3. Hagn, F. et al. Optimized phospholipid bilayer nanodiscs facilitate high-resolution structuredetermination of membrane proteins. J.Am.Chem. Soc. (2013), 135:1919-1925

4. Proverbio D., et al. Functional properties of cell-free expressed human endothelin A andendothelin B receptors in artifical membrane environments. Biochim.Biophys. Acta (2013),1828(9):2182-92

5. Roos, C., et al. 2014, High-level Cell-free production of membrane proteins with Nanodiscs. In:Alexandrov, K., and Johnston W.A. (eds) Cell-free protein synthesis: Methods and Protocols.Methods in Molecular Biology, vol. 1118, Springer Science+Business Media.

Cube Biotech 是一家專注于蛋白純化產(chǎn)品的德國生產(chǎn)商，尤其擅長蛋白純化及膜蛋白純化。Cube Biotech 研發(fā)團隊擁有近50年經(jīng)驗在膜蛋白的表達、純化和結(jié)晶等研究，為制藥和生物技術(shù)行業(yè)以及學術(shù)環(huán)境提供這些經(jīng)驗。膜蛋白的結(jié)構(gòu)分析仍是一個巨大的挑戰(zhàn)，尤其是關(guān)于人源膜蛋白。德國 Cube Biotech 為研究和進步釋放膜蛋白的力量，以團隊所有科學專業(yè)知識支持制藥和生物技術(shù)界。通過運用前沿科學技術(shù)，德國 Cube Biotech 提供的系列產(chǎn)品解決膜蛋白質(zhì)純化和穩(wěn)定化研究。Cube Biotech可提供一系列用于蛋白質(zhì)親和層析填料和蛋白質(zhì)穩(wěn)定化的高品質(zhì)產(chǎn)品，產(chǎn)品的配套試劑包括去污劑、無細胞表達裂解物、納米盤支架蛋白和膜蛋白結(jié)晶板。

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