艾美捷脂質(zhì)體轉(zhuǎn)染試劑（ABS-G2500）是一種新型的陽離子脂質(zhì)體轉(zhuǎn)染試劑，毒性低，轉(zhuǎn)染效率高。且對(duì)多種類型的細(xì)胞和培養(yǎng)板都具有高轉(zhuǎn)染效率。

單位：1.0 毫升

存儲(chǔ)條件：存儲(chǔ)于4?C。請(qǐng)勿冷凍。

特點(diǎn)：Z小毒性

脂質(zhì)體轉(zhuǎn)染試劑應(yīng)用：

1、非常適合懸浮細(xì)胞（左圖）

2、倍更高的表達(dá)式（右圖）

左圖：abm的Susfectin?轉(zhuǎn)染試劑可以高效轉(zhuǎn)染懸浮細(xì)胞。使用Susfectin?轉(zhuǎn)染試劑（目錄號(hào)G4000），用亂序siRNA-GFP慢載體（目錄號(hào)LV015-G）轉(zhuǎn)染HEK293懸浮細(xì)胞。

右圖：與PEI相比，Susfectin?的表達(dá)高出2倍。使用競爭轉(zhuǎn)染試劑Susfectin TM（目錄號(hào)G4000）或線性PEI轉(zhuǎn)染CHO細(xì)胞。使用ELISA定量上清液中的重組抗體水平。

脂質(zhì)體轉(zhuǎn)染試劑使用方法：

請(qǐng)使用以下條件作為指導(dǎo)，以在6孔板或35毫米培養(yǎng)皿中轉(zhuǎn)染哺乳動(dòng)物細(xì)胞。

1. 在轉(zhuǎn)染前18至24小時(shí)，以70%的密度播種細(xì)胞。對(duì)于懸浮細(xì)胞，以5 x 10^5 細(xì)胞/毫升的密度播種。

2. 對(duì)于每個(gè)轉(zhuǎn)染樣本，請(qǐng)按以下方式準(zhǔn)備復(fù)合物：

溶液A：將2.0微克的DNA稀釋到100微升無血清、無抗生素的培養(yǎng)基中。

溶液B：在使用前通過彈動(dòng)試管混合DNAfectin? Plus，然后將6-10微升的DNAfectin? Plus稀釋到100微升無血清、無抗生素的培養(yǎng)基中。

在室溫下孵育溶液A和溶液B 5分鐘。

3. 合并溶液，輕輕混合以確保均勻分布，并在室溫下孵育20分鐘。

注意：復(fù)合物在室溫下穩(wěn)定3-5小時(shí)。

4. 向每個(gè)DNA-轉(zhuǎn)染復(fù)合物中加入0.8毫升無血清培養(yǎng)基，并通過劇烈彈動(dòng)試管充分混合。

5. 抽吸每個(gè)孔中的所有培養(yǎng)基，然后將1.0毫升的轉(zhuǎn)染試劑復(fù)合物直接加入到每個(gè)孔中（對(duì)于貼壁細(xì)胞）。對(duì)于懸浮細(xì)胞，收集細(xì)胞并以300xg離心以收集細(xì)胞沉淀，用1.0毫升轉(zhuǎn)染復(fù)合物重懸。然后將細(xì)胞和轉(zhuǎn)染復(fù)合物轉(zhuǎn)移到6孔板中。孵育細(xì)胞。

6. 在5-8小時(shí)后，移除轉(zhuǎn)染溶液，加入2.0毫升完整培養(yǎng)基（含血清和抗生素）。繼續(xù)孵育細(xì)胞。

7. 在48-72小時(shí)后，可以使用適當(dāng)?shù)臋z測方法分析轉(zhuǎn)基因的表達(dá)，或繼續(xù)進(jìn)行穩(wěn)定細(xì)胞系的生成。

8. 制造穩(wěn)定細(xì)胞系：在存在選擇標(biāo)記的情況下，以與殺傷曲線確定中使用的密度相同的密度進(jìn)行細(xì)胞傳代。

abm的Susfectin轉(zhuǎn)染試劑是特別配制的，用于將DNA轉(zhuǎn)染到真核懸浮細(xì)胞中，而無需去除血清/培養(yǎng)基。這種簡化的工作流程使Susfectin成為轉(zhuǎn)染CHO和293細(xì)胞的Z佳選擇。