2-磷酸甘油酸（2-PG）是一種甘油酸，作為糖酵解這一代謝過程中的中間產(chǎn)物。磷酸甘油酸變位酶將3-磷酸甘油酸轉(zhuǎn)化為2-PG，而烯醇化酶催化2-PG轉(zhuǎn)化為磷酸烯醇式丙酮酸（PEP），這是葡萄糖轉(zhuǎn)化為丙酮酸的倒數(shù)第二步。在細(xì)菌中，2-PG分子會(huì)共價(jià)結(jié)合到烯醇化酶上，導(dǎo)致該酶失活。磷酸甘油酸變位酶的過表達(dá)與多種人類癌癥中的腫瘤生長(zhǎng)、存活和侵襲有關(guān)。

Cell BioLabs的2-磷酸甘油酸檢測(cè)試劑盒是一種簡(jiǎn)單的熒光法檢測(cè)方法，可在96孔微孔板格式中測(cè)量生物樣本中的2-PG含量。每個(gè)試劑盒提供足夠的試劑進(jìn)行多達(dá)100次檢測(cè)（包括空白、2-PG標(biāo)準(zhǔn)品和未知樣本）。通過與已知濃度的2-PG標(biāo)準(zhǔn)品進(jìn)行比較，確定樣本中的2-PG濃度。該試劑盒的檢測(cè)靈敏度下限為3.1 ?M 2-PG。

注意：每個(gè)樣本重復(fù)需要2次檢測(cè)，一次用烯醇化酶處理（+E），一次不處理（-E）。2-PG的計(jì)算基于兩個(gè)孔的相對(duì)熒光單位（RFU）讀數(shù)差異。

作為Cell Biolabs全國(guó)總代理，艾美捷科技強(qiáng)烈推薦Cell Biolabs熱銷產(chǎn)品2-磷酸甘油酸檢測(cè)試劑盒。產(chǎn)品僅用于科研，不可用于臨床診斷。

2-磷酸甘油酸檢測(cè)試劑盒檢測(cè)原理：

Cell BioLabs的2-磷酸甘油酸檢測(cè)試劑盒用于測(cè)量生物樣本中的總2-PG。2-PG在烯醇化酶的作用下被轉(zhuǎn)化為磷酸烯醇式丙酮酸（PEP）。在ADP存在的情況下，PEP通過丙酮酸激酶被轉(zhuǎn)化為丙酮酸和ATP。丙酮酸在磷酸和氧氣存在的情況下，通過丙酮酸氧化酶被轉(zhuǎn)化為乙酰磷酸、二氧化碳和過氧化氫。生成的過氧化氫通過高特異性的熒光探針進(jìn)行檢測(cè)。辣根過氧化物酶催化探針與過氧化氫之間的反應(yīng)，二者以1:1的比例結(jié)合。樣本和標(biāo)準(zhǔn)品在96孔微孔板格式中進(jìn)行比較，孵育60分鐘后，使用標(biāo)準(zhǔn)96孔熒光板讀數(shù)器讀取結(jié)果。

相關(guān)產(chǎn)品  

1. MET-5162：磷酸烯醇式丙酮酸檢測(cè)試劑盒  

2. MET-5159：焦磷酸鹽檢測(cè)試劑盒  

3. MET-5029：丙酮酸檢測(cè)試劑盒（熒光法）  

4. MET-5158：甲硫氨酸檢測(cè)試劑盒  

5. MET-5013：乳酸檢測(cè)試劑盒（熒光法）

試劑盒組成  

盒子1（藍(lán)色冰袋運(yùn)輸）  

1. 2-PG標(biāo)準(zhǔn)品（部件號(hào)51671C）：1管50 ?L，濃度為20 mM的2-磷酸甘油酸。  

2. 烯醇化酶（部件號(hào)51672D）：1管50 ?L，濃度為20 U/mL。  

3. ADP（部件號(hào)51624C）：1管250 ?L，濃度為200 mM的腺苷二磷酸。  

4. 熒光探針（部件號(hào)50231C）：1管50 ?L，溶于DMSO。  

5. 辣根過氧化物酶（HRP）（部件號(hào)234402-T）：1管10 ?L，濃度為100 U/mL，溶于甘油。  

6. FAD（部件號(hào)50293C）：1管50 ?L，濃度為2 mM的黃素腺嘌呤二核苷酸。  

7. TPP（部件號(hào)50294C）：1管50 ?L，濃度為2 mM的硫胺素焦磷酸。  

8. 丙酮酸氧化酶（部件號(hào)50295C）：1管300 ?L。  

9. 丙酮酸激酶（部件號(hào)51625D）：1管200 ?L。  

盒子2（藍(lán)色冰袋運(yùn)輸）  

1. 10倍檢測(cè)緩沖液（部件號(hào)51622A）：1瓶25 mL。  

2. 氯化鎂（MgCl?）（部件號(hào)51623A）：1管200 ?L，濃度為1 M。

未提供材料  

1. 10 kDa分子量截留（MWCO）離心過濾器（例如Amicon Ultra 0.5 mL）  

2. 標(biāo)準(zhǔn)96孔黑色熒光微孔板和/或黑色細(xì)胞培養(yǎng)微孔板

儲(chǔ)存條件  

收到試劑盒后，將10倍檢測(cè)緩沖液和氯化鎂在室溫下保存。將丙酮酸激酶和烯醇化酶儲(chǔ)存在-80℃。將其他所有組分儲(chǔ)存在-20℃。熒光探針對(duì)光敏感，必須妥善保存。避免多次凍融循環(huán)。

結(jié)果示例  

下圖顯示了典型的2-磷酸甘油酸檢測(cè)試劑盒結(jié)果。應(yīng)該使用以下數(shù)據(jù)僅供參考。這些數(shù)據(jù)不應(yīng)用于解釋或計(jì)算實(shí)際樣本結(jié)果。

文獻(xiàn)參考：

1. Bo?l G Pichereau V Mijakovic I Mazé A Poncet S Gillet S Giard J-C Hartke A Auffray Y and Deutscher J (2004) J. Mol. Bio. 337:485-496

2. Votyakova TV, and Reynolds IJ (2001) J. Neurochem. 79:266-277.

3. Sharif F, Rasul A, Ashraf A, Hussain G, Younis T, Sarfraz I, Chaudhry MA, Bukhari SA, Ji XY,Selamoglu Z, and Ali M (2019) Int. U. Biochem. Mol. Biol. 71:1418-1427.

Cell Biolabs公司位于美國(guó)加利福尼亞州南部重要的工業(yè)城市圣迭戈（San Diego），是有名的細(xì)胞學(xué)試劑品牌，作為前沿的細(xì)胞學(xué)分析檢測(cè)試劑盒生產(chǎn)商，為生物技術(shù)和研究類客戶提供好的基于細(xì)胞功能研究以及疾病等方面的高端產(chǎn)品和技術(shù)服務(wù)。產(chǎn)品主要涵蓋細(xì)胞研究、細(xì)胞信號(hào)通路和蛋白質(zhì)生物學(xué)、代謝研究、病原體和毒素、干細(xì)胞研究等領(lǐng)域。全球眾多大學(xué)、政府研究機(jī)構(gòu)、生物、制藥企業(yè)的科研實(shí)驗(yàn)室均在使用Cell Biolabs的產(chǎn)品。