ECM Select Array Kit Ultra-36是一種細(xì)胞外基質(zhì)篩選陣列，包含一片功能化了專(zhuān)有水凝膠的顯微鏡玻璃載玻片。36種細(xì)胞外基質(zhì)（ECM）條件被印刷成陣列點(diǎn)位，全部來(lái)自人源。每個(gè)點(diǎn)位直徑為400微米，以9個(gè)復(fù)制品的形式印刷（圖1）。ECM被局限在每個(gè)點(diǎn)位內(nèi)，不與相鄰點(diǎn)位交叉擴(kuò)散，因此每個(gè)點(diǎn)位代表一個(gè)獨(dú)立的“孔”或?qū)嶒?yàn)。哺乳動(dòng)物細(xì)胞在體內(nèi)存在著影響其行為（增殖、分化、死亡等）和功能的獨(dú)特微環(huán)境。在體外培養(yǎng)細(xì)胞時(shí)，必須重現(xiàn)這種微環(huán)境以實(shí)現(xiàn)生理相關(guān)的生長(zhǎng)。在影響細(xì)胞在體內(nèi)行為的眾多因素中，細(xì)胞外基質(zhì)（ECM）在確定細(xì)胞功能方面起著重要作用。目前，尋找適用于細(xì)胞培養(yǎng)的合適ECM是一個(gè)試錯(cuò)過(guò)程，需要大量的細(xì)胞以及顯著的時(shí)間和成本投入。ECM Select Array Kit Ultra-36允許以較少的細(xì)胞數(shù)量在短時(shí)間內(nèi)并行篩選36種ECM和ECM組合。感興趣的細(xì)胞被接種到帶有4個(gè)培養(yǎng)腔的載玻片上（附帶提供），并在孵育箱中培養(yǎng)所需的時(shí)間。可以使用亮場(chǎng)顯微鏡觀察細(xì)胞形態(tài)、附著和生長(zhǎng)。通過(guò)使用特定熒光標(biāo)記物對(duì)載玻片上的細(xì)胞進(jìn)行染色，可以監(jiān)測(cè)特定的細(xì)胞行為。熒光信號(hào)可以通過(guò)熒光顯微鏡成像系統(tǒng)進(jìn)行檢測(cè)。

與在多孔組織培養(yǎng)板中執(zhí)行相同實(shí)驗(yàn)相比，艾美捷Advanced BioMatrix ECM Select Array Kit Ultra-36使用簡(jiǎn)單。細(xì)胞接種、固定、洗滌和處理步驟都在一個(gè)單一的溶液交換中完成，消除了多孔板處理的步驟。對(duì)于大多數(shù)細(xì)胞類(lèi)型，從開(kāi)始到結(jié)束，確定適用于培養(yǎng)細(xì)胞的合適ECM可以在不到24小時(shí)內(nèi)完成。

ECM Select 陣列套件 Ultra-36參數(shù)說(shuō)明：

注意事項(xiàng)和免責(zé)聲明：本品僅供研究和開(kāi)發(fā)使用，不適用于人體或其他用途。

存儲(chǔ)、保質(zhì)期和穩(wěn)定性ECM Select Ultra Array Kit的保質(zhì)期在-10至-30°C下至少為12個(gè)月。保質(zhì)期測(cè)試正在進(jìn)行中。不建議重復(fù)凍結(jié)和解凍，但有限的凍結(jié)和解凍似乎對(duì)產(chǎn)品沒(méi)有負(fù)面影響。不建議在更低的溫度下存儲(chǔ)。

根據(jù)我們的穩(wěn)定性研究，ECM Select Ultra Array Kit在2至8°C下儲(chǔ)存3-4天時(shí)表現(xiàn)良好。然而，經(jīng)過(guò)2周在2至8°C下儲(chǔ)存后，一些細(xì)胞外基質(zhì)條件的細(xì)胞附著能力會(huì)降低。在2至8°C下儲(chǔ)存1個(gè)月后，載玻片上幾乎所有的ECM條件都失去了細(xì)胞附著能力。

