施萬細胞是研究涉及糖基化、再生能力降低、氧化應(yīng)激以及其他神經(jīng)退行性疾病的糖尿病神經(jīng)病變發(fā)病機制的寶貴工具。這種永生化小鼠施萬細胞表達膠質(zhì)細胞標記物（S100、GFAP、p75NTR）、參與施萬細胞發(fā)育和周圍髓鞘形成的轉(zhuǎn)錄因子（Krox20、Oct6、PAX3 和 SOX10），以及神經(jīng)營養(yǎng)因子（NGF、BDNF、GDNF 和 CNTF）。

在生長因子如血小板源性生長因子-BB（PDGF-BB）、酸性成纖維細胞生長因子（aFGF）、β成纖維細胞生長因子（bFGF）或轉(zhuǎn)化生長因子-β1（TGF-β1）存在的情況下，這些細胞會表現(xiàn)出有絲分裂反應(yīng)。IMS32 細胞可用于研究涉及周圍神經(jīng)再生的作用機制，以及作為評估神經(jīng)系統(tǒng)疾病發(fā)病機制的體外模型。使用免疫反應(yīng)性來檢測細胞標記物。

艾美捷abm永生化小鼠雪旺細胞基本參數(shù)：

貨號：T0295

名稱：永生化小鼠施萬細胞（IMS32）

生物體：小鼠（M. musculus）

組織：大腦

供體歷史：ICR 小鼠

生長特性：貼壁，紡錘形

細胞類型：永生化細胞

儲存條件：液氮的氣相，或低于-130°C。

運輸條件：干冰運輸。

產(chǎn)品格式：冷凍

預(yù)期用途：本產(chǎn)品僅用于實驗室研究。不適用于任何動物或人類的治療用途，任何人類或動物的消費，或任何診斷用途。

生物安全等級：II

生長條件：

建議使用 PriCoat? T25 燒瓶（G299）或應(yīng)用細胞外基質(zhì)（G422）以促進細胞對培養(yǎng)容器的粘附。PriGrow III (TM003) + 10% FBS + 1% 青霉素/鏈霉素溶液（G255），37.0°C，5% CO?。

拆包和儲存說明：

1. 目視檢查包裝容器是否有泄漏或破損的跡象。

2. 立即將干冰包裝中的冷凍細胞轉(zhuǎn)移到低于-130°C的溫度中，最好在液氮氣相儲存，直到準備使用。

為了確保Z高的活性水平，在收到后盡快解凍小瓶并開始培養(yǎng)。如果需要繼續(xù)儲存，小瓶應(yīng)僅儲存在低于-130°C或液氮氣相中。不要在-70°C下儲存，因為這會導(dǎo)致活性喪失。

解凍協(xié)議：

1. 在37°C水浴中快速搖晃解凍細胞（最多2分鐘）。瓶蓋應(yīng)保持在水面之上，以最小化污染風(fēng)險。

2. 用70%乙醇噴灑并擦拭瓶身外部以消毒。從這一點開始，所有操作應(yīng)嚴格在生物安全柜內(nèi)使用無菌條件進行。

3. 將細胞懸液轉(zhuǎn)移到含有5ml預(yù)加熱的完全生長培養(yǎng)基的15ml無菌圓錐管中。以125xg離心細胞5-7分鐘。

4. 在不干擾細胞沉淀物的情況下吸去上清液。將細胞沉淀物重新懸浮在推薦的預(yù)加熱的完全生長培養(yǎng)基中，并分裝到T25培養(yǎng)瓶中。

5. 在推薦的條件下培養(yǎng)細胞。

傳代協(xié)議：

下面給出的體積是針對T75培養(yǎng)瓶的；根據(jù)培養(yǎng)容器的大小按比例增加或減少體積。當(dāng)培養(yǎng)容器80%融合時傳代細胞。

1. 吸去培養(yǎng)基，并加入2-3ml預(yù)加熱的0.25% Trypsin-EDTA到培養(yǎng)容器中。

2. 在顯微鏡下觀察細胞以確認脫落（通常在2-10分鐘內(nèi)）。難以脫落的細胞可以放在37°C下，幾分鐘以促進脫落。

3. 通過向培養(yǎng)容器中加入相等體積的完全生長培養(yǎng)基來中和Trypsin-EDTA。

4. 將培養(yǎng)懸液轉(zhuǎn)移到無菌離心管中，并以125xg離心5分鐘。實際的離心時間和速度可能因細胞類型而異。

5. 吸去上清液，并用預(yù)加熱的新鮮完全生長培養(yǎng)基重新懸浮沉淀物。根據(jù)需要將適量的細胞懸液添加到新的培養(yǎng)容器中。

6. 在推薦的條件下培養(yǎng)細胞。

永生化小鼠雪旺細胞文獻參考：

Watabe, K., Fukuda, T., Tanaka, J., Honda, H., Toyohara, K., & Sakai, O. (1995). Spontaneously immortalized adult mouse Schwann cells secrete autocrine and paracrine growth-promoting activities. Journal of neuroscience research, 41(2), 279–290.