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支原體PCR檢測試劑盒具有很高的特異性和敏感性,可Z大程度地減少假陽性,同時(shí)確保覆蓋200多種支原體菌株,以便在1小時(shí)內(nèi)快速可靠地常規(guī)篩選細(xì)胞培養(yǎng)物。支原體是非常不受歡迎的,容易獲得并且因難以捉摸的感染發(fā)作而臭名昭著。它可以在分子水平上改變感染的細(xì)胞,導(dǎo)致細(xì)胞形態(tài)和生長特征的明顯變化。建議及時(shí)檢測細(xì)胞培養(yǎng)物中的支原體,以阻止廣泛的污染并節(jié)省昂貴的消除工作。MasterMix含有凝膠上樣染料,便于凝膠電泳上樣。
支原體檢測試劑盒組分:
產(chǎn)品組分 數(shù)量
BlasTaq? 2X PCR MasterMix 1.25 毫升
引物混合物 100 微升
陽性對照 250 微升
無核酸酶H2O 1.0 毫升
艾美捷支原體檢測試劑盒(ABS-G238)方案:
1.在篩選前,細(xì)胞應(yīng)在培養(yǎng)中至少保持48-72小時(shí)不受干擾,并且至少達(dá)到80%的密度。直接從培養(yǎng)中收集2.5微升。
2.使用前混合各個(gè)組分,并在冰上組裝反應(yīng)。
3.輕輕混合反應(yīng)物并短暫離心。按照標(biāo)準(zhǔn)PCR的熱循環(huán)條件進(jìn)行操作:

4.進(jìn)行PCR后,將反應(yīng)體系保持在4°C,或存儲(chǔ)在-20°C直至使用。
5.通過瓊脂糖凝膠電泳分析擴(kuò)增產(chǎn)物。
6.通過乙酰胺或SafeView?(產(chǎn)品編號(hào)G108)染色進(jìn)行可視化觀察。
一般說明:
PCR產(chǎn)物大約500堿基對(bp)的長度表明所測試的細(xì)胞培養(yǎng)受到了支原體的污染。請注意,PCR產(chǎn)物的長度會(huì)根據(jù)不同的支原體菌株在370-550堿基對之間變化。
在進(jìn)行PCR之前,應(yīng)將反應(yīng)混合物保持在冰上,并在反應(yīng)混合物準(zhǔn)備好后立即開始PCR。
為什么要檢測細(xì)胞中的支原體?
由于支原體的體積很小,它可能存在于你的生長培養(yǎng)基中而無法被肉眼檢測到。這可能會(huì)由于其對以下方面的影響而導(dǎo)致實(shí)驗(yàn)中出現(xiàn)重大錯(cuò)誤:增殖、新陳代謝、基因合成與處理、粘附特性等等。
Applied Biological Materials Inc(abm)公司是加拿大一家不斷尋找用于生命科學(xué)研究和藥物開發(fā)新產(chǎn)品的公司。眾多的產(chǎn)品線全面涵蓋了許多J端技術(shù),主要包括RT-PCR,RNA干擾的分子試劑,細(xì)胞永生化,腺病毒和慢病毒表達(dá)系統(tǒng)等。
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