一、產(chǎn)品概述

由艾美捷代理Bethyl Laboratories推出的山羊抗小鼠IgG1重鏈-HRP偶聯(lián)多克隆抗體（貨號(hào)：A90-105P）為辣根過(guò)氧化物酶（HRP）直接偶聯(lián)的山羊抗小鼠IgG1重鏈特異性多克隆抗體，經(jīng)固相吸附處理和親和純化，確保對(duì)小鼠IgG1亞型的高選擇性識(shí)別。該抗體適用于酶聯(lián)免疫吸附測(cè)定（ELISA）、免疫細(xì)胞化學(xué)（ICC）、免疫組織化學(xué)（IHC）和蛋白質(zhì)印跡（WB）等多種檢測(cè)平臺(tái)。HRP的直接偶聯(lián)省去了二抗孵育步驟，可顯著簡(jiǎn)化實(shí)驗(yàn)流程并降低非特異性背景。產(chǎn)品濃度為1 mg/ml，HRP與抗體的摩爾比為4:1，提供高靈敏度的信號(hào)放大能力。

二、關(guān)鍵規(guī)格

參數(shù) | 詳細(xì)信息

靶標(biāo) | 小鼠IgG1重鏈

反應(yīng)性 | 小鼠

應(yīng)用 | ELISA, ICC, IHC, WB

宿主 | 山羊

克隆性 | 多克隆

形式 | 完整IgG

同型 | 山羊IgG

偶聯(lián)物 | HRP（辣根過(guò)氧化物酶）

純度 | 抗原親和純化

抗原種屬 | 小鼠

濃度 | 1 mg/ml

保存條件 | 2 – 8 °C

有效期 | 收貨后1年

緩沖液 | 磷酸鹽緩沖液（PBS），含0.2% BSA和0.05% Pro-Clean 400

三、分子生物學(xué)背景

小鼠免疫球蛋白G1（IgG1）是小鼠血清中含量最高的IgG亞型之一。IgG1具有以下重要特性：

胎盤轉(zhuǎn)運(yùn)：能夠通過(guò)胎盤屏障，為胎兒提供被動(dòng)免疫。

Fc受體結(jié)合：與Fc受體結(jié)合能力強(qiáng)，介導(dǎo)調(diào)理吞噬和抗體依賴性細(xì)胞介導(dǎo)的細(xì)胞毒性（ADCC）。

補(bǔ)體激活：有效激活補(bǔ)體經(jīng)典途徑，參與病原體清除。

在實(shí)驗(yàn)應(yīng)用中，小鼠IgG1是單克隆抗體最常用的亞型之一。本抗體特異性識(shí)別小鼠IgG1的重鏈，適用于檢測(cè)小鼠來(lái)源的IgG1型一抗，或?qū)π∈驣gG1亞型進(jìn)行定量和定性分析。

四、產(chǎn)品特性與質(zhì)量控制

亞型特異性

本抗體經(jīng)固相吸附（solid phase adsorbed）處理，并通過(guò)親和層析純化，確保對(duì)小鼠IgG1的高度選擇性。經(jīng)免疫電泳和ELISA驗(yàn)證：

特異性反應(yīng)：與小鼠IgG1重鏈特異性結(jié)合。

交叉反應(yīng)性：與小鼠IgA、IgM、IgG2a、IgG2b、IgG2c、IgG3及IgE的交叉反應(yīng)率低于1%。

異常情況提示：部分雜交瘤克隆可能表達(dá)異常的免疫球蛋白相關(guān)肽段，可能導(dǎo)致與本抗體的非預(yù)期識(shí)別，建議在使用前驗(yàn)證特定克隆的反應(yīng)性。

