谷氨酰胺是一種條件性必需氨基酸（在應(yīng)激條件下需要從飲食中攝取），在蛋白質(zhì)生物合成中發(fā)揮重要作用。谷氨酰胺的側(cè)鏈與谷氨酸幾乎完全相同，唯一的區(qū)別是側(cè)鏈上的羧基被酰胺基團(tuán)取代。谷氨酰胺是人體血液中最豐富的游離氨基酸。許多食物富含谷氨酰胺，包括富含蛋白質(zhì)的食物，如乳制品、雞蛋、魚類、雞肉、牛肉，以及蔬菜，如豆類、甜菜、卷心菜、菠菜和胡蘿卜。除了參與蛋白質(zhì)合成和功能外，谷氨酰胺還在腎臟中通過產(chǎn)生銨離子調(diào)節(jié)酸堿平衡，作為僅次于葡萄糖的細(xì)胞能量來源，以及在許多合成過程中（如嘌呤合成）提供氮源。癌細(xì)胞依賴谷氨酰胺作為氮源和碳源。谷氨酰胺在某些腫瘤中的重要性已被證實(shí)。例如，阻斷谷氨酰胺代謝已被證明可以抑制乳腺癌、肝癌、腎癌和T細(xì)胞急性淋巴細(xì)胞白血病等多種腫瘤的生長。

Cell BioLabs的谷氨酰胺檢測試劑盒是一種簡單的檢測方法，無需預(yù)處理即可測量生物樣本中的谷氨酰胺水平。該試劑盒的檢測靈敏度下限為1.56 ?M谷氨酰胺。每個(gè)試劑盒提供足夠的試劑進(jìn)行多達(dá)200次檢測（包括標(biāo)準(zhǔn)曲線和未知樣本）。

注意：每個(gè)樣本重復(fù)需要2次檢測，一次用谷氨酰胺酶處理（+G），一次不處理（-G）。谷氨酰胺的計(jì)算基于兩個(gè)孔的相對熒光單位（RFU）讀數(shù)差異。

作為Cell Biolabs全國總代理，艾美捷科技強(qiáng)烈推薦Cell Biolabs熱銷產(chǎn)品谷氨酰胺檢測試劑盒(熒光法)。產(chǎn)品僅用于科研，不可用于臨床診斷。

谷氨酰胺檢測試劑盒(熒光法)檢測原理：

谷氨酰胺檢測試劑盒是一種靈敏的定量熒光法檢測谷氨酰胺的試劑盒。谷氨酰胺酶將谷氨酰胺和水（H?O）轉(zhuǎn)化為谷氨酸和氨（NH?）。谷氨酸氧化酶將谷氨酸轉(zhuǎn)化為α-酮戊二酸、氨（NH?）以及過氧化氫（H?O?）。反應(yīng)中還加入了L-丙氨酸和谷氨酸丙酮酸轉(zhuǎn)氨酶，以再生谷氨酸和H?O?。因此，反應(yīng)可以多次循環(huán)，從而顯著放大H?O?的生成。在辣根過氧化物酶（HRP）存在的情況下，熒光探針與H?O?以1:1的化學(xué)計(jì)量比反應(yīng)，生成高熒光的熒光素。熒光素產(chǎn)物可以通過熒光微孔板讀數(shù)器在530-560 nm激發(fā)波長和590 nm發(fā)射波長下輕松讀取。熒光值與樣本中的谷氨酰胺水平成正比。未知樣本中的谷氨酰胺含量通過與標(biāo)準(zhǔn)曲線比較來確定。

