組蛋白是生物體中染色質(zhì)的主要蛋白質(zhì)成分。它們作為DNA纏繞的“線軸”，并且在基因調(diào)控中發(fā)揮作用。核心組蛋白包括H2A、H2B、H3和H4。組蛋白會(huì)經(jīng)歷后翻譯修飾，這些修飾會(huì)改變它們與DNA和核蛋白的相互作用。H3和H4組蛋白具有從核小體突出的長(zhǎng)尾，這些尾部可以在多個(gè)位點(diǎn)上發(fā)生共價(jià)修飾（例如甲基化、乙酰化、磷酸化等）。組蛋白修飾參與多種生物學(xué)過(guò)程，如基因調(diào)控、DNA修復(fù)和染色體凝聚（有絲分裂）。人們認(rèn)為多種修飾的組合構(gòu)成了“組蛋白密碼”，理解這一密碼可能有助于回答有關(guān)人類發(fā)育和疾病的問(wèn)題。

艾美捷EpiQuik總組蛋白提取試劑盒（#OP-0006-100）是一套完整的優(yōu)化緩沖液和試劑，用于從哺乳動(dòng)物細(xì)胞或組織中提取總核心組蛋白（H2A、H2B、H3和H4），整個(gè)過(guò)程僅需60分鐘。提取的組蛋白保留了后翻譯修飾（PTM），因此可以與Epigentek的組蛋白修飾檢測(cè)試劑盒或用于組蛋白甲基化、乙酰化、磷酸化、SUMO化、泛素化、瓜氨酸化和ADP-核糖化研究的各種下游應(yīng)用配合使用。

EpiQuik總組蛋白提取試劑盒優(yōu)勢(shì)：

預(yù)優(yōu)化且簡(jiǎn)單的1小時(shí)協(xié)議  

方便地包含了進(jìn)行組蛋白提取所需的所有必需試劑  

標(biāo)準(zhǔn)化程序，可獲得可重復(fù)的結(jié)果  

從低至1 mg的組織中提取高產(chǎn)量的總核心組蛋白  

保留后翻譯修飾  

不影響組蛋白修飾狀態(tài)或水平

原理與操作：

EpiQuik總組蛋白提取試劑盒僅需將我們專有的組蛋白分離緩沖液應(yīng)用于細(xì)胞或組織樣本。經(jīng)過(guò)預(yù)裂解、裂解和平衡緩沖液處理后，總核心組蛋白可以輕松提取，用于即時(shí)使用或在適當(dāng)條件下儲(chǔ)存。

起始材料：

起始材料的最小量可以低至105個(gè)細(xì)胞或1 mg組織。為了獲得最佳結(jié)果，細(xì)胞數(shù)量應(yīng)大于106個(gè)細(xì)胞，或組織量應(yīng)大于10 mg。使用本試劑盒可以進(jìn)行100次標(biāo)準(zhǔn)提取（每次提取使用107個(gè)細(xì)胞或100 mg組織）。總組蛋白的產(chǎn)量約為每107個(gè)細(xì)胞或100 mg組織0.4 mg。產(chǎn)量可能會(huì)因細(xì)胞或組織類型而異。

實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)：

左圖：使用EpiQuik總組蛋白提取試劑盒從MCF-7細(xì)胞中制備組蛋白提取物，并使用EpiQuik全局乙酰化組蛋白H3K9定量試劑盒（比色法）（產(chǎn)品編號(hào)P-4010）定量乙酰化組蛋白H3-K9。  

右圖：使用EpiQuik總組蛋白提取試劑盒制備的組蛋白提取物的SDS-PAGE分析，每泳道加載10 ?g樣本（共18個(gè)樣本）。