操作步驟將細(xì)胞接種到載玻片上：

1. 準(zhǔn)備250,000個(gè)所需的細(xì)胞，用5毫升完整的培養(yǎng)基（細(xì)胞密度為50,000個(gè)細(xì)胞/毫升）。

2. 從-20°C的冷凍機(jī)中取出ECM Select Ultra Array Kit，放在無(wú)菌層流罩下。打開(kāi)鋁箔袋，取出鋁箔袋中的內(nèi)容。首先，將培養(yǎng)皿從塑料袋中取出并取下蓋子。然后打開(kāi)載玻片架上的蓋子，輕輕將載玻片從載玻片架上取下。將載玻片放入培養(yǎng)皿的一個(gè)腔中。在取下載玻片時(shí)要小心，使用無(wú)菌技術(shù)，如戴無(wú)菌手套或使用無(wú)菌鑷子，并且只觸摸載玻片的邊緣。確保印刷的斑點(diǎn)面朝上（載玻片上的數(shù)字和字母應(yīng)清晰可見(jiàn)）。

3. 在載玻片上加入5毫升無(wú)菌磷酸鹽緩沖液（PBS）。確保整個(gè)載玻片浸沒(méi)在PBS溶液中，并避免在載玻片下方困住氣泡。輕輕搖晃載玻片幾次，然后吸去PBS溶液。不要觸摸載玻片表面。

4. 加入5毫升所需的培養(yǎng)基（與培養(yǎng)細(xì)胞相同的培養(yǎng)基），確保整個(gè)載玻片浸沒(méi)在培養(yǎng)基中。輕輕搖晃載玻片幾次，然后吸去培養(yǎng)基溶液。不要觸摸載玻片表面。

5. 輕輕振動(dòng)移液器，簡(jiǎn)短地將準(zhǔn)備好的250,000個(gè)細(xì)胞上下吸取，并立即將細(xì)胞直接加到載玻片上。在分配細(xì)胞時(shí)，通過(guò)來(lái)回移動(dòng)移液器來(lái)均勻分布細(xì)胞。不要觸摸載玻片表面。將蓋子蓋回培養(yǎng)皿上。

6. 小心地將含有載玻片的4孔培養(yǎng)皿轉(zhuǎn)移到孵育箱中，在37°C、5% CO2下培養(yǎng)細(xì)胞過(guò)夜（最少12小時(shí)以確保高效的細(xì)胞附著，最多3天）。

注意事項(xiàng)：當(dāng)從載玻片架上取下載玻片時(shí)，載玻片表面可能可見(jiàn)陣列斑點(diǎn)。用PBS/培養(yǎng)基洗滌后，這些斑點(diǎn)可能會(huì)消失。這是正常的，不會(huì)影響ECM陣列的性能。

注意事項(xiàng)：對(duì)于細(xì)胞系，12小時(shí)應(yīng)足夠觀察到細(xì)胞附著。對(duì)于從組織中新鮮分離的細(xì)胞或之前凍存的細(xì)胞，可能需要多達(dá)2天才能觀察到顯著的細(xì)胞附著。

注意事項(xiàng)：如果需要進(jìn)行細(xì)胞增殖研究，請(qǐng)減少細(xì)胞數(shù)量，以便在斑點(diǎn)上留出額外的空間供細(xì)胞分裂。建議根據(jù)細(xì)胞的大小和形態(tài)，從100,000-150,000個(gè)細(xì)胞開(kāi)始。細(xì)胞越大，所需細(xì)胞數(shù)量越少。

美國(guó)Advanced BioMatrix是3D組織培養(yǎng)、細(xì)胞檢測(cè)和細(xì)胞增殖等領(lǐng)域?qū)嶒?yàn)解決方案的佼佼者，在分離、純化、凍干、細(xì)胞培養(yǎng)和蛋白檢測(cè)、多肽粘附、附著因子、基質(zhì)硬度和其他3D matrix 產(chǎn)品開(kāi)發(fā)方面有著豐富的經(jīng)驗(yàn)。