相關(guān)產(chǎn)品  

1. MET-5151：S-腺苷同型半胱氨酸（SAH）ELISA試劑盒  

2. MET-5152：S-腺苷甲硫氨酸（SAM）ELISA試劑盒  

3. STA-341：OxiSelect?過氧化氫酶活性檢測試劑盒  

4. STA-344：OxiSelect?過氧化氫/過氧化物酶檢測試劑盒  

試劑盒組成（藍(lán)色冰袋運(yùn)輸）  

1. 谷氨酰胺酶（部件號(hào)51651D）：1瓶1 mL，濃度為2.5 U/mL。  

2. 陰性對照緩沖液（部件號(hào)51652B）：1瓶1 mL。  

3. 谷氨酸氧化酶（部件號(hào)267402）：1瓶160 ?L，濃度為5 U/mL。  

   注：1個(gè)單位定義為在pH 7.4、30°C條件下，每分鐘從L-谷氨酸生成1.0微摩爾α-酮戊二酸的酶量。  

4. 谷氨酸丙酮酸轉(zhuǎn)氨酶（部件號(hào)267403）：1瓶50 ?L，濃度為100 U/mL。  

   注：1個(gè)單位定義為在pH 7.5、25°C條件下，每分鐘催化1.0微摩爾L-丙氨酸轉(zhuǎn)氨的酶量。  

5. L-丙氨酸（部件號(hào)267404）：1瓶10 ?L，濃度為200 mM。  

6. L-谷氨酰胺標(biāo)準(zhǔn)品（部件號(hào)51653B）：1瓶100 ?L，濃度為10 mM。  

7. 熒光探針（部件號(hào)268101）：1瓶250 ?L，10 mM DMSO溶液，棕色瓶。  

8. 辣根過氧化物酶（HRP）（部件號(hào)234402）：1瓶100 ?L。  

9. 5倍檢測緩沖液（部件號(hào)51654A）：1瓶50 mL，1 M醋酸鈉緩沖液，pH 4.9。  

10. 5倍反應(yīng)緩沖液（部件號(hào)51655A）：1瓶50 mL，1 M Tris緩沖液，pH 8.0。  

未提供材料  

1. 標(biāo)準(zhǔn)96孔黑色熒光微孔板和/或黑色細(xì)胞培養(yǎng)微孔板  

儲(chǔ)存條件  

收到試劑盒后，將5倍檢測緩沖液和5倍反應(yīng)緩沖液在室溫下保存。將谷氨酰胺酶、谷氨酸氧化酶和谷氨酸丙酮酸轉(zhuǎn)氨酶分裝后儲(chǔ)存在-80℃。將其他所有組分分裝后儲(chǔ)存在-20℃。避免多次凍融循環(huán)。熒光探針對光敏感，必須妥善保存。

結(jié)果示例  

下圖顯示了典型的谷氨酰胺測定結(jié)果。應(yīng)使用以下數(shù)據(jù)僅供參考。這些數(shù)據(jù)不應(yīng)用于解釋實(shí)際結(jié)果。

文獻(xiàn)參考：

1. Brosnan JT (2003). J. Nutrition. 133: 2068S–2072S.

2. Votyakova TV, and Reynolds IJ (2001) Neurochem. 79:266-277.

3. Lacey JM and Wilmore DW (1990). Nutrition Rev. 48: 297–309.

4. Corbet C and Feron O (2015). Current Opinion in Clinical Nutrition and Metabolic Care. 18: 346–353

5. Aledo JC (2004) BioEssays. 26 (7): 778–785.

6. Welbourne TC (1979). Canadian J. Biochem. 57: 233–237.

7. Abu Aboud O, Habib SL, Trott J, Stewart B, Liang S, Chaudhari AJ, Sutcliffe J, and Weiss RH(2017). Cancer Res. 77: 6746–6758.

Cell Biolabs公司位于美國加利福尼亞州南部重要的工業(yè)城市圣迭戈（San Diego），是有名的細(xì)胞學(xué)試劑品牌，作為前沿的細(xì)胞學(xué)分析檢測試劑盒生產(chǎn)商，為生物技術(shù)和研究類客戶提供好的基于細(xì)胞功能研究以及疾病等方面的高端產(chǎn)品和技術(shù)服務(wù)。產(chǎn)品主要涵蓋細(xì)胞研究、細(xì)胞信號(hào)通路和蛋白質(zhì)生物學(xué)、代謝研究、病原體和毒素、干細(xì)胞研究等領(lǐng)域。全球眾多大學(xué)、政府研究機(jī)構(gòu)、生物、制藥企業(yè)的科研實(shí)驗(yàn)室均在使用Cell Biolabs的產(chǎn)品。