一、產(chǎn)品概述

由艾美捷代理Bethyl Laboratories推出的人白蛋白（Human Albumin）ELISA檢測試劑盒（貨號：E88-129）為定量檢測人白蛋白（Human Albumin）的雙抗體夾心酶聯(lián)免疫吸附測定（Sandwich ELISA）試劑盒。人白蛋白是由ALB基因編碼的一種血清蛋白，Uniprot ID為P02768，在維持pH平衡、調(diào)節(jié)膠體滲透壓以及運輸脂肪酸、氨基酸、激素等多種化合物中發(fā)揮關(guān)鍵生理功能。本試劑盒適用于血清、血漿、腦脊液、乳汁及尿液等多種生物樣本中白蛋白濃度的精確測定。

二、技術(shù)性能指標

參數(shù) | 規(guī)格

檢測靶標 | 人白蛋白

反應(yīng)種屬 | 人

檢測范圍 | 0.69 – 500 ng/ml

適用樣本類型 | 血清、血漿、腦脊液、乳汁、尿液

檢測方法 | 生物素-鏈霉親和素-辣根過氧化物酶（Biotinylated-Streptavidin-HRP）

檢測類型 | 雙抗體夾心ELISA

三、儲存與穩(wěn)定性

儲存條件：2 - 8 °C

有效期：自收貨之日起6個月

原產(chǎn)地：美國

請按照指定溫度保存所有試劑組分，避免反復(fù)凍融。首次使用后，未用完的板條應(yīng)密封返回原包裝，與其余試劑一同存放于2-8°C。

四、試劑盒組分

組分名稱 | 規(guī)格 | 數(shù)量

人白蛋白預(yù)包被96孔可拆酶標板 | 1塊 | 1

人白蛋白標準品（500 ng/管） | 500 ng/管 | 2

人白蛋白檢測抗體 | 12 ml | 1瓶

20倍濃縮稀釋緩沖液C | 25 ml | 1瓶

HRP溶液A | 12 ml | 1瓶

TMB底物液 | 12 ml | 1瓶

終止液 | 12 ml | 1瓶

20倍濃縮洗滌液 | 50 ml | 1瓶

封板膜 | - | 6張

五、檢測原理

本試劑盒采用雙抗體夾心ELISA法。酶標板已預(yù)先包被抗人白蛋白捕獲抗體。加入樣本或標準品后，樣品中的人白蛋白與捕獲抗體結(jié)合。洗板后加入檢測抗體，形成“捕獲抗體-白蛋白-檢測抗體”復(fù)合物。檢測抗體經(jīng)生物素標記，隨后與鏈霉親和素標記的辣根過氧化物酶（HRP）結(jié)合。加入TMB底物后，HRP催化底物顯色，顏色深度與樣本中白蛋白含量呈正比。加入終止液終止反應(yīng)后，在450 nm波長讀取吸光度值，根據(jù)標準曲線計算樣本中白蛋白濃度。

六、樣本收集與處理

1. 血清：使用常規(guī)采血管收集全血，室溫凝固30分鐘后，1000×g離心15分鐘，取上層血清。

2. 血漿：使用肝素、EDTA或檸檬酸鈉抗凝管收集，1000×g離心15分鐘，取上層血漿。

3. 腦脊液：常規(guī)腰椎穿刺收集，避免溶血，可直接檢測或稀釋后檢測。

4. 乳汁：收集后10000×g離心10分鐘去除脂肪層，取中層清液。

5. 尿液：收集晨尿或隨機尿，1000×g離心10分鐘去除沉淀。

注意：樣本收集后應(yīng)立即檢測，或分裝后于-80°C保存，避免反復(fù)凍融。檢測前將樣本恢復(fù)至室溫，根據(jù)預(yù)實驗結(jié)果使用1×稀釋緩沖液進行適當稀釋，確保讀數(shù)落在標準曲線范圍內(nèi)。

七、檢測步驟（簡要）

1. 試劑準備：使用去離子水將20×洗滌液和20×稀釋緩沖液C稀釋為1×工作液。平衡所有試劑至室溫。

2. 加樣：每孔加入100 ?l標準品或稀釋后的樣本，覆蓋封板膜，室溫孵育2小時。

3. 洗板：棄去孔內(nèi)液體，每孔加入300 ?l 1×洗滌液，洗滌4次，在吸水紙上拍干。

4. 加檢測抗體：每孔加入100 ?l檢測抗體，室溫孵育1小時。

5. 洗板：重復(fù)步驟3。

6. 加HRP溶液：每孔加入100 ?l HRP溶液A，室溫避光孵育30分鐘。

7. 洗板：重復(fù)步驟3。

8. 顯色：每孔加入100 ?l TMB底物液，室溫避光孵育15-20分鐘。

9. 終止：每孔加入100 ?l終止液，輕輕震蕩混勻。

10. 讀板：30分鐘內(nèi)于450 nm波長測定吸光度。

八、結(jié)果計算

以標準品濃度為橫坐標，吸光度值為縱坐標，使用四參數(shù)邏輯斯蒂擬合（4-PL）或線性回歸繪制標準曲線。根據(jù)樣本的吸光度值從標準曲線上計算對應(yīng)濃度，再乘以稀釋倍數(shù)即得原始樣本中白蛋白含量。

九、性能特征

檢測范圍：0.69 – 500 ng/ml，可覆蓋生理及病理條件下的廣泛濃度范圍。

靈敏度：最低檢測限為0.69 ng/ml。

特異性：抗體特異性識別人白蛋白，與小鼠、大鼠白蛋白無交叉反應(yīng)。

重復(fù)性：批內(nèi)和批間變異系數(shù)（CV）均<10%。

十、注意事項

1. 本產(chǎn)品僅限科研使用，不得用于臨床診斷。

2. 不同批次試劑請勿混用。

3. TMB底物液應(yīng)避光保存，若出現(xiàn)藍色表明已污染，請勿使用。

4. 終止液含酸性物質(zhì)，操作時請佩戴防護手套和護目鏡。

5. 實驗過程中需使用去離子水或蒸餾水。