HRP偶聯(lián)特性

偶聯(lián)方法：抗體經(jīng)親和純化后，與辣根過(guò)氧化物酶（HRP）通過(guò)化學(xué)交聯(lián)偶聯(lián)。

摩爾比：HRP與抗體的摩爾比為4:1，確保每個(gè)抗體分子攜帶多個(gè)酶分子，提供較強(qiáng)的信號(hào)放大能力。

濃度測(cè)定：偶聯(lián)前采用比爾定律測(cè)定免疫球蛋白濃度（1 mg/ml IgG在A280處吸光度為1.4）。

穩(wěn)定劑與防腐劑

緩沖液為磷酸鹽緩沖液（PBS），含：

0.2% BSA：牛血清白蛋白作為穩(wěn)定劑，防止抗體在低濃度下非特異性吸附，并增強(qiáng)儲(chǔ)存穩(wěn)定性。

0.05% Pro-Clean 400：一種廣譜防腐劑，替代疊氮化鈉，因其不抑制HRP活性，適用于酶偶聯(lián)抗體。

五、儲(chǔ)存與穩(wěn)定性

保存條件：2–8°C，嚴(yán)禁冷凍。冷凍會(huì)導(dǎo)致蛋白變性和HRP活性喪失。

有效期：自收貨之日起1年，在未受污染且正確儲(chǔ)存條件下。

注意事項(xiàng)：本抗體含HRP，避免接觸強(qiáng)氧化劑或金屬離子。Pro-Clean 400作為防腐劑，在推薦濃度下對(duì)細(xì)胞培養(yǎng)實(shí)驗(yàn)可能有影響，但用于固定樣本的ICC/IHC無(wú)影響。

六、應(yīng)用與推薦稀釋度

重要提示：制造商未對(duì)所列全部應(yīng)用進(jìn)行逐一驗(yàn)證，以下稀釋度為基于同類抗體的推薦起始范圍，用戶需根據(jù)具體實(shí)驗(yàn)體系進(jìn)行優(yōu)化。

酶聯(lián)免疫吸附測(cè)定（ELISA）

推薦稀釋范圍：1:10,000 – 1:100,000

操作說(shuō)明：用于檢測(cè)包被或捕獲的小鼠IgG1型抗體。建議使用封閉液（如1% BSA-PBS或5%脫脂牛奶-PBS）稀釋抗體。加入TMB或ABTS等HRP底物顯色。

優(yōu)化建議：從1:20,000起始，根據(jù)信號(hào)強(qiáng)度調(diào)整。高靈敏度需求時(shí)可使用1:10,000；若背景偏高，可提高至1:50,000以上。

免疫組織化學(xué)（IHC）

推薦稀釋范圍：1:200 – 1:2,000

樣本類型：福爾馬林固定石蠟包埋（FFPE）組織切片或冰凍切片。

操作說(shuō)明：適用于檢測(cè)組織切片中小鼠IgG1型一抗的結(jié)合。需注意內(nèi)源性過(guò)氧化物酶的封閉（如3% H2O2處理10–15分鐘）。

優(yōu)化建議：起始稀釋度1:500。孵育時(shí)間室溫1–2小時(shí)或4°C過(guò)夜。DAB或AEC顯色。

免疫細(xì)胞化學(xué)（ICC）

推薦稀釋范圍：1:200 – 1:2,000

樣本類型：培養(yǎng)細(xì)胞（固定和透化處理后）。

操作說(shuō)明：與IHC類似，需封閉內(nèi)源性過(guò)氧化物酶。適用于檢測(cè)細(xì)胞爬片或培養(yǎng)板中一抗的結(jié)合。

優(yōu)化建議：起始稀釋度1:500。若信號(hào)弱，可降至1:200；若背景高，升至1:2,000。

蛋白質(zhì)印跡（WB）

推薦稀釋范圍：1:2,000 – 1:20,000

操作說(shuō)明：用于檢測(cè)膜上小鼠IgG1型一抗識(shí)別的目標(biāo)蛋白。本抗體識(shí)別一抗的重鏈（約55 kDa），因此在非還原或還原條件下均可使用。

注意事項(xiàng)：當(dāng)檢測(cè)免疫沉淀產(chǎn)物或細(xì)胞裂解液中的一抗時(shí)，目標(biāo)蛋白可能位于IgG重鏈附近。由于本抗體為HRP直接偶聯(lián)，無(wú)需二抗孵育，可顯著縮短實(shí)驗(yàn)時(shí)間。

優(yōu)化建議：起始稀釋度1:5,000。使用化學(xué)發(fā)光底物（如ECL）檢測(cè)。注意：本抗體識(shí)別的是小鼠IgG1重鏈，而非輕鏈，因此不會(huì)產(chǎn)生約25 kDa的輕鏈信號(hào)。

七、相關(guān)產(chǎn)品推薦

抗小鼠IgG（全分子）-HRP（用于檢測(cè)所有小鼠IgG亞型）

抗小鼠IgG輕鏈特異性-HRP（用于IP-WB，避免重鏈干擾）

HRP底物（TMB、DAB、ECL等）

本抗體以其高亞型特異性、HRP直接標(biāo)記和多平臺(tái)兼容性，是小鼠IgG1相關(guān)免疫檢測(cè)的理想選擇。