人類白細(xì)胞介素-1（IL-1）是宿主對(duì)各種感染性、炎癥性和免疫學(xué)挑戰(zhàn)反應(yīng)的關(guān)鍵介導(dǎo)因子。兩種不同的多肽，即IL-1α和IL-1β，介導(dǎo)IL-1的生物活性，并且都與相同的細(xì)胞表面受體結(jié)合。它們最初被合成為31-kDa的細(xì)胞內(nèi)前體，隨后在單核細(xì)胞上清液中作為17-kDa的成熟蛋白被發(fā)現(xiàn)。也已經(jīng)描述了膜結(jié)合的IL-1，這可能是IL-1介導(dǎo)的局部效應(yīng)的一部分。IL-1的主要來源是血液?jiǎn)魏思?xì)胞和組織巨噬細(xì)胞。其他特殊細(xì)胞，如T細(xì)胞和B細(xì)胞、各種上皮細(xì)胞、內(nèi)皮細(xì)胞以及一些間充質(zhì)細(xì)胞，也能產(chǎn)生IL-1。IL-1β是由單核細(xì)胞和巨噬細(xì)胞分泌的主要形式，人們認(rèn)為它們是循環(huán)（血漿）IL-1的主要來源。在血漿和其他生物液體中已經(jīng)描述了對(duì)IL-1活性的抑制。IL-1影響幾個(gè)無關(guān)的組織，并且是“急性期”炎癥反應(yīng)的主要介導(dǎo)因子，這些反應(yīng)以代謝、內(nèi)分泌和免疫功能的改變?yōu)樘卣鳌＿@種細(xì)胞因子在T細(xì)胞激活中具有重要作用，提供了IL-2（T細(xì)胞生長(zhǎng)因子）產(chǎn)生的必需信號(hào)之一。它是通過作用于神經(jīng)系統(tǒng)（發(fā)熱、睡眠、厭食）、骨髓來源的細(xì)胞（中性粒細(xì)胞、單核細(xì)胞和淋巴細(xì)胞的趨化和/或激活）以及各種組織（成纖維細(xì)胞增殖、軟骨和骨基質(zhì)的吸收、膠質(zhì)細(xì)胞增殖、刺激內(nèi)皮細(xì)胞的促凝血活性等）來介導(dǎo)炎癥過程的主要因子。

艾美捷LDN-IL-1βELISA（RUO）試劑盒（ILE-3000R）：

名稱：IL-1β酶聯(lián)免疫分析法（ELISA）

描述：

用于人血清和血漿中白介素1β（IL-1β）的定量測(cè)量的酶免疫分析法。

設(shè)計(jì)：ELISA

樣本體積：

200微升血清或血漿

總測(cè)定時(shí)間：2小時(shí)15分鐘

標(biāo)準(zhǔn)范圍：0/24 – 1,166皮克/毫升

靈敏度：0.35皮克/毫升

儲(chǔ)存條件：2 – 8攝氏度

試劑盒：96次測(cè)定

CE認(rèn)證：是

LDN-IL-1βELISA（RUO）試劑盒檢測(cè)原理：

IL-1β酶聯(lián)免疫分析法（ELISA）是一種在微孔板（microtiterplate）上進(jìn)行的固相酶放大靈敏度免疫分析法。該分析法使用針對(duì)IL-1β不同表位的單克隆抗體（MAbs）。校準(zhǔn)品和樣本與涂覆在微孔板孔上的捕獲單克隆抗體（MAb 1）反應(yīng)，并與標(biāo)記有辣根過氧化物酶（HRP）的單克隆抗體（MAb 2）反應(yīng)。在孵育一段時(shí)間后，形成三明治結(jié)構(gòu)：包被的MAb 1 – 人IL-1β – MAb 2 – HRP，隨后洗滌微孔板以去除未結(jié)合的酶標(biāo)記抗體。通過顯色反應(yīng)測(cè)量結(jié)合的酶標(biāo)記抗體。加入顯色溶液（TMB）并孵育。通過添加停止液來停止反應(yīng)，然后在適當(dāng)?shù)牟ㄩL(zhǎng)下讀取微孔板。通過比色法測(cè)量吸光度來確定底物轉(zhuǎn)化量，該吸光度與IL-1β濃度成正比。繪制校準(zhǔn)曲線，并通過校準(zhǔn)曲線插值確定樣本中的IL-1β濃度。使用ELISA讀取器（線性范圍高達(dá)3個(gè)OD單位）和先進(jìn)的數(shù)據(jù)簡(jiǎn)化方法（多色數(shù)據(jù)簡(jiǎn)化），在低范圍內(nèi)實(shí)現(xiàn)了高靈敏度，并擴(kuò)展了校準(zhǔn)范圍。

LDN-IL-1βELISA（RUO）試劑盒結(jié)果的計(jì)算：

1 多色讀數(shù)

1. 在這種情況下，軟件將進(jìn)行數(shù)據(jù)處理。

2. 首先，使用650納米（或630納米）的參考濾光片，在450納米處讀取板。

3. 然后，使用相同的參考濾光片，在490納米處進(jìn)行第二次讀數(shù)。

4. 軟件將自動(dòng)驅(qū)動(dòng)讀取器，并將兩次讀數(shù)整合到多色模型中。該技術(shù)可以生成高達(dá)10.5的OD值。

5. 多色數(shù)據(jù)處理的原理如下：

Xi = 450納米處的OD值

Yi = 490納米處的OD值

使用標(biāo)準(zhǔn)無加權(quán)線性回歸，計(jì)算參數(shù)A和B：Y = A*X + B

如果Xi < 3個(gè)OD單位，則計(jì)算的X = Xi

如果Xi > 3個(gè)OD單位，則計(jì)算的X = (Yi-B)/A

使用4參數(shù)邏輯曲線擬合來構(gòu)建校準(zhǔn)曲線。

通過在校準(zhǔn)曲線上插值，確定樣本中IL-1β的濃度。

2 雙色讀數(shù)

1. 使用設(shè)置在650納米（或630納米）的參考濾光片，在450納米處讀取板。

2. 計(jì)算重復(fù)測(cè)定的兩次讀數(shù)的平均值。

3. 在半對(duì)數(shù)或線性坐標(biāo)紙上，將每個(gè)校準(zhǔn)品的OD值（縱坐標(biāo)）與其相應(yīng)的IL-1β濃度（橫坐標(biāo)）繪制出來，并用直線連接繪制的點(diǎn)，通過校準(zhǔn)點(diǎn)繪制校準(zhǔn)曲線。

4. 通過在校準(zhǔn)曲線上插值，讀取每個(gè)對(duì)照品和樣本的濃度。

5. 計(jì)算機(jī)輔助數(shù)據(jù)簡(jiǎn)化將簡(jiǎn)化這些計(jì)算。如果使用自動(dòng)結(jié)果處理，建議使用4參數(shù)邏輯函數(shù)曲線擬合。

LDN Labor Diagnostika Nord GmbH & Co. KG（簡(jiǎn)稱LDN）旨在開發(fā)、制造和向臨床和研究實(shí)驗(yàn)室市場(chǎng)提供專業(yè)的體外診斷測(cè)試系統(tǒng)和創(chuàng)新技術(shù)。艾美捷科技是LDN Labor Diagnostika Nord的中國(guó)代理商，為科研工作者提供優(yōu)質(zhì)的產(chǎn)品與服務(wù)。